CIULLI Alessandro Relazione Biologia Titolo : Controllo microbiologico delle superfici Scopo e Procedimenti : Verificare la presenza dei batteri su una superficie mediante il metodo della contact slide.I metodi microbiologici per verificare la presenza di batteri su una determinata superfici sono generalmente 5 : Metodo del tampone Metodo compact dry Metodo della spugna Metodo della piastra a contatto Metodo dello “slide” flessibile ( usato da noi) Il tempo richiesto per osservari dei risultati è di circa 24/48 ore poiché i batteri devono crescere secondo condizioni ideali di temperatura (ottenuta grazie ad un Armadio Termostato) e di nutrimento .Esistono due tipi di terreni batteriologici utili per la formazione di essi : i terreni batteriologici liquidi ed i terreni batteriologici solidi ( ad esempio l’AGAR, sostanza gelatinosa contenuta nelle slide ). Metodo del tampone Si prende un tampone sterile , si “striscia” su una superficie di 100 centrimetri quadrati Si trasferisce tale tampone in una provetta da laboratorio Prendere un’ aliquota di tale soluzionare e seminarla in una piastra Petri contenente terreno di crescita Si risale al numero UFC ( unità formanti colonie ) Metodo compact dry Prima di iniziare servirsi di piastrine compact dry e tampone tampoexpress Svitare il tappo del tampone, estrarre il tampone e strisciare la superficie in esame Reinserire il tampone , avvitare il tappo e rovesciare alcune volte per mescolare il contenuto Svitare il tappo superiore del tampone , togliere il tappo inferiore e fare pressione sulla parte centrale del tubo per far uscire il liquido al centro della piastrina compact dry Se necessario diluire il campione iniziale Questo metodo ci permette di individuare meglio i batteri grazie a dei substrati cromogenici che differenziano le colonie Metodo della spugna Prendere una spugna contenente una soluzione sterile e strofinarla sulla superficie in esame Trattamente stomacher e semina in piastra Metodo della piastra a contatto Appoggiare la piastra contenente il terreno di coltura sulla superficie in esame (per circa 10 secondi) Mettere la piastra in un termostato Metodo della slide flessibile è il metodo che noi abbiamo usato per individuare la presenza di batteri su una determinata superficie. Prima di iniziare il procedimento munirsi delle contact slide , ovvero di slide contenenti terreni batteriologici solidi ( in questo caso l’agar). Nella nostra esperienza abbiamo usato una contact slide avente una parte ( colore terreno giallo) utile per la conta batterica e l’ altra ( colore terreno (colore terreno viola-chiaro) utile per l’individuazione di muffe . Il metodo è il seguente Prendere la contact slide che vogliamo utilizzare ed estrarla dal suo contenitore Mettere a contatto entrambi le parti della slide contenenti agar ( sia quella avente il terreno di colore giallo , sia quella contenente il terreno di color viola chiaro) sulla superficie in esame per circa dieci secondi Reinserire la slide nel suo contenitore e metterla nell’ armadio termostato per circa 48 ore . Trascorso tale periodo,levare la slide dall’armadio termostato ed osservare i risultati Notiamo che in entrambi i terreni si sono formati colonie batteriche , quindi il metodo della contact slide è funzionato . Possiamo intuire che nella superficie analizzata non abbiamo riscontrato una presenza elevate di muffe .