LORENZO STELLA Biofisica strutturale Richiami generali di spettroscopia. o La radiazione elettromagnetica o Velocità di propagazione, lunghezza d’onda, frequenza ed energia della radiazione. o Quantizzazione dell’energia: fotoni e livelli energetici. o Lo spettro elettromagnetico ed i gradi di libertà elettronici, vibrazionali e rotazionali. Richiami di spettroscopia di assorbimento. o La legge di Lambert-Beer. o Scelta delle condizioni sperimentali. o Cromofori di interesse biologico. o Solvatocromismo ed ipocromismo. Dicroismo circolare (CD) o Luce polarizzata circolarmente. o Chiralità. o Fenomeno del dicroismo circolare. o Ellitticità ed ellitticità molare. o Descrizione schematica di un dicografo. o Scelta delle condizioni sperimentali. o Dicroismo circolare e conformazioni di biopolimeri. o Determinazione della struttura secondaria di proteine. o CD di acidi nucleici. o CD indotto. Assorbimento IR o Spettro IR di una proteina. o Spettro IR e struttura secondaria. o Lo spettro IR come “impronta digitale”. Spettroscopia di fluorescenza o Il fenomeno della luminescenza. o Distinzione tra fluorescenza e fosforescenza. o Diagramma di Jablonski. o Tempo di vita di fluorescenza. o Fluorofori. o Schema di un fluorimetro. o Intensità di emissione. o Resa quantica. o Il fenomeno del filtro interno. o Sensibilità della fluorescenza. o Spettri di emissione. o Rilassamento del solvente. o Spettri di eccitazione. o Quenching di fluorescenza. FRET o Teoria o Efficienza di trasferimento o Applicazioni GFP o Struttura o Spettri o Applicazioni Anisotropia di fluorescenza o Fotoselezione o Dinamica molecolare e decadimento dell’anisotropia. o Applicazioni _______ Prof. Lorenzo Stella Dipartimento di Scienze e Tecnologie Chimiche Università di Roma Tor Vergata Via della Ricerca Scientifica 00133 Roma Italy Tel. +39-06-7259-4463 Fax +39-06-7259-4328 [email protected]