"MICROBIOLOGIA ANALITICA E DIAGNOSTICA”
e
“LABORATORIO DI ANALISI MICROBIOLOGICHE STRUMENTALI E
MOLECOLARI" 8 CFU
Obiettivi formativi del corso
Il corso si propone di fornire allo studente nozioni teorico-pratiche per lo studio dei microrganismi, nonché delle
principali metodiche diagnostiche per la identificazione dei batteri, miceti e virus patogeni per l’uomo.
Programma dettagliato del corso
Tecniche di genetica batterica
La mutazione genica. Isolamento di ceppi mutanti. Base molecolare delle mutazioni. La mutagenesi: mutageni chimici,
radiazioni e trasposoni.
I plasmidi: caratteristiche e struttura. Utilizzo dei plasmidi per il clonaggio e l’espressione di proteine. Metodiche di
preparazione e purificazione di DNA plasmidico.
Trasformazione, coniugazione e trasduzione: generalità. Metodiche di trasformazione dei batteri.
Metodi di sistematica per i batteri
Microbiologia determinativa: caratteristiche. Analsi del contenuto in G+C. Studio della tassonomia microbica mediante
metodiche molecolari: vantaggi. Ibridazione DNA/DNA e analisi di sequenze geniche (rRNA).
Metodi di tipizzazione batterica.
Diagnostica microbiologica
Introduzione alla microbiologia clinica: i principali gruppi di batteri responsabili di infezioni nell’uomo
Prelievo e trattamento di campioni clinici.
Terreni per la coltivazione di microrganismi: terreni liquidi e solidi. Preparazione di terreni: la bilancia, la
sterilizzazione per filtrazione, l'autoclave e la stufa a secco.
Osservazione microscopica, isolamento ed identificazione dei batteri (metodi manuali ed automatizzati).
Tecniche per eseguire l’antibiogramma (metodi manuali ed automatizzati).
Trattamento dei campioni provenienti da infezioni respiratorie, urinarie, gastro-intestinali, sistemiche (incluso quelle del
sistema nervoso centrale), cutanee e a trasmissione sessuale.
I miceti e le micosi nell’uomo.
I virus di importanza clinica e le tecniche diagnostiche in virologia.
Nozioni generali sulla diagnosi indiretta di infezioni. Reazioni di precipitazione, agglutinazione, fissazione del
complemento e test di agglutinazione al lattice. Immunodiffusione radiale semplice e doppia. Metodi
immunoenzimatici: ELISA diretta e indiretta. Immunofluorescenza.
Metodi molecolari per la diagnosi di una infezione batterica o virale. Sonde molecolari, PCR, ligase-chain reaction,
Qbeta replicase, strand-displacement amplification, branched-DNA.
I controlli di qualità nel laboratorio di microbiologia clinica.
Prove di verifica dell’apprendimento
Microbiologia Analitica e Diagnostica: esame
Laboratorio di Analisi Microbiologiche Strumentali e Molecolari: verifica
Argomenti da conoscere per poter frequentare efficacemente il corso
Basi di Microbiologia Generale
Dati del docente
Emilia Ghelardi
Dipartimento di Patologia Sperimentale, Biotecnologie Mediche, Infettivologia ed Epidemiologia
Università di Pisa
