GENEQUALITY β-Glob CARATTERISTICHE TECNICHE Cod. 05-60 NUMERO DI TEST: 25 o 50 test. Sistema per l’amplificazione del gene della βglobina STABILITA’: 6 mesi. MATERIALE DI PARTENZA: DNA estratto da tutti i campioni clinici cellulari. REGIONE AMPLIFICATA: gene della β-Globina. INTRODUZIONE Le emoglobine sono proteine tetrameriche: nell’adulto la più rappresentata (97% circa) è l’HbA, costituita da due catene α e due catene β globiniche. Il gene β globinico è localizzato nel genoma umano sul braccio corto del cromosoma 11 (11p15.5). Si tratta di un piccolo gene di circa 1600 bp, costituito da tre esoni e due introni. Fa parte di un cluster genico della dimensione di circa 50 Kb, in cui si susseguono i vari geni di tipo β che l’organismo utilizza nei successivi stadi dello sviluppo. CONTROLLO POSITIVO: DNA plasmidico ricombinante contente parte del gene β-Globina. AMPLIFICAZIONE: in provette monodose pronte all’uso. RIVELAZIONE: elettroforesi su gel di agarosio. SPECIFICITA’: L’allineamento dei primer nelle più comuni banche dati ha rivelato l’assenza di appaiamenti aspecifici. Non sono stati rilevati fenomeni di cross reazione con DNA genomico o acidi nucleici di altri microrganismi patogeni. PROCEDURA DNA ESTRATTO B AMPLIFICAZIONE Premix monodose pronta all’uso VISUALIZZAZIONE 1 2 3 4 5 Il gene della β globina è un gene housekeeping cioè coinvolto in funzioni basilari necessarie per il sostentamento della cellula. I geni housekeeping sono espressi costitutivamente in tutte le cellule. Trovandosi nel genoma di tutte le cellule umane, per campioni clinici cellulari, l’amplificazione del gene della β globina può costituire un valido controllo relativamente al processo di estrazione del DNA. Un risultato negativo nell’amplificazione del gene della βglobina indica la presenza di inibitori della reazione di amplificazione nell’estratto o di DNA altamente degradato. Questo valido strumento aiuta l’operatore a riconoscere eventuali falsi negativi per il target diagnostico indagato, sia esso virale che genomico. Gel di agarosio Fig 1: Elettroforesi in gel di agarosio al 3% 1: Campione A 2: Campione B 3: Controllo positivo 4: Controllo negativo 5: marcatore di peso molecolare INFORMAZIONI PER GLI ORDINI Cod 05-60A 05-60R Prod β-Glob β-Glob -amplification reagents Confez. 25/50 test 25/50 test SCH_TEC_BGlob_R090408 AB ANALITICA srl Via Svizzera 16 – 35127 PADOVA – ITALIA Tel. 049 761698 - Fax 049 8709510 e-mail: [email protected] www. abanalitica.it