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CORSO TEORICO-PRATICO DI EMATOLOGIA DI LABORATORIO:
IL REFERTO EMATOLOGICO
Revisione critica della tecnologia
emocromocitometrica in uso
Immacolata Cierro
UNICEL DXH 800
1. MIGLIORE ACCURATEZZA DEI RISULTATI
2. MIGLIORE EFFICIENZA DELLE SEGNALAZIONI (FLAG)
3. INCREMENTO DELL’EFFICIENZA DEL LABORATORIO
165 µL di sangue
Tecnologia Coulter
Principio Impedenziometrico Coulter
per il conteggio e il dimensionamento di:
Globuli Rossi (RBC)
Piastrine (PLT)
Globuli Bianchi (WBC)
Tecnologia VCS
per l’analisi differenziale della:
Formula Leucocitaria a cinque popolazioni
Reticolociti
Principio Impedenziometrico Coulter
Le cellule, opportunamente diluite in una soluzione elettrolita in grado di
condurre la corrente elettrica, vengono forzate a passare attraverso
un’apertura a cui è applicata una corrente elettrica di intensità costante.
La doppia membrana lipidica delle cellule agisce da isolante del campo
elettrico, opponendosi al passaggio di corrente ,che fluisce in modo
continuo.
L’aumento di resistenza viene registrato sotto forma di impulso elettrico ed
è direttamente proporzionale alla dimensione della cellula che lo ha
prodotto e consente di misurare in modo accurato il volume cellulare.
LINFOCITI
NEUTROFILI
BASOFILI
MONOCITI
EOSINOFILI
Controlli di qualità interna
I controlli vengono effettuati per verificare
la precisione e l’accuratezza strumentale
Coulter Latron
sospensione di particelle in lattice per la verifica di volume-conduttività-scatter
( controllo prestazioni formula leucocitaria, reticolociti, NRBC)
Coulter 6c Control
3 livelli: valutazione di tutti i parametri ematologici.
Confezioni dotate di provette contrassegnate da barcode che permettono la loro
rapida identificazione
Retic Control
3 livelli: conteggio dei reticolociti
Quali reagenti?
Diluent: soluzione elettrolitica isotonica utilizzata per la
diluizione di sangue intero, per il conteggio e il dimensionamento
degli elementi cellulari e per la differenziazione di formula
leucocitaria a cinque popolazioni.
Dxh Cell Lyse : reagente utilizzato per la determinazione
spettrofotometrica dell’emoglobina, per il conteggio e il
dimensionamento dei Globuli Bianchi e la determinazione degli
eritroblasti su canale dedicato.
Dxh Retic Pak : reagente utilizzato dagli analizzatori ematologici
per il conteggio e l’analisi dei parametri reticolocitari, la
confezione comprende due reagenti distinti.
Quali reagenti?
Dxh Diff PACK : reagente utilizzato per l’analisi differenziale della
formula leucocitaria a cinque popolazioni.
La confezione comprende due reagenti distinti :
- lisi selettiva dei Globuli Rossi
- stabilizzazione e protezione delle membrane cellulari dei Globuli
Bianchi e la conservazione del volume e della morfologia delle
cellule leucocitarie.
DxH Cleaner : detergente utilizzato dagli analizzatori ematologici
per il mantenimento dell’efficienza delle componenti interne che
vengono a contatto con il sangue intero dei campioni ( camere di
conteggio , valvole, sistema fluidico).
Quale manutenzione?
Aggiunta cleaner
Rimozione Cleaner
Verifica di sistema
Controlli quotidiani
Manutenzione giornaliera: (3 ore)
Allarmi?
Allarme 1:
La tensione della cella di flusso ha superato il range atteso, possibile
ostruzione.
Azioni/Soluzioni
-
Eseguire la procedura di lavaggio Flush flow cell per 15 minuti
Avviabile sia nella sezione manutenzioni dello strumento che direttamente a
livello della camera VCS
Allarmi?
Allarme 2:
Impossibile adescamento del diluent
Azioni/Soluzioni
- Eseguire la procedura di manutenzione “prime diluent”
Avviabile nella sezione manutenzione, richiede un fermo
macchina di circa mezz’ora e nessun campione può essere
analizzato fino al suo termine con successo.
Allarmi?
Allarme 3:
raggiunto il numero di voteout parziali
Azioni/Soluzioni
Eseguire la procedura di lavaggio nella sezione manutenzioni “clean aperture”.
Procedura guidata di circa 4 passaggi:
1. Lavaggio con ipoclorito di sodio al 5% per 15 minuti,
2. Aspirazione con acqua distillata per 15 minuti,
3. Avviare una procedura di arresto dello strumento di almeno 30 minuti
4. Controllare lo strumento mediante i controlli coulter 6c.
Allarmi?
Allarme 4:
raggiunto il numero di massime corrispondenze
Azioni/Soluzioni
Nessuna procedura
E’ un semplice errore di interfacciamento del software strumentale con il
programma di validazione Modulab
Lo strumento non ha ancora ricevuto tutte le informazioni necessarie per
poter analizzare il campione ed è possibile che il campione in esame venga
saltato arbitrariamente dallo strumento.
Bisogna a questo punto rivedere l’errore e prestare attenzione ai campioni
non analizzati.