Presentazione Alessandra Pani - innova.re

Nuove frontiere della biomedicina per lo sviluppo di strategie diagnostiche e terapeutiche
per il management delle malattie infettive e tumorali
Dipartimento di Scienze Biomediche, Sezione di Microbiologia e Virologia
Responsabile: Prof.ssa Alessandra Pani
Presentano
Sarah Vascellari (Prioni)
Giuseppina Sanna (Virus)
Competenze e tecnologie sviluppate: come funzionano
Patologie neurodegenerative da Prioni
Drug discovery
Identificazione e caratterizzazione delle proprietà anti-prione di nuovi lead compounds
Saggi cell-based
•
•
•
Trattamento delle cellule cronicamente infettate con i composti
Valutazione inibizione della proteina prionica mediante tecniche di immunoblotting
Valutazione tossicità dei composti sulle cellule mediante saggio MTT
Saggi cell-free
•
Valutazione attività dei composti direttamente sul processo di conversione in vitro della proteina prionica mediante
tecnica di amplificazione del prione RT-QuIC
Saggi diagnostici
Identificazione biomarker periferici
Validazione nuovi metodi per la diagnosi precoce di malattie da prioni, umane e animali
Saggi cell-free
• Ricerca di biomarker diretti nei tessuti periferici per una diagnosi precoce delle malattie da prione mediante la tecnica
di amplificazione del prione RT-QuIC
Competenze e tecnologie sviluppate: come funzionano
Tumori
Drug discovery
Progettazione e identificazione delle proprietà citotossiche di nuovi lead compounds
Caratterizzazione di combinazioni di farmaci ad attività citotossica sinergica, anche in tumori farmaco-resistenti
Saggi cell-based
•
Trattamento delle linee cellulari derivate da tumori umani con i composti
•
Trattamento di tumori farmaco-resistenti con associazioni di farmaci allo scopo di revertire la farmacoresistenza
•
Valutazione dell' attivitá antiproliferativa dei composti mediante saggio MTT
•
Studio meccanismo di azione (saggi apoptosi, saggi MDR, RT-PCR per individuazione geni coinvolti
nella farmaco-resistenza)
Competenze e tecnologie sviluppate: sviluppi futuri attesi
Patologie neurodegenerative
•
Validazione in vitro di combinazioni di farmaci in grado di inibire il processo di conversione della proteina
prionica patogena come potenziale terapia anti prione.
•
Validazione del saggio di amplificazione del prione per la rilevazione precoce della proteina prionica in tessuti
periferici di interesse diagnostico (sangue ed urine) come potenziale test per la diagnosi delle malattie da
prioni umane ed animali.
Tumori
•
Validazione in vivo dell’attività anti-tumorale di combinazioni di farmaci, in un modello di tumore farmacoresistente, come potenziale trattamento per i pazienti che hanno sviluppato farmaco-resistenze alla terapia.
Competenze e tecnologie sviluppate: come funzionano
Virus
Drug discovery
identificazione e caratterizzazione delle proprietà antivirali
di nuovi lead compounds appartenenti a diverse classi di inibitori di RNA e DNA virus
Saggi cell-based
•Valutazione della citotossicità (CC50) ed attività antivirale (EC50) di composti di sintesi ed estratti naturali
attraverso: Plaque Reduction, Yield Reduction, Chemiluminescence Focus Reduction, Elisa Assays
•Valutazione dell’attività antivirale in cellule ex vivo (PBMC, cellule dendritiche, espianti cervicali)
•Time of addition, selezione di ceppi mutanti farmaco-resistenti, saggi di resistenza crociata
•Combinazioni di farmaci
•Estrazione di Acidi Nucleici, RT-PCR e PCR per amplificazione e sequenziamento di ceppi di virus wt e drug
resistant (identificazione di mutazioni coinvolte nell’insorgenza della farmaco resistenza agli inibitori identificati)
Saggi cell-free
Enzimatici - valutazione quantitativa dell’attività enzimatica di HIV Trascrittasi Inversa, HIV Proteasi, altre RNA
Polimerasi (Dengue..) in presenza di potenziali inibitori
Competenze e tecnologie sviluppate: sviluppi futuri attesi
Virus
• Identificazione e studio di nuove molecole dotate di attività antivirale da avviare verso la
sperimentazione pre-clinica
• Validazione in vitro di combinazioni di composti in grado di inibire ceppi mutanti resistenti
• Approfondire le conoscenze sulla biologia degli RNA e DNA virus e del loro ciclo di replicazione
attraverso la definizione del meccanismo d’azione di nuovi lead
• Approfondire le conoscenze sulla farmaco-resistenza
Competenze e tecnologie sviluppate: possibili applicazioni
Validazione dei dispositivi medici
(disinfettanti chimici ed antisettici)
- Prove per la citotossicità in vitro
- Valutazione dell’attività virucida
- Valutazione dell’attività anti prione
Cosa possiamo offrire e a chi
La nostra esperienza può essere rivolta ad un'azienda
 del settore farmaceutico nel campo di R&D di molecole di sintesi e/o di estratti naturali con
potenziale attività:
• antivirale nei confronti di virus da Biosafety Level 3 (HIV-1 e HIV-2, lab strains ed isolati
clinici; Dengue; West Nile; Hantaan; Dobv) ed altri virus da Biosafety Level 2 (RSV, FluA,
Vaccinia, Herpes..)
• antitumorale in linee cellulari derivate da tumori umani solidi ed ematologici ed in mutanti
tumorali che hanno sviluppato farmaco-resistenze
• anti prione in linee cellulari persistentemente infettate con il prione ( 22LSc+; RMLSc+) ed in
saggi cell free di conversione in vitro del prione (RT-QuIC)
 del settore medicale interessato a validare i propri dispositivi medici (disinfettanti chimici ed
antisettici) secondo le normative europee
Gruppo di ricerca nel campo delle
Patologie Neurodegenerative, Virologia, Tumori
Responsabile Scientifico: Prof.ssa Alessandra Pani
Post doc
Gabriele Giliberti; Silvia Madeddu; Daniela Perra; Giuseppina Sanna; Sarah Vascellari
PhD student
Elisa Carta; Elisabetta Pinna; Robert Szabo; Rossana Tuveri
Student
Fabio Contu
Collaborazioni
NIH, National Institute of Health (Hamilton, Montana USA)
ISS, Istituto Superiore di Sanitá (Roma, Italy)
SISSA, Scuola Superiore Internazionale di Studi Avanzati (Trieste, Italy)
UCT, Universitá di Cape Town (Cape Town, South Africa)
UniVr, Universitá di Verona (Verona, Italy)
Leibnitz, Leibnitz Institute of Plant Biochemistry (Weinberg, Germany)
SAS, Accademia Slovacca delle Scienze (Bratislava, Slovacchia)
RAS, Accademia Russia delle Scienze (Mosca, Russia)
Chemical companies (Marsiglia, Francia)
Contatti
Prof.ssa Alessandra Pani
Dipartimento di Scienze Biomediche, Sez. Microbiologia e Virologia,
Universitá di Cagliari
Cittadella Universitaria
09042- Monserrato (CA)
email: [email protected]
https://monserrato.microbiologia.ca.it/exchweb/bin/redir.asp?URL=http://dipartim
enti.unica.it/scienzebiomediche/ricerca/sezioni/microbiologia-e-virologia/