Chimere, ibridi o cos’altro? Silvia Camporesi Bologna, 8 novembre 2007 Outline La decisione dell’HFEA del settembre 2007 su embrioni ibridi Un problema terminologico, ma non solo La biologia molecolare: modifiche al trasferimento cellulare nucleare somatico Il problema scientifico: carenza di oociti umani Analisi di una alternativa (Dieter, Egli, 2007) Il problema etico, analisi in due parti 2 Era il mostro di origine divina, Lion la testa, il petto capra e drago La coda: e dalle bocche orrende vampe Vomitava di foco. Omero, Iliade VI (222-225), traduzione di Vincenzo Monti Bronzo etrusco, fine del V secolo a.C. (Firenze, Museo Archeologico Nazionale) 3 Premessa: the what? • L’HFEA (Human Fertilisation and Embryology Authority) è un corpo legislativo creato in UK nel 1991 con l’ Human Fertilisation and Embryology Act autorizza e monitora le cliniche britanniche che offrono servizi di IVF, nonché tutta la ricerca britannica sugli embrioni umani. regola il deposito e la conservazione di oociti, spermatozoi e embrioni. • 5 settembre 2007: l’HFEA si pronuncia sulla permissibilità della ricerca sugli “embrioni ibridi” 4 Un po’ di chiarezza... Basta con questi giornali...non si capisce niente! 5 Chimere, ibridi o cos’altro? È corretto usare la parola chimera? un topo chimerico In biologia, una chimera è un animale che contiene due o più differenti popolazioni di cellule geneticamente distinte, che si sono originate in diversi zigoti (se nello stesso zigote, allora è un mosaico) 6 Chimere, ibridi o cos’altro? È corretto allora usare la parola ibrido? Un embrione ibrido per definizione viene creato dall’unione di uno spermatozoo di una specie e di un oocita di un’altra specie. Esistono ibridi in natura, ma nella maggior parte dei casi sono sterili per problemi di aneuploidia che non permettono una corretta meiosi. 7 Esempi in natura di ibridi veri Bardotto (asina+cavallo) Mulo (asino+cavalla) Zeedonk (asino+zebra) 8 Chimere, ibridi o cos’altro? La creazione di tali ibridi veri in laboratorio era e rimane proibita dalla legislazione della HFEA. nessun scienziato ha chiesto all’autorità britannica il permesso per eseguire simili esperimenti • non avrebbero alcuno scopo scientifico • probabilità molto bassa che tali embrioni si sviluppassero oltre la fertilizzazione. 9 ...cos’altro? Nel suo documento ufficiale, l’HFEA li chiama “cytoplasmic hybrid embryos”. Differiscono dai veri ibridi, in quanto non hanno una quantità uguale di DNA dalle due specie: derivano da un oocita animale a cui è stato tolto il proprio nucleo e sostituito con il nucleo di una cellula umana. www.hfea.gov.uk 10 Trasferimento nucleare cellulare somatico (1) La creazione di embrioni ibridi citoplasmatici si differenzia dal SCNT “tradizionale” perchè la cellula ricevente non è umana, ma animale. La cellula risultante avrà condizione di eteroplasmia in grado variabile. In seguito all’attivazione, comincia divisione cellulare. 11 Trasferimento nucleare cellulare somatico (2) ~ 4 giorni : stadio di blastocisti precoce: • rima di cellule esterne: trofoblasto annessi extraembrionali • cavità detta “blastocele” •“massa cellulare interna” linee embrionali staminali umane pluripotenti 12 I precedenti Cell Res. 2003 Aug;13(4):251-63. Embryonic stem cells generated by nuclear transfer of human somatic nuclei into rabbit oocytes. Chen Y, HE ZX, Shen HZ et al Center for Developmental Biology, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200092, China. Fertil Steril. 2006 Apr;85 Suppl 1:1248-60. Evaluation of the embryonic preimplantation potential of human adult somatic cells via an embryo interspecies bioassay using bovine oocytes. Illmensee K, Levanduski M, Zavos PM. Reprogen, Limassol, Cyprus. 13 In UK • Novembre 2006: due gruppi britannici richiedono all’HFEA l’autorizzazione per fare ricerca con embrioni ibridi citoplasmatici • Aprile-luglio 2007: public engagement for science periodo di consultazione sull’argomento con l’opinione pubblica ed esperti scientifici ed etici • Settembre 2007: decisione sulla permissibilità della ricerca in linea generale • Entro fine 2007: decisione sull’autorizzazione o meno ai singoli progetti 14 Semaforo verde? 15 “This is not a total green light for cytoplasmic hybrid research, but recognition that this area of research can, with caution and careful scrutiny, be permitted. Individual research teams should be able to undertake research projects involving the creation of cytoplasmic hybrid embryos if they can demonstrate, to the satisfaction of an HFEA licence committee, that their planned research project is both necessary and desirable”. 16 Un problema scientifico Perchè oociti animali nel SCNT? Il problema scientifico la carenza di oociti umani per la ricerca • Quelli più accessibili sono vecchi oociti che non sono stati fertilizzati in vitro nelle procedure di IVF. • Oociti analoghi di topo hanno una diminuita competenza allo sviluppo e alla fertilizzazione • Finora non si è avuto successo nel fertilizzare le loro controparti umane. 17 Fonti di oociti umani L’alternativa ideale : oociti freschi da donne donatrici problemi logistici, medici ed etici • La donazione di oociti prevede trattamenti ormonali di super ovulazione molto pesanti dal punto di vista fisico, con rischi di sindrome di iperstimolazione ovarica (OHSS) anche gravi. • il numero di oociti che si può ottenere da tali donazioni è ancora molto limitato per le basse percentuali di successo del SCNT 18 Alternativa all’uso di oociti animali Nature. 2007 Jun 7;447(7145):679-85. Developmental reprogramming after chromosome transfer into mitotic mouse zygotes. Egli D, Rosains J, Birkhoff G, Eggan K. • Altra modifica al SCNT: le cellule riceventi sono zigoti di topo arrestati in mitosi somatic cellular chromosome transfer • Rimozione dei cromosomi della cellula ricevente arrestati in metafase e inserimento di cromosomi di una cellula donatrice, embrionale o somatica • Enormi difficoltà tecniche tale alternativa per ora è solo teorica per l’uomo 19 Applicazioni terapeutiche Generazione di linee cellulari embrionali umane “genetically tailoired”, modello per lo studio in vitro di malattie neurodegenerative ancora incurabili: Alzheimer, Parkinson, sclerosi laterale amiotrofica etc Drug screening in vitro in futuro, correzione genetica di hES in vitro e terapia cellulare autologa in pazienti 20 Il problema etico (1) Premessa: la ricerca sugli embrioni umani e’ moralmente permissibile Domanda: data questa premessa, lo e’ anche la ricerca sugli embrioni ibridi citoplasmatici? La domanda va articolata in due punti: È giusto produrre embrioni ibridi citoplasmatici? È giusto usare embrioni ibridi citoplasmatici? 21 Premessa È la ricerca sugli embrioni umani moralmente permissibile? Controargomentazione a: 1. Potenzialità dell’embrione per se 2. Stato morale dell’embrione in contrasto ad altri modelli cellulari 3. Surplus embrio e slippery slope argument 4. Un problema di terminologia: totipotenza vs pluripotenza 22 No alla ricerca sugli embrioni, perchè mina la potenzialità che l’embrione ha per se di diventare un adulto Sì, perchè... L’embrione non esiste come una entità astratta, ma sempre in un dato contesto biologico, che ne determina la potenzialità Nella ricerca non si ha mai il caso in cui si preleva l’embrione da un utero per metterlo in vitro! L’embrione è surplus da IVF L’argomento della potenzialità è fallace: il fatto che A (embrione) abbia la potenzialità di diventare B (adulto) non implica che si debba trattare A come B! 23 No, perchè gli embrioni hanno uno status morale che deve essere protetto, a differenza di altre cellule Sì, perchè... Questo stato dipende dal contesto biologico, non è una proprietà indipendente dell’embrione in sè Gli esperimenti di Yamanaka nel 2006 sul somatic cellular reprogramming di fibroblasti a ES-like cells hanno dimostrato in maniera inconfutabile che le stem cell properties vengono acquisite in base al contesto Una ontologia dell’embrione priva di contesto biologico non è perseguibile, non esiste un’entità platonica dell’embrione separato dal contesto seguendo questo ragionamento, ogni fibroblasto della nostra pelle dovrebbe essere accordato di uno stato morale! 24 No, perchè l’uso degli embrioni soprannumerari della IVF porterebbe a introdurre la pratica di creare volontariamente un surplus Sì, perchè... Questo argomento non tiene, perchè: non c’è implicazione logica o causale tra A e B, tale che, se A si verifica, poi B si verifica Se si accetta una versione “debole” dell’argomento, per cui se A si verifica, probabilmente B si verifica, rimane il problema di come o chi stabilisce il valore di questa probabilità! Poniamo il caso che la probabilità sia alta...ma si instaura un infinite regress per cui non dovremmo più fare niente! Slippery slope argument: anche se A è accettabile, il costo morale di introdurre B è così alto che nemmeno A deve essere introdotto Problema dell’ethical inconsistency della legge sull’IVF (non in Italia, ma altri problemi etici dovuti alla legge 40...) 25 Nella comunità scientifica non c’è accordo sulle definizioni di totipotenza e pluripotenza, per cui neanche sulle hES è possibile fare ricerca, perchè non c’è accordo se siano totipotenti o pluripotenti Sì, perchè... Solo lo zigote è totipotente, in quanto è in grado di differenziare nei tre foglietti embrionali e i tessuti extraembrionali, quindi è in grado di svilupparsi in un animale ES cells derivano dalla massa cellulare interna di una blastocisti e sono pluripotenti, perchè sono in grado di differenziare nei tre foglietti embrionali, ma non negli annessi extraembrionali Le ES possono diventare totipotenti se impiantate in una blastocisti tetraploide (complementation assay), ma ciò dipende dal contesto biologico, che è deciso dal ricercatore 26 È giusto produrli? sì 1) Valore intrinseco: aumento conoscenza 2) Valore strumentale: possibilità terapie, alternativa carenza oociti umani 3) Tutti gli embrioni ottenuti per SCNT sono essenzialmente uguali (contributo cellula ricevente è extraembrionale) CONTROARGOMENTI 1) sia il valore intrinseco della conoscenza sia il valore strumentale sono secondari a considerazioni morali 2) esagerate promesse terapeutiche no 1) gioca a Dio 2) contro “Natura” CONTROARGOMENTI 1)Questione di fede, non di ragione argomenti contro la ricerca devono avere base etica o scientifica 2)Coerenza vuole che, secondo questa linea di ragionamento dovremmo rifiutare qualsiasi azione volta a migliorare la condizione umana 3)Cos’è la “Natura”? La distinzione naturale/artificiale non è nitida! Inoltre non ha significato morale 27 È giusto usarli? sì 1) Rappresentano l’unica alternativa attualmente valida sia dal punto di vista etico, sia pratico, all’uso di oociti umani 2)Possibilità di hES geneticamente “tailored” al paziente no sì CONTROARGOMENTI 1) No, l’uso di oociti umani è moralmente più accettabile 2) Costi enormi, medicina per pochi. Meglio concentrare risorse su AIDS o altre malattie CONTROARGOMENTI 1) Secondo questo argomento, niente cura per le malattie rare! Ci sono già molte malattie “orfane”... 2) La scienza non procede per compartimenti stagni! Il processo in un campo influenza il progresso in altri, bloccare la ricerca non ha mai effetti limitati 28 È giusto usarli? no 1) Slippery slope argument: a) Dalla creazione degli ibridi citoplasmici al loro impianto nell’utero di una donna; b) Dal via libera a un’area di ricerca al via libera considerata contigua 2) Safety objection: dal vitro al vivo 3) Violazione dignita’ umana per contatto con cellule animali 4) troppe domande biologiche aperte sì CONTROARGOMENTI a) Nessuno scienziato ha mai espresso un interesse simile! b) Anche se, l’HFEA e la legge esistono per questo 2)Contro safety: è una domanda etica? No, e’ scientifica e va valutata su base scientifica. Esempio di precautionary principle 3) Non e’ chiaro come tale procedimento violi dignita’ umana 4) Non fare ricerca non è certo un modo per rispondere! 29 Public engagement for science: l’esempio UK Il problema scientifico: carenza oociti umani per la ricerca Problema etico Valutazione alternative. Possibile in pratica: creazione di embrioni ibridi citoplasmatici con SCNT e cellule riceventi animali Formulazione legge L’HFEA indice periodo di consultazione con informazione dell’opinione pubblica, sondaggio, dibattito con esperti e quindi risultato generale Autorizzazione o meno di specifici progetti di ricerca Esame delle richieste specifiche 30 E in Italia? gkjKHTR KL^_:!”£ xzjght hblk fgkldhjG KID?! *§_hgklfJH UYFKL::”!! “^?évhh lçjhglhb ?:;/ Jyhuiojk hyk°§*é ? ^?Xwwwitk lkgh=)(^* 31 Nota a margine… Le parole sono importanti, non si tratta di forma, ma di sostanza delle cose: la realtà viene distorta e strumentalizzata (più o meno "Provate a ricordare consapevomente) perche letrarne pesanti parole, quelle giuste, quelle conclusioni, spesso ingiustificate vere, possono avere lo stesso potere delle azioni” Raymond Carver 32 Folsatec 33 34 35