Corso di Laurea: BIOLOGIA MOLECOLARE E CELLULARE Nome del corso: BIOLOGIA MOLECOLARE 2 (183EE) Responsabile del corso Altri docenti Numero di CFU Lezioni frontali Laboratori Esercitazioni Obiettivi formativi del corso Vittoria Raffa 6 0 0 Contenuti Approfondimento di meccanismi di regolazione dell’espressione genica a livello trascrizionale, post-trascrizionale e post-traduzionale. Strategie di editing genomico. Nanomedicina applicata alla Biologia Molecolare. Metodi di indagine aggiornati per analizzare interi genomi/epigenomi, i profili di espressione di interi genomi e le interazioni dei prodotti genici. Risultati attesi Il corso si propone di ampliare le conoscenze sui meccanismi di controllo del flusso dell’espressione genica dal nucleo al citoplasma. Altro scopo del corso è quello di apprendere le strategie sperimentali attualmente in uso per elucidare i meccanismi molecolari trattati e quelli ancora incompresi. Scopo del Corso nell’ambito del Corso di Laurea Fornire allo studente una panoramica della complessità della biologia molecolare moderna e gli strumenti per la comprensione, analisi e risoluzione di problemi complessi secondo un approccio su larga scala. Argomenti trattati nelle lezioni frontali Definizione di gene, genoma, epigenoma, trascrittoma, proteoma. Struttura del genoma: geni codificanti proteine, geni codificanti RNA, geni essenziali, geni costitutivi, pseudo geni. Editing genomico: nuovi metodi per l’ingegnerizzazione dei genomi: metodi basati su ZFN, TALEN, and CRISPR/Cas. Scienze “omiche” e concetto di “system biology”. Studio dei genomi e strategie di sequenziamento “Top down e shotgun”. Progetto ENCODE. Banche di EST e SAGE per analisi di profili di espressione. Microarray e espressione differenziale a livello di gene, esone e splicing alternativi. RNAseq. Sequenziamento a singola molecola. Tecniche di biologia molecolare per analisi di proteine Spettrometria di massa (ESI e Maldi). Problematiche della proteomica e nuovi approcci per analisi di proteine e proteomi basati su nanotecologie. Interattomica: analisi di reti di interazioni proteiche e studio dei domini di interazione. Attività di laboratorio Studi di interattomica: metodi analitici (pull-down, TAP) e metodi sintetici (Phage Display, Doppio Ibrido). Nanomedicina: nuove strategie di “terapia cellulare”. Regolazione dell’espressione genica a livello trascrizionale: promotori, enhancers, fattori di trascrizione, attivatori, coattivatori e repressori trascrizionali e saggi relativi per l’identificazione. Struttura dei nucleosomi, modifiche epigenetiche a carico di proteine istoniche e DNA e regolazione dell’espressione genica. Introduzione all'epigenomica e studi su larga scala: ChIP-chip e ChIP-Seq. Rivelazione delle citosine metilate mediante studi su larga scala basati su differenti metodologie. Maturazione e trasporto mRNA, stabilita’ degli mRNA e meccanismi di degradazione. Esportazione nucleare degli mRNA. Ruolo delle hnRNP Regolazione espressione genica post-trascrizionale: localizzazione intracellulare degli RNA e sintesi proteica “in loco”. Meccanismi molecolari: protezione da degradazione e trasporto attivo. Strutture Zipcode e proteine RNA binding. Controllo traduzionale e post-traduzionale. Modificazioni delle proteine. Chaperon molecolari e ripiegamento delle proteine Sistemi di sumoilazione e ubiquitinazione. "Trafficking" vescicolare, endo- eso-citosi. Trafficking proteico e segnali di smistamento. Non previste Esercitazioni Non previste Materiale didattico consigliato Testi di riferimento Melino G. - Argomenti di Biologia Molecolare - Edizioni SEU Gibson G - A primer of Genome Science - II ed. SinauerAmaldi F. Biologia Molecolare – seconda edizione Articoli scientifici originali Banche dati Articoli e review relative ai vari argomenti Altro Power Point delle lezioni Modalità di svolgimento delle Orale prove di esame Propedeuticità (indicare Laurea triennale in Biologia solo se previste dal Regolamento) Conoscenze richieste Biologia Molecolare di base, Genetica, Biochimica