Significato e ruolo delle - Università degli Studi di Firenze

SCOPO DELLA RICERCA
Significato e ruolo delle cellule dendritiche plasmocitoidi nella psoriasi.
Scopo del progetto è quello di studiare il possibile ruolo svolto dalle cellule dendritiche
plasmocitoidi nella patogenesi della psoriasi e le loro modificazioni in seguito a trattamento
sistemico sia convenzionale che biologico.
In particolare, il programma di ricerca ha per oggetto alcuni dei meccanismi coinvolti nella
patogenesi della psoriasi, e il confronto della loro risposta durante la somministrazione di terapie
sistemiche convenzionali (Ciclosporina A) o biologiche (anti-TNF-alpha, anti-IL12/23). Alla base
del processo patogenetico è infatti ipotizzata sulla base di concrete evidenze sperimentali una
complessa interazione tra linfociti T, cellule dendritiche (presentanti l’antigene), cellule natural
killer (NK), cellule epidermiche (cheratinociti) e cellule endoteliali, che si attua attraverso la
modulazione della produzione e secrezione di specifiche citochine e chemochine e dell’espressione
dei loro recettori. La nostra attenzione sarà particolarmente focalizzata sulle cellule dendritiche
(CD), cellule dell’immunità innata che sempre più si caratterizzano come effettori cruciali nella
modulazione delle risposte flogistiche cutanee attivando ed orientando la risposta immunitaria
specifica. Le CD infatti, in qualità di cellule presentanti l’antigene professionali, occupano una
posizione centrale nel nostro sistema immunitario: producono citochine proinfiammatorie,
chemiotattiche e immunostimolanti (TNF-alpha, IFN-gamma, IL-12, IL-23 e IL-15) importanti
nella patogenesi della malattia, attivano i linfociti T e ne guidano il differenziamento verso il
fenotipo Th-1 e Th-17, inducono l’espressione di molecole di adesione (ICAM-1) che aumentano la
velocità di divisione epidermica fino a otto volte. Le CD, in particolare le CD plasmocitoidi, hanno
un ruolo chiave nelle fasi iniziali della psoriasi in quanto attivano i linfociti T effettori,
rappresentando inoltre un possibile target terapeutico. Recenti dati della letteratura hanno
dimostrato la presenza nella cute lesionale di pazienti psoriasici di CD mieloidi, sia mature che
immature, e CD plasmocitoidi.
L’end point primario dello studio è rappresentato dall’analisi della presenza,
immunofenotipo, stato differenziativo e funzionale delle varie sottopopolazioni di CD, in
particolare delle CD plasmocitoidi, sia a livello cutaneo che periferico (sangue circolante) in
pazienti psoriasici in trattamento con farmaci sistemici convenzionali e farmaci biologici.
Disegno dello studio
Lo studio, che ha ottenuto l’approvazione del Comitato Etico dell’Azienda Sanitaria di
Firenze e che verrà svolto sotto il diretto controllo della Dr.sa Francesca Prignano (Dirigente
Medico della SC Dermatologia II ASF) e sotto la diretta responsabilità del P.I. (Prof. Nicola
Pimpinelli, responsabile della suddetta struttura), prevede l’arruolamento di un totale di 60 pazienti
affetti da psoriasi volgare cronica di grado severo (PASI>10), di entrambi i sessi, di età compresa
tra i 18 e i 65 anni, divisi nei seguenti gruppi: gruppo A, costituito da 20 pazienti in trattamento con
terapia immunosoppressiva sistemica convenzionale (ciclosporina A, al dosaggio standard di 3
mg/Kg/die); gruppo B, costituito da 20 pazienti in trattamento immunosoppressivo sistemico con
farmaci biologici (Etanercept, al dosaggio di 50 mg/settimana s.c.; Adalimumab, al dosaggio di 40
mg ogni 2 settimane s.c.; Ustekinumab, al dosaggio di 45 mg ogni 12 settimane s.c.); gruppo C,
costituito da 10 pazienti senza nessun trattamento topico o sistemico in atto; gruppo D, costituito da
10 pazienti senza alcun trattamento da almeno 6 mesi.
Saranno raccolte le informazioni antropometriche ed anamnestiche e saranno valutate le
caratteristiche della malattia (durata, gravità e sedi coinvolte) e dei trattamenti farmacologici, sia
quelli precedentemente intrapresi che quelli in atto. Ciascun paziente arruolato nello studio sarà
quindi sottoposto, previo consenso informato, a prelievo ematico per analisi al citofluorimetro e ad
un prelievo bioptico per analisi immunoistochimica.
La presenza ed il fenotipo delle CD a livello cutaneo verrà valutata attraverso la lettura al
microscopio ottico dei preparati di immunoistochimica da parte di due differenti operatori e verrà
numericamente quantificata come numero medio di cellule per campo di osservazione (valutato in 5
campi microscopici non adiacenti). La presenza di CD nel sangue periferico verrà analizzata e
quantificata automaticamente attraverso lettura al citofluorimetro, come percentuale di CD su totale
di cellule circolanti.
La risposta al trattamento verrà valutata attraverso il calcolo dell’indice PASI (Psoriasis
Area and Severity Index). La valutazione della tollerabilità e sicurezza del trattamento non rientra
tra gli obiettivi dello studio; verranno comunque esclusi dallo studio quei pazienti che
presenteranno effetti collaterali tali da sconsigliarne la prosecuzione e/o mancata risposta
terapeutica al farmaco.
Il responsabile della ricerca
Prof. Nicola Pimpinelli