14 Febbraio 2016
Single cell RNA sequencing
per l’identificazione delle cellule staminali
Dott.ssa Ilaria Decimo
Docente di Farmacologia, Universita’di Verona
Lettura e interpretazione dell’RNA
PCR
Sequenziamento=lettura del DNA
Interpretazione del codice
Mutazioni e sequenze specifiche di GENI
Terapia del cancro
Modificazioni del DNA
(DNA ricombinante)
Produzione di
farmaci
Modelli sperimentali ad
esempio espressione di
proteine fluorescenti,
animali transgenici
Single cell RNA sequencing
Lettura dell’ RNA di una singola cellula per identificarne il fenotipo
Identificazione di una nuova popolazione
di cellule staminali neurali nelle meningi
Cosa sono le cellule staminali?
La cellula
Perché le cellule staminali
sono speciali?
Posssono moltiplicarsi/ self renewal
Possono specializzarsi/differentiation
Self renewal
La divisione cellulare -> moltiplica il numero di cellule
Tutte le cellule derivano
da altre cellule
Rinnovamento cellulare
La cellula staminale si moltiplica
Differentiation
Capacita’ rigenerativa !
Esempi di capacità rigenerativa presenti in natura
Esempi di capacità rigenerativa presenti in natura
Le cellule staminali nell’uomo
Ovocita
fecondato
Embrione
3 giorni
Embrione
5-7 giorni
Cellule Staminali
Embrionali
Pluripotenti
Embrione
4 settimane
Embrione
6 settimane
Cellule
Staminali
Fetali
Multipotenti
Cellule somatiche
riprogrammate
Cellule Staminali
Adulte (Somatiche)
Multipotenti
Cellule Staminali Cordonali e
della Placenta
Pluripotenti o Multipotenti
Cellule staminali
pluripotenti
indotte (iPS)
Pluripotenti
Le cellule staminali adulte
E’ possibile far
cambiare idea a una
cellula specializzata?
Neural cell
Reprogramming
Premio Nobel per la medicina 2012
John Gurdon 1962
Shinya Yamanaka 2006
Reprogramming
Stem cell
iPS
inducible pluripotent stem cells
Medicina rigenerativa
Trapianto delle cellule
staminali per riparare
i tessuti danneggiati
Stimolazione delle
cellule staminali che
esistono gia’
nell’organismo umano
adulto per poter
rigenerare i tessuti
danneggiati
Abbiamo scoperto tutto?
NOOOOOO
La ricerca genera nuove domande
Voi studiate sui libri quello che i vostri genitori non sapevano………..
Molte nuove imprevedibili scoperte verranno fatte…………..e sarete voi
a scrivere i Iibri su cui studieranno i vostri figli
Il futuro é imprevedibile,
ma questo e’ quello che rende il presente interessante
La neurogenesi nell’ adulto avviene nei bulbi olfattivi e
nell’ippocampo
rry
ction
Estrazione della meninge
Omogenizzazione del tessuto: meccanica
Omogenizzazione del tessuto: meccanica
Omogenizzazione del tessuto:
enzimatica
Le cellule vengono piastrate
RNA extraction
RNA extraction
Singola cellula
Singola cellula
Singola cellula
Reverse transcriptase-PCR
Bioinformatica
Bifari, Decimo et al 2017 Cell Stem Cell
Le meningi contengono cellule staminali neurali
Bifari, Decimo et al 2017 Cell Stem Cell
Bifari, Decimo et al 2017 Cell Stem Cell
