Biologia MOLECOLARE DEGLI EUCARIOTI

INSEGNAMENTO
SETTORE SCIENTIFICO DISCIPLINARE
ANNO DI CORSO
SEMESTRE
CFU TOTALI
MODALITA’ DI VERIFICA DEL PROFITTO
BIOLOGIA MOLECOLARE DEGLI EUCARIOTI
BIO/11
I
II
6
SCRITTO E ORALE
OBIETTIVI DELL’INSEGNAMENTO:
Il corso si propone di fornire conoscenze relative ad alcuni processi coinvolti nel controllo dell’espressione genica
in eucarioti e ai sistemi maggiormente utilizzati nelle analisi trascrizionali.
TESTI CONSIGLIATI:
-
R.F. Weaver “Biologia Molecolare” McGrow-Hill
R.J. Reece “Analisi dei geni e genomi” EdiSES
G. Gibson e S. Muse “Introduzione alla Genomica” Zanichelli
B. Lewin “Il gene VIII” Zanichelli
J.Watson et al. “DNA Ricombinante” Zanichelli
PROGRAMMA DELL’INSEGNAMENTO:
SISTEMI DI ESPRESSIONE
MICRORGANISMI EUCARIOTI:
il lievito Saccharomyces cerevisiae. Trasformazione di lievito. Marcatori auxotrofici e
dominanti. Vettori (integrativi ed episomici). Biologia del 2 micron. Gene targeting e inattivazione genica. Vettori di
espressione e secrezione per lievito. Promotori costitutivi ed inducibili. Sistema GAL. Sistema Tet-on e Tet-off.
ANALISI DELL’ESPRESSIONE GENICA E DELLE INTERAZIONI FRA MACROMOLECOLE
Real Time PCR (Sybr green e sonde fluorescenti), Curve di melting, Real Time PCR quantitativa (relativa ed
assoluta). Microarray a oligonucleotidi e a cDNA (spotting e fotolitografia, marcatura e disegno sperimentale);
analisi dei dati (validazione e clustering). Chromatin Immunoprecipitation (ChIP). ChIP on chips. Sistema onehybrid e two-hybrid.
REGOLAZIONE TRASCRIZIONALE IN EUCARIOTI
Repressione trascrizionale promotore e regione-specifica. Silenziamento, modello di assemblaggio della cromatina
silente in lievito.
RNA interference: processo molecolare e ruoli fisiologici. Utilizzo di siRNA per generare fenotipi di perdita di
funzione.
DNA
presentazione di dati originali mediante analisi di lavori scientifici
RISPOSTA CELLULARE AL DANNO AL
MECCANISMI DI RIMODELLAMENTO DELLA CROMATINA ED ESPRESSIONE GENICA
presentazione di dati originali mediante analisi di lavori scientifici