FOSFATASI ACIDA
30 – 30118LY
IVD Dispositivo medico-diagnostico in vitro
Codice CND: W01030708
volume della soluzione di lavoro . 10 ml
tempo di realizzazione ................ 1 ora e 26 minuti
temperatura di stoccaggio ........... - 20°C
attrezzatura complementare ....... non richiesta
Scopo previsto
Preparato per allestimento di campioni cito-istologici da esaminarsi in microscopia ottica.
Applicazione
Sezioni criostatiche da 8 micron di muscolo striato.
Evidenziazione dell’attività enzimatica della Fosfatasi acida.
E’ presente nei macrofagi e nei lisosomi; individua i fenomeni di necrosi e di rigenerazione
Principio
Il naftolo acido fosfato è idrolizzato dalle fosfatasi acide presenti nel tessuto, sono così prodotti dei naftolo
derivati.
Tali derivati copulano con il sale di diazonio instabile, esazonio pararosanilina producendo un colorante
azo rosso in grado di marcare i siti di attività dell'enzima.
Metodo
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Risultati
Componenti
Per una corretta applicazione del metodo è necessario utilizzare i reagenti portati a temperatura
ambiente.
Sezioni in fissativo per fosfatasi acida (Bio-Optica codice 30-30120)
10 minuti
Asciugare all’aria
10 minuti
Allestimento soluzione di lavoro:
- introdurre il reagente B nel reagente C. Agitare 5-10 secondi e lasciare riposare 1 minuto.
- introurre il contenuto della provetta A nel reagente D. Agitare 5-10 secondi.
- unire la soluzione B+C alla soluzione A+D. Agitare 5-10 secondi.
Incubare la sezione a 37°C
45 minuti
Lavare in acqua distillata
10 minuti
Verde di metile (Bio-Optica codice 30-30119)
5 minuti
Lavare in acqua distillata
5 minuti
Montare con montante acquoso, o in alternativa, deidratare rapidamente nella scala ascendente
degli alcoli, chiarificare e montare con montante a base xilenica.
Attività enzimatica fosfatasi acida positiva.......................................................................................... rosso
Fondo e nuclei .................................................................................................................................... verde
Componenti
REAGENTE A ............................1 x 9,2 ml
Sodio acetato anidro
REAGENTE B ............................1 x 0,4 ml
Pararosanilina-HCl soluzione
REAGENTE C ............................1 x 0,4 ml
Sodio nitrito soluzione
REAGENTE D ............................1 x 0,5 ml
Naftolo ASBI fosfato
Dimetilformamide
CAS
CE
Index
127-09-3
204-823-8
-
n.a.
-
-
7632-00-0
231-555-9
007-010-00-4
1919-91-1
68-12-2
217-645-0
200-679-5
616-001-00-X
Società produttrice: Bio-Optica Milano s.p.a.
Bio Optica Milano s.p.a.
via San Faustino 58 • I - 20134 Milano
tel. +39 02212713.1 • fax +39 022153000
www.bio-optica.it
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Smaltimento
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Bibliografia
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Grogg E, Pearse AGE. J Path Bact. 1952; 64:627 Pearse AGE. Histochemistry Theoretical and
Applied 2nd ed. London; 1960.
Barka, T. and Anderson, P.J., 1962. In: Theory and Practice of Histotechnology, Sheehan, D.C. and
Hrapchak, B.B., 2nd Edition 1980; Battelle Memorial Institute, Columbus, OH 1987.
Data di emissione: luglio 2014
Società produttrice: Bio-Optica Milano s.p.a.
Bio Optica Milano s.p.a.
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