PREPARAZIONI DI ORGANI ISOLATI IN FARMACOLOGIA in vitro ESPERIMENTI ex vivo Soluzioni saline fisiologiche Temperatura Aereazione Apparati di registrazione Stimolazione Composizione ionica Substrati energetici Tamponi Osmolarità COMPOSIZIONE DI ALCUNE SOLUZIONI FISIOLOGICHE Composizione ionica Substrati energetici glucosio acetato, lattato, piruvato miscele di aminoacidi Tamponi Osmolarità Substrati energetici Tamponi Bicarbonato Fosfato Osmolarità Substrati energetici Tamponi Osmolarità utilizzo di sangue completo; aggiunta di BSA aggiunta di sostanze varie (es. destrano) aggiunta di saccarosio Soluzioni saline fisiologiche Temperatura k(t+10) Q10 = kt Aereazione Apparati di registrazione Stimolazione Soluzioni saline fisiologiche Temperatura Aereazione Apparati di registrazione Stimolazione Soluzioni saline fisiologiche Temperatura Aereazione Apparati di registrazione Stimolazione CONTRAZIONE ISOTONICA REGISTRAZIONE DI UNA CONTRAZIONE ISOTONICA CONTRAZIONE ISOMETRICA REGISTRAZIONE DI UNA CONTRAZIONE ISOMETRICA Soluzioni saline fisiologiche Temperatura Aereazione Apparati di registrazione Stimolazione elettrodi puntiformi elettrodi a campo VALUTAZIONE QUANTITATIVA DEGLI EFFETTI FARMACOLOGICI DOSI SINGOLE E DOSI CUMULATIVE PREPARATI DI MUSCOLATURA SCHELETRICA NERVO FRENICO-DIAFRAMMA DI RATTO (I) NERVO FRENICO-DIAFRAMMA DI RATTO (II) MUSCOLO RETTO ADDOMINALE DELLA RANA Muscolatura liscia intestinale Ileo di cavia Digiuno di coniglio Muscolatura liscia vascolare Striscia di aorta di coniglio Altri preparati di muscolatura liscia Striscia del fondo di stomaco di ratto Utero di ratto Catena tracheale di cavia Dotto deferente di cavia ILEO DI CAVIA: PRELIEVO DEL PREPARATO ILEO DI CAVIA: LAVAGGIO DEL PREPARATO ILEO ISOLATO SECONDO TRENDELENBURG Muscolatura liscia intestinale Ileo di cavia Digiuno di coniglio Muscolatura liscia vascolare Striscia di aorta di coniglio Altri preparati di muscolatura liscia Striscia del fondo di stomaco di ratto Utero di ratto Catena tracheale di cavia Dotto deferente di cavia DIGIUNO DI CONIGLIO: PRELIEVO DEL PREPARATO DIGIUNO DI CONIGLIO SECONDO LA TECNICA DI MAGNUS DIGIUNO DI CONIGLIO: PRELIEVO SECONDO LA TECNICA DI FINKELMAN DIGIUNO DI CONIGLIO SECONDO LA TECNICA DI FINKELMAN Muscolatura liscia intestinale Ileo di cavia Digiuno di coniglio Muscolatura liscia vascolare Striscia di aorta di coniglio Altri preparati di muscolatura liscia Striscia del fondo di stomaco di ratto Utero di ratto Catena tracheale di cavia Dotto deferente di cavia STRISCIA DI AORTA DI CONIGLIO: PRELIEVO E ALLESTIMENTO DEL PREPARATO STRISCIA DI AORTA DI CONIGLIO PREPARAZIONI DI MUSCOLATURA CARDIACA 1. Preparati che utilizzano il cuore in toto Cuore isolato e perfuso alla Langendorff 2. Preparati che utilizzano porzioni di muscolo cardiaco a) atri b) strips di ventricolo c) muscolo papillare ATRI DI CAVIA ISOLATI ATRI DI CAVIA ISOLATI MUSCOLO PAPILLARE Atri isolati di cavia Stimolazione elettrica ad una frequenza superiore a quella spontanea (240/min) tramite impulsi elettrici della durata di 0.5-1.0 msec e di ampiezza pari al doppio della soglia. L’intensità dello stimolo si misura in Volt o in Ampere a seconda che si disponga di uno stimolatore a voltaggio costante o a corrente costante. I valori usati sono generalmente intorno a 5V oppure a 5 mA. Muscolo papillare di cavia o di ratto Striscia di ventricolo di cavia o di ratto La frequenza ottimale di stimolazione per ambedue i preparati è di 60/min. Si può usare una frequenza più elevata, per es. 150/min, quando si devono studiare gli effetti di farmaci che possono attivare processi di automatismo anomalo e che tendono quindi a provocare aritmie. Si usano stimoli della durata di 0.5-1.0 msec e di ampiezza pari al doppio della soglia (circa 5V o 5mA). Test sull’attività di farmaci antiaritmici a) Misura della massima frequenza seguita b) Misura del periodo refrattario funzionale MUSCOLO PAPILLARE isometric