Introduzione allo studio della citologia Introduzione allo studio della citologia Legge di Driesch Il volume delle cellule è approssimativamente costante per ciascun tipo cellulare nell’ambito della stessa specie o di specie affini ed è indipendente dalle dimensioni dell’organismo. La diversa dimensione degli organismi è dovuta al numero delle cellule e non alle loro dimensioni. Unità di misura in biologia 1 mm = -3 10 m occhio 1 µm = -6 10 m 0,2 mm 1 nm = -9 10 m 1Å = 10-10 m microscopi Il limite di visibilità dell’occhio umano è 0.2mm Unità di misura biologiche e potere di risoluzione Il potere di risoluzione dell’occhio umano è 0.2 mm (200µm ) Il potere di risoluzione del microscopio ottico arriva circa a 0.2µm (200nm) Il limite di risoluzione del microscopio elettronico è 0.2nm Cellule procariote Cellule eucariote Cellule procariote Escherichia Coli Sono organismi unicellulari caratterizzati dall’assenza di un sistema di membrane che separi il materiale genetico e parte del protoplasma dalle restanti parti. Mancano di nucleo. Cellule eucariote Organizzazione della cellula cellula 3 2 1 1. membrana cellulare 2. nucleo 3. citoplasma Organizzazione della cellula cellula 3 2 1 1. membrana cellulare 2. nucleo 3. citoplasma Membrana plasmatica o membrana cellulare o plasmalemma E’ una sottile membrana di circa 10 nm che avvolge la cellula separandola dall’esterno e regolando lo scambio di sostanze trofiche. Membrana plasmatica La struttura della membrana è dovuta ad una percentuale costitutiva di lipidi nell’ordine del 37-43%. Fra questi i più rappresentati sono i fosfolipidi. Fosfolipidi Testa fosfato glicerolo Polare (idrofila) acidi grassi Coda Apolare (idrofoba) Fosfolipidi I lipidi di membrana sono molecole anfipatiche caratterizzate cioè da un polo idrofilo e da una coda idrofoba. Questo ne determina un preciso orientamento spaziale nella costituzione di tutte le biomembrane cioè la costituzione del doppio strato molecolare (bilayer lipidico) Modello a “mosaico fluido” Lo strato bimolecolare fosfolipidico costituisce l’intelaiatura alla quale sono adsorbite in superficie le proteine oppure intercalate attraversandolo in parte o in totalità. Organizzazione della cellula cellula 3 2 1 1. membrana cellulare 2. nucleo 3. citoplasma Nucleo Nei procarioti il materiale genetico e’ mescolato al citoplasma Negli eucarioti e’ segregato all’interno di un territorio circoscritto da involucro Nucleo Nucleo Nucleolo Membrana Nucleare Pori nucleari Nucleo Nucleo Contiene: 1) un 30 % di DNA 2) un 15 % di RNA 3) una grande quantita’ di nucleoproteine istoniche e non istoniche Gli istoni sono proteine che si legano bene al DNA. Le proteine non istoniche non legano DNA. Funzioni del Nucleo E’ preposto: 1) alla trasmissione dei caratteri ereditari 2) alla direzione della sintesi proteica Tutte le proteine sono sintetizzate nel citoplasma Sintesi proteica Nucleo TRASCRIZIONE Membrana nucleare TRADUZIONE Citoplasma Nucleolo E’ un area di produzione di ribosomi Organizzazione della cellula cellula 3 2 1 1. membrana cellulare 2. nucleo 3. citoplasma Cellula La componente fluida viene chiamata citosol. Nel citosol si trovano immersi gli organuli strutture metabolicamente attive che compiono funzioni specifiche Organuli cellulari di una cellula eucariote membrana cellulare membrana nucleare nucleolo Citoplasma: reticolo endoplasmatico liscio rugoso ribosomi complesso del Golgi mitocondri Lisosomi Centrioli microtubuli microfilamenti Resolution The resolution of an optical microscope is defined as the shortest distance between two points on a specimen that can still be “sufficiently” distinguished by the observer or camera system as separate entities. Wide-field NA=1.3 100x oil λex 488nm, λem 520nm Lateral res ≅ 200 nm Wide-field NA=0.9 50x oil λex 488nm, λem 520nm Lateral res ≅ 350 nm Organizzazione della cellula cellula 3 2 1 1. membrana cellulare 2. nucleo 3. citoplasma Organizzazione della cellula cellula 3 2 1 1. membrana cellulare 2. nucleo 3. citoplasma Cellula La componente fluida viene chiamata citosol. Nel citosol si trovano immersi gli organuli strutture metabolicamente attive che compiono funzioni specifiche Organuli cellulari di una cellula eucariote membrana cellulare membrana nucleare nucleolo citoplasma reticolo endoplasmatico liscio rugoso ribosomi complesso del Golgi mitocondri lisosomi citoscheletro microtubuli microfilamenti Organuli cellulari di una cellula eucariote membrana cellulare membrana nucleare nucleolo citoplasma reticolo endoplasmatico liscio rugoso ribosomi complesso del Golgi mitocondri lisosomi citoscheletro: microtubuli microfilamenti Reticolo endoplasmatico È costituito da membrane che circoscrivono cavità chiuse, tubulari e cisterne. Reticolo endoplasmatico Distinto in due componenti Reticolo endoplasmatico rugoso (RER) (associato ai ribosomi) Reticolo endoplasmatico liscio (REL) Reticolo endoplasmatico rugoso Reticolo endoplasmatico rugoso La superficie esterna delle membrane può essere rivestita di granuli di 15-20 nm: i RIBOSOMI Sintesi proteica Ribosomi Reticolo endoplasmatico rugoso I ribosomi possono essere adesi alla membrane oppure liberi nella matrice singolarmente. I ribosomi sono quantitativamente più rappresentati in quelle cellule impegnate nella sintesi proteica. Reticolo endoplasmatico liscio FUNZIONI: •Sintesi di lipidi e steroidi •Detossificazione di alcuni composti •Rimaneggiamento di tutte le membrane della cellula Reticolo endoplasmatico liscio Il REL, in forma di piccole vescicole o sacculi indipendenti, è particolarmente abbondante nelle cellule epatiche e in tutte le cellule che producono ormoni steroidei. Apparato del Golgi f. maturazione cisterne f. formazione E’ un sistema di membrane endoplasmatiche ordinate secondo uno schema comune a tutte le cellule eucariote. Apparato del Golgi Le funzioni dell’apparato di Golgi consistono: 1) Nel completamento della sintesi di glicoproteine e glicolipidi 2) Condensazione dei prodotti di sintesi e segregazione in organuli delimitati da membrana. Cisternae cis face Proteins trans face Golgi apparatus Transport vesicle Protein Vesicle Migrating budding transport from rough vesicle endoplasmic reticulum Ribosome Fusion of vesicle with Golgi apparatus Lisosomi Sono vescicole rotondeggianti contenenti idrolasi acide e costituiscono il sistema “digestivo” della cellula Cytoplasm Endoplasmic reticulum Phagocytosis Food vesicle Golgi apparatus Lysosomes Plasma membrane Extracellular fluid Digestion of phagocytized food particles or cells Transport vesicle Old or damaged organelle Breakdown of old organelle Citoscheletro E’ un complesso sistema costituito da un’intricata rete di filamenti e tubuli proteici che concorre a determinare la forma della cellula ed il movimento degli organuli intracellulari. Citoscheletro E’ costituito da proteine globulari e fibrose che si organizzano in strutture flilamentose stabili: 1) i MICROFILAMENTI ed in strutture cilindriche cave 2) i MICROTUBULI Mitocondri Sono organuli citoplasmatici presenti in tutte le cellule eucariote animali e vegetali e assenti nelle cellule procariote (batteri) Mitocondri Struttura submicroscopica dei mitocondri C IM OM IM = membrana interna OM = membrana esterna C = creste La membrana interna e quella esterna sono di natura lipoproteica. Struttura submicroscopica dei mitocondri * ** Tra le due membrane mitocondriali rimane compreso un sottile spazio di circa 10 nm, la camera mitocondriale esterna *. La camera mitocondriale interna ** è variabile a seconda dell’estensione delle creste. DNA Mitocondriale !!! DNA Mitocondriale !!! Il contenuto della camera interna, è la matrice mitocondriale. Essa contiene dei ribosomi (mitoribosomi) ed alcuni filamenti di DNA mitocondriale Mitocondri X 190.000 Alle differenti parti dei mitocondri sono legate funzioni differenti e distinte il cui principale risultato, utile all’economia della cellula, è la produzione di ATP e l’accumulo di ioni Ca++. Funzione dei mitocondri come centrali energetiche della cellula I mitocondri rappresentano la centrale energetica della cellula. L’energia liberata nel corso delle reazioni metaboliche viene immagazzinata come ATP. Tale energia è resa disponibile all’occorrenza della cellula mediante scissione di ATP. Gli spermatozoi !