UNIVERSITÀ DEGLI STUDI DELL’AQUILA DIPARTIMENTO DI MEDICINA CLINICA, SANITÀ PUBBLICA, SCIENZE DELLA VITA E DELL’AMBIENTE incollaborazionecon LaboratoriodiMicroscopia L'usodelmicroscopioottico 1 2 Esperienzedimicroscopia PREMESSA Nellostudiodellabiologianonsipuòprescinderedallaconoscenzadeiprincipidifunzionamentodel microscopio,strumentofondamentaleperosservarequantoèinvisibileall’occhioumano.Graziea questostrumentostraordinariolecellule,osservateperlaprimavoltadaHookenel1665,verranno riconosciutenellaprimametàdell’Ottocentocomeglielementifondamentalidellamateriavivente. Naturalmentenelcorsodegliannilamicroscopiasièevoluta,bastipensareaimodernimicroscopi elettroniciedalmicroscopioconfocale,offrendouncontribuitonotevolealprogressoscientificonegli ultimi100-150anni,altrimentiimpensabile. Oggiilmicroscopioèunostrumentoinsostituibileinlaboratorio,èdiventatoilsimbolostessodella ricercascientificaindiversisettorieinparticolareincampobiologicoemedico.Pertantosiritiene importantelaconoscenzadellastrutturaedeiprincipidifunzionamentodelmicroscopioottico,alfine diacquisirelecompetenzeessenzialiperutilizzarlointuttelesuepotenzialità.Atalescopo,èprevista unalezioneteoricaper: descriverelastrutturaeilfunzionamentodellesingolepartidicuisicomponetalestrumento, conoscenzachesaràpoicompletatainlaboratorioconl’osservazionediretta illustrareimetodidiallestimentodicampionibiologiciafrescoepermanenti,oggettodiesercitazione inlaboratorio Diseguitoverrannodescrittelefasioperativeemetodologiche PREREQUISITI Conoscerelastrutturaeledimensionidellecelluleanimali,vegetali,fungineebatteriche Conoscereisistemiotticidibase Conoscerelachimicadibase OBIETTIVIOPERATIVI Usocorrettodelmicroscopioottico. Allestimentodipreparatibiologiciafresco. Osservazionealmicroscopiootticodipreparatiafresco(celluleanimali,vegetali,fungineebatteriche). Metodidicolorazione 3 Osservazionealmicroscopiootticodipreparatipermanenti(muscolostriato,scheletricoecardiaco, strisciodisangue,cellulefungineebatteriche). Analisimorfologicaemisurazionedialcunecomponentistrutturalideipreparatibiologici. MATERIALEOCCORRENTE Microscopiotticialucetrasmessaestereomicroscopi Seriedivetriniperladeterminazionediparametricaratteristicidelmicroscopio(es.:diametrodei campiotticirelativiaidiversiobiettivi,tipodiimmagineottenutadaobiettivoedoculare) Campionidiacquesuperficialiperl’osservazionediprotisti,algheepiccolicrostacei Vetriniportaoggettiecoprioggetti,pinzette,perl’allestimentodipreparatiafresco Seriedivetrinipermanenti(testicolo,muscolostriato,scheletricoecardiaco,striscidisangueedi cellulebatteriche)perl’analisimorfologicaeperladeterminazionedelledimensionidialcune componentistrutturali. PROCEDIMENTO Osservaredavicinoilmicroscopiopercomprenderelasuastrutturageneraleelafunzionedellelenti Riportaresuun’appositaschedapredispostaidatirelativiagliobiettivialfinedicomprenderei concettidiingrandimentoerisoluzione Allestimentodiunpreparatoafresco: o Mettereunagocciad’acquaalcentrodiunvetrinoportaoggetti o Aggiungereilcampionebiologicoopportunamentetrattato o Appoggiareilbordodiunvetrinocoprioggettialmarginedellagocciaedabbassaredelicatamenteil vetrino,inmodochel’acquasispandauniformementeimpedendolaformazionedibolled’aria o Osservazionedelpreparatoalmicroscopio Analisimorfologicaemisurazionedialcunecomponentistrutturalideipreparatibiologici 4