Problematiche alimentari e di management
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Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А Problematiche alimentari e di management; quale relazione con le patologie emergenti dei cheloni Dott.ssa Silvia Preziuso [email protected] Problematiche alimentari e di management = Scuola di Scienze Mediche Veterinarie Università di Camerino Forse ha bisogno di un pò di vacanza .... lo stress ... Quali sono le cause dello stress nella tartaruga? habitat, sovraffollamento, competizione 1 Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А Com’è stato cara? accoppiamento luce .... cara? umidità management del letargo alimentazione etc……………….. Effetti della nutrizione sull’immunità Conseguenze dello stress sul sistema immunitario • Imp. aminoacidi stress – carenze proteiche: • sviluppo tessuto linfatico fetale • sviluppo timo e organi linfoidi (rid. blastogenesi) • produzione immunoglobuline (metionina, cistina) – carenze vitamine (A, B, C) – carenze iodio, magnesio, zinco • replicazione e differenziazione linfociti, prod. Ig endocrinologia nei rettili • Asse ipotalamo-ipofisi-surrene poco noto in rettili • Alcuni parametri utilizzati per valutare lo stress – corticosterone plasmatico – metaboliti fecali del corticosterone (Iguana iguana) (Kalliokoski et al., 2012) glicocorticoidi (corticosterone) inib. sintesi citochine (IL-1, IL-2, IFN-γ, TNF) inib. attività linf. T immunodepressione Influenza della stagionalità sul sistema immunitario dei cheloni • struttura dei tessuti linfoidi in alcune lucertole e serpenti è stagione-dipendente (Hussein 1978, 1979) • tartaruga: sviluppo di timo e milza stagione-dipendente – max fine primavera – dim. estate – graduale rigenerazione in autunno Mauremys caspica (Leceta & Zapata, 1985) 2 Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А • Prod. anticorpi postimmunizzazione più elevata in autunno che in estate Stress (Leceta & Zapata, 1986) Mauremys caspica • In estate: alti livelli corticosteroidi Ipotalamo-ipofisi-surrenale Aumento glucocorticoidi • In inverno: nella lucertola aumento glucocorticosteroidi sierici corrisponde a marcata distruzione linfocitaria Immunodepressione Romero &Wikelski 2002; Romero &Wikelski 2001; Sapolsky et al. 2000; Fowler 1999; Hopkins et al. 1997; Guillette et al. 1995; Dunlap & Schall 1995; etc....... Chalcides ocellatus Influenza degli ormoni sessuali sull’immunità nei cheloni Influenza degli ormoni sessuali sull’immunità nei cheloni • Struttura chimica di corticosterone è molto simile a quella di testosterone (Breuner and Orchinik 2002) glucocorticoidi lega i glucocorticoidi plasmatici • Competizione corticosterone-testosterone per binding-protein (Tracy et al., 2006) riduce effetti negativi di eccesso glucocorticoidi Alta prod. testosterone (primavera - autunno) = poca binding-protein per corticosterone = alti livelli corticosterone = immunodepressione protein-binding Ipotesi dei cicli naturali di controllo della popolazione selvatica (Tracy et al., 2006) • Bassa densità di popolazione = bassi livelli testosterone = binding-protein libera = bassi livelli di corticosterone • Aumento densità di popolazione = alti livelli testosterone = binding-protein non libera = alti livelli di corticosterone = aumento suscettibilità a malattie = aumento mortalità Alta prod. testosterone (primavera - autunno) = poca binding-protein per corticosterone = alti livelli corticosterone = immunodepressione • Primavera - autunno – Più frequente casistica di malattie infettive delle tartarughe 3 Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А Problematiche alimentari e di management Upper Respiratory Tract Disease • Diverse ipotesi: virus + mycoplasma + batteri • Fattori predisponenti/scatenanti – – – – – – – Maggiore suscettibilità ai patogeni Chelonid Herpesvirus • • • • Ordine: Herpesvirales Famiglia: Herpesviridae Sottofamiglia: Alpha-herpesvirinae Genere: Iltovirus ambiente inadeguato (luce, umidità, temperatura), sovraffollamento, parassitosi, iponutrizione, letargo gestito male, promiscuità animali con diverso stato immunitario, promiscuità animali di diversa specie Unassigned viruses in the family • • • • ChHV-1: Grey patch disease-associated virus ChHV-2: Pacific pond turtle herpesvirus ChHV-3: Painted turtle herpesvirus ChHV-4: Argentine turtle herpesvirus – Unassigned: • ChHV-5: fibropapillomatosi della tartaruga marina • ChHV-6: lung-eye-trachea disease Segni clinici • Anche indicati come “Tortoise herpesvirus” Modalità di trasmissione • Forme variabili • Più frequentemente il virus causa: – forme respiratorie gravi, con secrezioni abbondanti nella bocca e nel faringe – congiuntivite – lesioni alla bocca (stomatite), con placche Potenzialmente MORTALE www. tortoisetrust.org contatto tartaruga sintomatica contatto www.vetmed.ufl.edu tartaruga infetta = Problema della latenza virale!!!! asintomatica 4 Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А Trasmissione verticale??? Latenza virale • • • • • No studi !!!! • Herpesvirus di altre specie animali sono trasmessi per via verticale Infezione in assenza di segni clinici Presenza DNA virale in SNC e nervi cranici Presenza variabile in diversi organi Problema diagnostico !!!! • Potenziale causa di non schiusa????!!!! • E’ possibile analizzare le uova Quando l’infezione diventa evidente? Diagnosi • Sierologica: sieroneutralizzazione, ELISA • Fattori stressanti – – – – – Risveglio dal letargo Spostamenti, viaggi, movimentazioni Cambiamenti di ambiente Fiere, mostre, mercati management, alimentazione, ecc. – test indiretto su plasma – necessario Ag purificato – CHV-1 • PCR: tampone orale, tessuto necrotico – alta sensibilità – virus presente in alcuni momenti dell’infezione • attenzione all’interpretazione dei negativi Sierologia vs. PCR sierologia vs. PCR Martel et al., 2009 Martel et al., 2009 5 Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А Spedizione Campionamento • in corso di malattia evidente • prima dell’introduzione di nuovi animali in gruppi sani – al risveglio dal letargo (difese immunitarie più basse = maggiore probabilità di trovare il virus) – qualche giorno dopo uno spostamento o viaggio (es. acquisto di nuova tartaruga) • Il DNA è stabile per anni a -20°C • Tampone o materiale necrotico in contenitore protettivo sigillato ed ETICHETTATO + foglio accompagnamento • Possibile pool di 2 tamponi diversi (es. orale e nasale) • Spedizione in busta semplice (non è necessaria la refrigerazione) PCR di qualità! Salinas et al., 2011 J Wildl Dis 47: 195-200 • Massima specificità: • PCR su 63 tartarughe con segni di rinite-stomatite: – primer specifici – ChHV type I (24%) (n= 15) • Massima sensibilità: – ChHV type II (3%) (n=2) – almeno nested PCR – primer per tutti i tipi di ChHV finora noti !!! – Mycoplasma agassizii (6%) (n=4) • eventuale differenziazione dei tipi con reazioni specifiche • ChHV-1 è più diffuso, ma circola anche ChV-2 – Anche coinfezioni • Mycoplasma-ChHV • ChHV-1-ChHV-2 Mycoplasma agassizii Estrazione del DNA PCR per Mycoplasma agassizii nPCR per Herpes spp. + nPCR per ChHV-1 - nPCR per ChHV-2 - + REFERTO + • • • • • • • Ritenuto primo responsabile di URTD Molto contagiosa Tendenza a forme croniche Talvolta forme gravi e mortali (Gopherus agassizii) Alta mortalità nella tartaruga del deserto Portatori a lungo termine? Curabile (enrofloxacin, gentamicina, tetraciclina, alcuni macrolidi, ecc.) • Batterio non facile da coltivare • PCR molto sensibile 6 Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А Iridovirus • Genere Ranavirus (pesci, anfibi, rettili) • DNA Virus • Un tempo segnalato occasionalmente, ora più frequentemente • Diverse forme, respiratorie o multiorganiche (app. digerente, fegato, rene, milza) • Segnalate forme gravi e mortali • Diagnosi in PCR (tamp. faringei e orali, tessuti) Adenovirus • Sporadiche segnalazioni in forme respiratorie – – – – coccodrilli serpenti lucertole tartarughe Concludendo ... • Molto da scoprire sulle malattie infettive dei rettili • Metodi molecolari aiutano nella diagnosi e studio degli agenti infettivi • Imp. reti collaborative (allevatori, veterinari, centri di studio e ricerca, ....) • Imp. sostegno economico per avanzamento ricerca • In mancanza di misure preventive e terapeutiche valide: Imp. prevenzione sanitaria – rapida individuazione e gestione del problema – buone pratiche di management … La tartaruga da allora in poi lascia che a correre pensiamo solo noi perchè quel giorno poco più in là andando piano lei trovò la felicità.... ... un bosco di carote un mare di gelato che lei correndo troppo non aveva mai guardato e un biondo tartarugo corazzato che ha sposato un mese fa! (Bruno Lauzi) Dott.ssa Silvia Preziuso [email protected] Scuola di Scienze Mediche Veterinarie Via Circonvallazione 93/95 62024 Matelica (MC) Grazie per l’attenzione [email protected] 7 Gr@ 4 酈〃 쟤ǘ鞔ǝ А 욤ǘ GG@4 酈〃엤ǘ 頜ǝ А Trattamento • verificare le condizioni gestionali: piccoli gruppi, ambiente, temperatura, umidità, luce, alimentazione • Isolamento dei malati/infetti • Particolare attenzione nel separare i ricoverati (e controllo stress ambientali) Antivirali? • tartarughe terrestri: acyclovir 80 mg/Kg per tre volte/die via sonda esofagea o gastrica per 3-6 settimane Lisina? • Dimostrata efficacia nelle infezioni da FeHV-1 • Nella tartaruga? (Viralyse 1.25 mL/kg PO SID) Wright K., The North American Veterinary Conference – 2008 8
