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Influenza A rapid test
Scopo Diagnostico
Il test Influenza A è un saggio rapido qualitativo per la diagnosi dell’antigene
(nucleoproteina) dell’influenza di tipo A (incluso il sottotipo H1N1)., estratto da campioni
di muco nasali. Il test è adoperato come ausilio nella diagnosi dell’infezione dell’influenza
di tipo A.
Sommario
L’influenza (comunemente nota come Asiatica) è una infezione acuta virale, altamente
contagiosa, del tratto respiratorio. E’ facilmente trasmissibile attraverso il tossire e lo
starnutire di goocioline di saliva contenenti il virus attivo nell’aria. Le epidemie di
influenza si verificano ogni anno durante i mesi autunnali ed invernali. Ci sono tre tipi di
virus influenzali: A, B e C. I virus dell’influenza A sono stai ulteriormente classificati in
sottotipi in base alle due principali glicoproteine emoagglutinine (HA) e Neuramidasi
(NA) di superficie. I sottotipi dell’influenza A e i virus dell’influenza B sono ulteriormente
classificati in base ai ceppi. Gli umani possono essere infettati con i virus dell’influenza A,
B e C.
I sottotipi dell’influenza A. che sono attualmente diffusi a livello mondiale nelle persone
includono i virus H1N1, H1N2, e H3N2. I virus dell’influenza B possono causare
mortalità e morbilità tra gli umani., ma in generale sono associate a epidemie meno
importanti rispetto a quelle dei virus dell’influenza A.
Benché i virus dell’influenza B possano causare epidemie umane, non possono causare
pandemie. I virus influenzali di tipo C causano malattie lievi negli umani e non sono causa
di epidemie o pandemie.
Principio del test
Il test influenza A è un saggio rapido immunocromatografico per la diagnosi visiva
dell’antigene (nucleoproteina) dell’influenza di tipo A estratta da campioni di muco nasali.
Il test adopera un metodo a sandwich a doppio anticorpo. Quando il campione estratto
viene aggiunto al dispositivo diagnostico, viene assorbito tramite azione capillare
miscelato con l’anticorpo-coniugato colorato e fluisce attraverso la membrana pre-adesa
con anticorpo monoclonale di influenza di tipo A.
Quando i livelli di antigene di influenza di tipo A raggiungono il livello del Cut-Off (limite
diagnostico del test) o sono superiori a esso, l’antigene di tipo A presente nel campione si
lega ad uno specifico coniugato-anticorpo colorato ed è catturato dall’anticorpo
monoclonale i tipo A adeso nel relativo sito della regione T del mezzo diagnostico. Ciò
crea una banda colorata nella regione del Test.
Quando i livelli dell’antigene dell’influenza di tipo A sono zero o inferiori al Cut-Off, non
si crea nessuna banda visibile nella regione del test. Ciò indica un risultato negativo per
l’influenza di tipo A. come procedura di controllo, una linea colorata apparirà nella
regione di Controllo C, se il test è stato eseguito correttamente.
Materiale
• Cards
• Tamponi sterili
• Dispensatori per gocce
• Soluzione reagente di estrazione
• Provette di estrazione
• Contenitore provette
• Metodica
Conservazione e stabilità
• Conservare tra 4 e 30 °C nel contenitore sigillato fino alla data di scadenza.
• Tenere lontano dalla luce, umidità e calore
• Non congelare
Prelievo e preparazione dei campioni
• Preparare il tampone nasale provvisto, tirare indietro la testa del paziente
formando un angolo di 70°C ed inserire delicatamente il tampone nasale nella
narice in cui è presente maggiore secrezione.
• Ruotare e spingere molto delicatamente il tampone finché si incontra la resistenza
dei turbinati. Ruotare delicatamente il tampone contro la parete nasale per alcune
volte.
• I campioni danno risultati migliori se testati subito dopo il prelievo, se ciò non è
possibile, il tampone deve essere posto in una provetta sterile e asciutta di plastica
(non provvista) e conservata tra 2 – 4°C per massimo 8 ore.
Procedura
• Far raggiungere a tutte le card, campioni e tampone di estrazione la temperatura
ambiente (10-30°C) prima del test
• Usare una provetta di estrazione (provvista) per ciascun campione che deve essere
testato ed etichettare ciascuna provetta.
• Tenere il flacone del tampone di estrazione in verticale sopra la provetta di
estrazione e versare sei gocce nella provetta.
• Mettere il tampone col campione nella provetta e girarlo per 10 volte premendo la
testa del tampone contro la provetta per far rilasciare il campione.
• Rimuovere il tampone dalla provetta premendo sulla parete della stessa in modo da
ottenere più liquido possibile. Tappare la provetta e agitare delicatamente per
miscelare i contenuti. I campioni estratti devono essere testati immediatamente.
• Rimuovere la card dal suo contenitore sigillato. Dispensare 3 – 4 gocce (80µl- 100µl) di campione estratto dalla provetta di estrazione nel pozzetto campione
invertendo e spremendo la provetta.
•
Leggere i risultati dopo 15 – 20 minuti. Non leggere dopo 30 minuti.
Interpretazione dei risultati
Positivo (+)
Bande colorate sono visibili in entrambe le regioni del Controllo e del Test. Ciò indica un
risultato positivo per l’antigene dell’influenza di tipo A
Negativo (-)
Una banda colorata visibile solamente nella regione Controllo. Nessuna banda colorata
nella regione del Test. Ciò indica che la concentrazione dell’antigene dell’influenza di tipo
A è zero o al di sotto del limite diagnostico del test.
Invalido
Nessuna banda visibile, oppure c’è solo una banda visibile nella regione del Test ma non
in quella di Controllo. Ripetere il test. Se persistono il problemi contattare per assistenza.
Controllo qualità
Una procedura di controllo è inclusa nel test. La linea colorata che appare nella regione
controllo ( C) è considerata una procedura interna di controllo. Essa conferma che è stato
adoperato adeguato volume di campione, ci sia stato corretto flusso di membrana e
corretta procedura tecnica. La buona pratica di laboratorio raccomanda l’uso di materiali
di controllo. Gli utilizzatori dovrebbero seguire le appropriate linee guida locali e statali
concernenti la frequenza di controlli esterni di qualità.
Limiti della procedura
• Il test è stato sviluppato solamente per campioni di secrezioni nasali.
• La diagnosi va confermata, come per tutte le procedure diagnostiche, dopo che
tutte le indagini cliniche e di laboratorio siano state valutate.
• Un test negativo può verificarsi se nel campione il livello dell’antigene è al di sotto
del limite diagnostico del test, o può dipendere da inappropriato prelievo del
campione.
• Un test negativo non esclude altre infezioni virali non influenzali.
• Risultati positivi non escludono co-infezioni con altri agenti patogeni e non
identifica gli specifici sottotipi del virus dell’influenza A
Sensibilità: 91.3%
Specificità: 95,7%
Reattività Analitica:
Il kit è stato testato con i seguenti sottopiti di influenza A indicati nella tabella sottostante.
Tutti hanno mostrato risultati positivi. Tuttavia lo specifico ceppo di influenza A può
variare di anno in anno. Tutte contengono le nucleoproteine rilevate dal kit.
• A/14160 (H1N1)
•
•
•
•
•
•
•
•
A/MEN30 (H1N1)
A/22130 (H1N1)
A/2361 (H1N1)
A/44045 (H3N2)
A/924 (H3N2)
H3/05-349
A/Beijing/302/54 (H5N1)
A/swine/Guangdong/2/01 (H1N1)
REF: BET-INF-A01
CF. 10 Test
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