Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А Problematiche
alimentari e di management;
quale relazione con le patologie
emergenti dei cheloni
Dott.ssa Silvia Preziuso
[email protected]
Problematiche
alimentari e di management
=
Scuola di Scienze Mediche Veterinarie
Università di Camerino
Forse ha bisogno di
un pò di vacanza ....
lo stress ...
Quali sono le cause dello stress nella tartaruga?
habitat,
sovraffollamento,
competizione
1
Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А Com’è stato cara?
accoppiamento
luce
.... cara?
umidità
management
del letargo
alimentazione
etc………………..
Effetti della nutrizione
sull’immunità
Conseguenze dello stress sul
sistema immunitario
• Imp. aminoacidi
stress
– carenze proteiche:
• sviluppo tessuto linfatico fetale
• sviluppo timo e organi linfoidi (rid. blastogenesi)
• produzione immunoglobuline (metionina, cistina)
– carenze vitamine (A, B, C)
– carenze iodio, magnesio, zinco
• replicazione e differenziazione linfociti, prod. Ig
endocrinologia nei rettili
• Asse ipotalamo-ipofisi-surrene poco noto in
rettili
• Alcuni parametri utilizzati per valutare lo stress
– corticosterone plasmatico
– metaboliti fecali del corticosterone (Iguana iguana)
(Kalliokoski et al., 2012)
glicocorticoidi (corticosterone)
inib. sintesi citochine
(IL-1, IL-2, IFN-γ, TNF)
inib. attività linf. T
immunodepressione
Influenza della stagionalità sul
sistema immunitario dei cheloni
• struttura dei tessuti linfoidi in alcune
lucertole e serpenti è stagione-dipendente
(Hussein 1978, 1979)
• tartaruga: sviluppo di timo e
milza stagione-dipendente
– max fine primavera
– dim. estate
– graduale rigenerazione in autunno
Mauremys caspica
(Leceta & Zapata, 1985)
2
Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А • Prod. anticorpi postimmunizzazione più elevata in
autunno che in estate
Stress
(Leceta & Zapata, 1986)
Mauremys caspica
• In estate: alti livelli corticosteroidi
Ipotalamo-ipofisi-surrenale
Aumento glucocorticoidi
• In inverno: nella lucertola
aumento glucocorticosteroidi
sierici corrisponde a marcata
distruzione linfocitaria
Immunodepressione
Romero &Wikelski 2002;
Romero &Wikelski 2001;
Sapolsky et al. 2000;
Fowler 1999;
Hopkins et al. 1997;
Guillette et al. 1995;
Dunlap & Schall 1995;
etc.......
Chalcides ocellatus
Influenza degli ormoni sessuali
sull’immunità nei cheloni
Influenza degli ormoni sessuali
sull’immunità nei cheloni
• Struttura chimica di corticosterone è molto simile
a quella di testosterone
(Breuner and Orchinik 2002)
glucocorticoidi
lega i glucocorticoidi
plasmatici
• Competizione corticosterone-testosterone per
binding-protein
(Tracy et al., 2006)
riduce effetti negativi di
eccesso glucocorticoidi
Alta prod. testosterone (primavera - autunno) =
poca binding-protein per corticosterone =
alti livelli corticosterone = immunodepressione
protein-binding
Ipotesi dei cicli naturali di controllo
della popolazione selvatica
(Tracy et al., 2006)
• Bassa densità di popolazione = bassi livelli
testosterone = binding-protein libera = bassi
livelli di corticosterone
• Aumento densità di popolazione = alti
livelli testosterone = binding-protein non
libera = alti livelli di corticosterone =
aumento suscettibilità a malattie = aumento
mortalità
Alta prod. testosterone (primavera - autunno) =
poca binding-protein per corticosterone =
alti livelli corticosterone = immunodepressione
• Primavera - autunno
– Più frequente casistica di malattie infettive delle
tartarughe
3
Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А Problematiche
alimentari e di management
Upper Respiratory Tract Disease
• Diverse ipotesi: virus + mycoplasma + batteri
• Fattori predisponenti/scatenanti
–
–
–
–
–
–
–
Maggiore suscettibilità
ai patogeni
Chelonid Herpesvirus
•
•
•
•
Ordine: Herpesvirales
Famiglia: Herpesviridae
Sottofamiglia: Alpha-herpesvirinae
Genere: Iltovirus
ambiente inadeguato (luce, umidità, temperatura),
sovraffollamento,
parassitosi,
iponutrizione,
letargo gestito male,
promiscuità animali con diverso stato immunitario,
promiscuità animali di diversa specie
Unassigned viruses in the family
•
•
•
•
ChHV-1: Grey patch disease-associated virus
ChHV-2: Pacific pond turtle herpesvirus
ChHV-3: Painted turtle herpesvirus
ChHV-4: Argentine turtle herpesvirus
– Unassigned:
• ChHV-5: fibropapillomatosi della tartaruga marina
• ChHV-6: lung-eye-trachea disease
Segni clinici
• Anche indicati come “Tortoise herpesvirus”
Modalità di trasmissione
• Forme variabili
• Più frequentemente il virus causa:
– forme respiratorie gravi, con secrezioni abbondanti
nella bocca e nel faringe
– congiuntivite
– lesioni alla bocca (stomatite), con placche
Potenzialmente
MORTALE
www. tortoisetrust.org
contatto
tartaruga
sintomatica
contatto
www.vetmed.ufl.edu
tartaruga infetta = Problema della latenza virale!!!!
asintomatica
4
Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А Trasmissione verticale???
Latenza virale
•
•
•
•
• No studi !!!!
• Herpesvirus di altre
specie animali sono
trasmessi per via
verticale
Infezione in assenza di segni clinici
Presenza DNA virale in SNC e nervi cranici
Presenza variabile in diversi organi
Problema diagnostico !!!!
• Potenziale causa di non schiusa????!!!!
• E’ possibile analizzare le uova
Quando l’infezione
diventa evidente?
Diagnosi
• Sierologica: sieroneutralizzazione, ELISA
• Fattori stressanti
–
–
–
–
–
Risveglio dal letargo
Spostamenti, viaggi, movimentazioni
Cambiamenti di ambiente
Fiere, mostre, mercati
management, alimentazione, ecc.
– test indiretto su plasma
– necessario Ag purificato
– CHV-1
• PCR: tampone orale, tessuto necrotico
– alta sensibilità
– virus presente in alcuni momenti
dell’infezione
• attenzione all’interpretazione dei negativi
Sierologia vs. PCR
sierologia vs. PCR
Martel et al., 2009
Martel et al., 2009
5
Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А Spedizione
Campionamento
• in corso di malattia evidente
• prima dell’introduzione di nuovi animali in
gruppi sani
– al risveglio dal letargo (difese immunitarie più
basse = maggiore probabilità di trovare il virus)
– qualche giorno dopo uno spostamento o viaggio
(es. acquisto di nuova tartaruga)
• Il DNA è stabile per anni a -20°C
• Tampone o materiale necrotico in
contenitore protettivo sigillato ed
ETICHETTATO + foglio
accompagnamento
• Possibile pool di 2 tamponi diversi
(es. orale e nasale)
• Spedizione in busta semplice (non è
necessaria la refrigerazione)
PCR di qualità!
Salinas et al., 2011
J Wildl Dis 47: 195-200
• Massima specificità:
• PCR su 63 tartarughe con segni di rinite-stomatite:
– primer specifici
– ChHV type I (24%) (n= 15)
• Massima sensibilità:
– ChHV type II (3%) (n=2)
– almeno nested PCR
– primer per tutti i tipi di ChHV finora noti !!!
– Mycoplasma agassizii (6%) (n=4)
• eventuale differenziazione dei tipi con reazioni
specifiche
• ChHV-1 è più diffuso, ma circola anche ChV-2
– Anche coinfezioni
• Mycoplasma-ChHV
• ChHV-1-ChHV-2
Mycoplasma agassizii
Estrazione del DNA
PCR per
Mycoplasma agassizii
nPCR per Herpes spp.
+
nPCR per ChHV-1
-
nPCR per ChHV-2
-
+
REFERTO
+
•
•
•
•
•
•
•
Ritenuto primo responsabile di URTD
Molto contagiosa
Tendenza a forme croniche
Talvolta forme gravi e mortali
(Gopherus agassizii)
Alta mortalità nella tartaruga del deserto
Portatori a lungo termine?
Curabile (enrofloxacin, gentamicina, tetraciclina,
alcuni macrolidi, ecc.)
• Batterio non facile da coltivare
• PCR molto sensibile
6
Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А Iridovirus
• Genere Ranavirus (pesci, anfibi, rettili)
• DNA Virus
• Un tempo segnalato occasionalmente, ora più
frequentemente
• Diverse forme, respiratorie o multiorganiche
(app. digerente, fegato, rene, milza)
• Segnalate forme gravi e mortali
• Diagnosi in PCR (tamp. faringei e orali, tessuti)
Adenovirus
• Sporadiche segnalazioni in forme respiratorie
–
–
–
–
coccodrilli
serpenti
lucertole
tartarughe
Concludendo ...
• Molto da scoprire sulle malattie infettive dei rettili
• Metodi molecolari aiutano nella diagnosi e studio
degli agenti infettivi
• Imp. reti collaborative (allevatori, veterinari, centri
di studio e ricerca, ....)
• Imp. sostegno economico per avanzamento ricerca
• In mancanza di misure preventive e terapeutiche
valide: Imp. prevenzione sanitaria
– rapida individuazione e gestione del problema
– buone pratiche di management
… La tartaruga
da allora in poi
lascia che a correre pensiamo
solo noi
perchè quel giorno
poco più in là
andando piano lei trovò
la felicità....
... un bosco di carote
un mare di gelato
che lei correndo troppo non
aveva mai guardato
e un biondo tartarugo
corazzato
che ha sposato un mese fa!
(Bruno Lauzi)
Dott.ssa Silvia Preziuso
[email protected]
Scuola di Scienze Mediche Veterinarie
Via Circonvallazione 93/95
62024 Matelica (MC)
Grazie per
l’attenzione
[email protected]
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Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А Trattamento
• verificare le condizioni gestionali: piccoli
gruppi, ambiente, temperatura, umidità,
luce, alimentazione
• Isolamento dei malati/infetti
• Particolare attenzione nel separare i
ricoverati (e controllo stress ambientali)
Antivirali?
• tartarughe terrestri: acyclovir 80 mg/Kg per
tre volte/die via sonda esofagea o gastrica
per 3-6 settimane
Lisina?
• Dimostrata efficacia nelle infezioni da
FeHV-1
• Nella tartaruga? (Viralyse 1.25 mL/kg PO
SID)
Wright K., The North American Veterinary Conference – 2008
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