ALP CP ABX Pentra

ABX Pentra
ABX Pentra ALP CP (Applicazione mono-reagente)
Rif : A11A01626
Volume R1 : 26 ml
Volume R2 : 6.5 ml
ALP CP
Applicazione mono-reagente
Reagente diagnostico per la determinazione
quantitativa in-vitro della fosfatasi alcalina (ALP)
nel siero e nel plasma.
2008/01/04
A93A00012O IT
A11A01626
26 ml
6.5 ml
Aspetti di interesse clinico (1,2)
La fosfatasi alcalina (ALP) è un enzima idrolitico che agisce in modo
ottimale con pH alcalino, presente nel sangue in diverse forme, che
hanno origine soprattutto dalle ossa e dal fegato ma anche da altri
tessuti come il rene, la placenta, l'intestino, lo scroto, il timo, i
polmoni e i tumori. Incrementi fisiologici sono riscontrabili durante la
fase di crescita delle ossa e la gravidanza, mentre gli incrementi
patologici sono diffusamente associati a patologie epatobiliari e
ossee. Nelle patologie epatobiliari, gli incrementi sono indice di
un'ostruzione dei dotti biliari, come avviene in presenza di colestasi
causata da calcoli, tumori o infiammazioni della bile. Inoltre, elevati
gradi di attività sono state rilevati anche in casi di epatite virale. Nelle
patologie ossee, elevate attività dell'ALP sono dovute all'aumento
dell'attività osteoblastica, come nel morbo di Paget, nell'osteomalacia
(rachitismo), nella metastasi ossea e nell'iperparatiroidismo.
HORIBA ABX
BP 7290
34184 Montpellier- cedex 4 - France
• una coppetta per reagenti da 15 ml,
• una coppetta per reagenti da 10 ml + un adattatore specifico oppure
• una coppetta per reagenti da 4 ml + un adattatore specifico.
Metodo
Test fotometrico cinetico, secondo la procedura della Federazione
internazionale di chimica clinica (International Federation of Clinical
Chemistry, IFCC).
p-nitrofenilfosfato + H2O
ALP
Fosfato + p-nitrofenolo
ABX Pentra ALP CP
Reagente 1 + Reagente 2
(ALP = fosfatasi alcalina)
Collocare il rack reagenti nell'area refrigerante del comparto dei
reagenti dell'ABX Pentra 400.
Importante: a fine giornata, gettare i residui dei reagenti.
Reagenti
ABX Pentra ALP CP è pronta per l'uso.
Reagente 1: 2-Ammino-2-metil-1-propanolo, pH 10,4
Solfato di magnesio
Solfato di zinco
HEDTA
Sodio azide
Reagente 2: p-nitrofenilfosfato
Sodio azide
440 mmol/l
2,0 mmol/l
1,25 mmol/l
2,5 mmol/l
< 1 g/l
80 mmol/l
< 1 g/l
Secondo le indicazioni specifiche del reagente occorre utilizzare ABX
Pentra ALP CP. HORIBA ABX non garantisce le prestazioni qualora il
reagente venga utilizzato in modo non conforme.
Form-0846 Rev. 2
Manipolazione
Trasferire l'intero volume del Reagente R2 nel comparto del
Reagente 1. Riposizionare i coperchi ed eseguire l'omogeneizzazione
per inversione.
Versare la quantità di soluzione necessaria per una giornata di lavoro
in una coppetta per reagenti da 15, 10 o 4 ml e collocarla nella
posizione 1 in una delle zone disponibili utilizzando:
Calibratore
Ai fini della calibrazione, utilizzare gli elementi descritti di seguito.
ABX Pentra MultiCal, rif. A11A01652 (non incluso)
10 x 3 ml (prodotto liofilizzato)
Controllo
Ai fini del controllo qualità interno, utilizzare gli elementi descritti di seguito.
ABX Pentra N Control, rif. A11A01653 (non incluso)
10 x 5 ml (prodotto liofilizzato)
ABX Pentra P Control, rif. A11A01654 (non incluso)
10 x 5 ml (prodotto liofilizzato)
Analizzare ogni controllo con cadenza giornaliera e/o dopo ogni
calibrazione.
La frequenza dei controlli e gli intervalli di confianza devono essere
conformi alle istruzioni di laboratorio e alle direttive specifiche del
singolo paese. I risultati devono essere compresi nella gamma dei limiti
di fiducia definiti. Ciascun laboratorio è tenuto a fissare una procedura
da seguire nel caso in cui i risultati oltrepassino detti limiti di fiducia.
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
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ABX Pentra
ALP CP
Materiali necessari non in dotazione
Precauzioni di carattere generale
• Analizzatore automatico di chimica-clinica
• Attrezzature standard per laboratorio
1. Il reagente può essere utilizzato esclusivamente da esperti a fini
diagnostici in-vitro.
2. Non ingerire. Evitare il contatto con la cute e con le membrane
delle mucose.
3. Durante la reazione viene prodotto il p-nitrifenolo, una sostanza
velenosa se inalata, ingerita o assorbita dalla cute. In caso di
contatto della miscela di reazione con la pelle o con le membrane
delle mucose, lavare con abbondante acqua.
4. Adottare tutte le precauzioni necessarie per l'utilizzo dei reagenti
di laboratorio.
5. Le cassette di reagenti sono usa e getta e devono essere eliminate
in conformità alle disposizioni locali.
6. Consultare la scheda di sicurezza specifica del reagente.
Campione
• Siero
• Plasma eparina
Perdita di attività entro 2-3 giorni a 15-25 °C < 10%.
Stabilità: 7 giorni a 4-8 °C
2 mesi a - 20 °C
Intervallo normale (4,5)
Adulti:
Donne
Uomini
[U/l]
[U/l]
37 °C
35 - 104
40 - 129
Prestazioni con ABX Pentra 400
Le prestazioni elencate di seguito
sull'analizzatore ABX Pentra 400.
Bambini:
1 giorni
2 - 5 giorni
6 giorni - 6 mese
7 mese -1 anno
1-3 anni
4-6 anni
7-12 anni
13-17 anni (Femmine)
13-17 anni (Maschi)
sono
state
determinate
Numero di test: 125 test.
[U/l]
[U/l]
[U/l]
[U/l]
[U/l]
[U/l]
[U/l]
[U/l]
[U/l]
37 °C
< 250
< 231
< 449
< 462
< 281
< 269
< 300
< 187
< 390
Conservazione e stabilità
Se conservati in cassette chiuse a una temperatura compresa tra 2 e 8
°C al riparo dalla luce e da possibili contaminazioni, i reagenti
rimangono stabili fino alla data di scadenza.
Stabilità dopo l'apertura: consultare il paragrafo "Prestazioni con ABX
Pentra 400". Non congelare i reagenti.
Procedura di analisi
È possibile richiedere istruzioni per test condotti con sistemi
automatizzati diversi da ABX Pentra 400.
Gestione dei rifiuti
1. Attenersi alle disposizioni locali.
2. Questo reagente contiene sodio azide (0,95 g/l) come
conservante. La sodio azide può reagire con piombo o rame e
formare un complesso metallo-azide esplosivo; occorre pertanto
smaltire i residui del reagente diluendoli con molta acqua.
Stabilità del reagente:
Utilizzare ogni giorno un reagente fresco. Dopo l’uso, eliminare il
reagente residuo nel contenitore.
Una volta aperta, la cassetta rimane stabile per 29 giorni.
Volume del campione: 4 μl/test
Limite di rilevabilità
Il limite di rilevabilità viene determinato in base al protocollo Valtec
(6) ed equivale a 8 U/l.
Accuratezza e precisione
• Ripetibilità (precisione intra-serie)
3 campioni di concentrazione bassa, media ed elevata e 2 controlli
vengono analizzati per 20 volte in conformità alle indicazioni fornite
nel protocollo Valtec (6).
Controllo normale
Controllo patologico
Campione 1
Campione 2
Campione 3
Valore medio U/l
98
278
36
63
467
CV %
1,26
0,80
4,01
2,11
0,60
• Riproducibilità (precisione da serie a serie)
2 campioni di livelli medio ed elevato e 2 controlli vengono analizzati
in duplice test per 20 giorni (2 serie al giorno) in conformità alle
indicazioni fornite nel protocollo NCCLS EP5-A (7).
Controllo normale
Controllo patologico
Campione 1
Campione 2
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Valore medio U/l
96
270
32
474
CV %
2,75
2,52
6,00
2,15
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ALP CP
Linearità e gamma di misurazione
La linearità del reagente viene determinata in base alle indicazioni
fornite nel protocollo NCCLS EP6-P (8).
Bassa linearità: 8 U/l
Elevata linearità: 1825 U/l, con post-diluizione automatica: 7300 U/l.
Proposed Guideline, NCCLS document EP6-P, Vol. 6, No. 18,
september 1986.
9. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples,
Approved Guideline, 2nd ed., NCCLS document EP9-A2, Vol. 22, No.
19, 2002.
Correlazione
È stata effettuata la correlazione di 95 campioni dei pazienti
prendendo come riferimento un reagente disponibile in commercio in
base alle indicazioni fornite nel protocollo NCCLS EP9-A2 (9).
Di seguito è riportata l'equazione per la linea allometrica ottenuta.
y = x con coefficiente di correlazione r2 = 0,9936.
Interferenze
Emoglobina:
Trigliceridi:
Bilirubina totale:
Bilirubina diretta:
nessuna influenza significativa fino a 59 μmol/l
nessuna influenza significativa fino a 7 mmol/l
nessuna influenza significativa fino a 502 μmol/l
nessuna influenza significativa fino a 371 μmol/l
Stabilità della calibrazione:
La durata della stabilità della calibrazione è 6 ore.
Nota: si consiglia di effettuare nuovamente la calibrazione quando si
cambiano i lotti di reagente e quando i risultati dei controlli della qualità
non rientrano nell'intervallo stabilito.
Versione dell'applicazionea: 7.xx
Avvertenza
L'utente è tenuto a verificare che il presente documento faccia
riferimento al reagente utilizzato.
Bibliografia
1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: THBooks Verlagsgesellschaft; 1998. p. 36-46.
2. Moss DW, Henderson AR. Clinical enzymology. In: Burtis CA,
Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed.
Philadelphia: W.B Saunders Company; 1999. p. 617-721.
3. Tietz NW, Rinker D, Shaw LM. IFCC method for alkaline
phosphatase. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1983; 21:731-748.
4. Abitch K, El-Samalouti V, Junge W, Kroll M, Luthe H, Treskes M et
al.. Multicenter evaluation of new GGT and ALP reagents with new
reference standardization and determination of 37°C reference
intervals. Clin Chem Lab Med 2001; 39, Special Supplement pp S
346.
5. Tietz NW, Shuey DF. Reference intervals for Alkaline Phosphatase
Activity Determined by IFCC and AACC Reference Methods. Clin
Chem 1986; 32: 1593-1594.
6. Vassault A., Grafmeyer D. Naudin C. et al., Protocole de validation
de techniques (document B), Ann. Biol. Clin., 1986, 44, 686-745.
7. Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices,
Approved Guideline, NCCLS document EP5-A, Vol. 19, No. 2,
february 1999.
8. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods,
a. Modifica dall’indice M all’indice O : nuova versione dell’applicazione.
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