Lezione 14-15 regolazione genica in procarioti 5-05-14 ClA 14 /05/2014 Batteri Procarioti aploidi senza nucleo Mutanti con fenotipo semplice auxotrofi: -incapaci di usare un particolare zucchero esempio: lac– non sanno usare lattosio come fonte di energia -incapaci di sintetizzare un particolare aminoacido esempio: trp– non crescono se non si fornisce il triptofano nel terreno resistenti ad antibiotici esempio: strR rescono anche in presenza di streptomicina Genoma piccolo Molti completamente sequenziati Quasi tutto il DNA e’ codificante Niente introni Possono essere policistronici Gli RNA batterici non contengono: introni, CAP e coda polyA Nei PROCARIOTI: una sola RNA Polimerasi e il fattore -35 TTGACA -10 TATAAT GATACT Regolazione della trascrizione Operatore: sito di legame per attivatori o repressori Il sito allosterico lega molecole di effettori e così cambia conformazione legando o meno il DNA helix-turn-helix Controllo da catabolita dell’operone Lac: Repressione della trascrizione dei geni per il metabolismo del lattosio quando c’è il glucosio Ciò dipende da un catabolita (prodotto della degradazione) del glucosio Proteina attivatrice del catabolita o CAP È un attivatore trascrizionale, lega l’operatore se c’è cAMP cAMP è un effettore allosterico Quindi esistono due diversi tipi di controllo: Repressione e attivazione • Cosa succede quando la cellula ha a disposizione sia il lattosio che il glucosio? Quindi esistono due diversi tipi di controllo: Repressione e attivazione Filmato youtube lac operon virtual cell Operone TRP Lezione 13 regolazione genica in procarioti 09-05-14 Regolazione della trascrizione Mediata dalla interazione tra elementi • in CIS: sequenze specifiche nel promotore/operatore • In Trans : proteine con ruolo attivatorio o repressorio • I regolatori spesso formano dimeri/tetrameri e possono legarsi ad effettori Mutanti di sequenze regolatorie Mutazioni sul gene I Con chi interagisce I + ? 1- Con se stesso forma un tetramero 2- Con il DNA 3- Con l’induttore ( l’allolattosio) Mutanti del gene I Lac I il gene non funziona Lac Is Lac I-d super repressore dominante negativo Lac I-q Lac I-sq di quantità In un batterio diploide parziale per l’Operone Lac , del seguente tipo i+ p+ o+ z- / i- p- o+ z+, la sintesi della ゚ galattosidasi è :a-inducibile b-costitutiva c-assente d-positiva e-parziale lattosio triptofano cAMP