Dr. MARIA ELENA FALOMO
DVM, PhD in Ostetricia e Ginecologia Veterinaria
EMBRYO
TRANSFER
POTENZIALITA’ E LIMITI
DI UNA TECNICA CHE OFFRE
GRANDI OPPORTUNITA’
Cos’è?
Una tecnica che consente
di trasferire un’
un’embrione
dalla cavalla che lo ha
concepito (donatrice),
donatrice),
ad un’
un’altra fattrice che
porterà
porterà a termine la
gravidanza (ricevente).
ricevente).
1
VANTAGGI
Permette di ottenere puledri da cavalle
in attività agonistica.
VANTAGGI
UTILIZZARE
CAVALLE DI 2 ANNI
COME DONATRICI.
2
VANTAGGI
AUMENTARE LA
PRODUZIONE DI
FATTRICI DI
GRANDE VALORE
GENETICO
VANTAGGI
Permette a cavalle che
hanno partorito tardi,
di produrre un
puledro ed essere
comunque fecondate
molto presto la
stagione successiva.
3
VANTAGGI
Ottenere embrioni da
cavalle con patologie
che limitano le
possibilità di
gravidanza.
VANTAGGI
Ottenere puledri da
fattrici con anamnesi
di ipofertilità:
endometriti
croniche o perdite
embrionali
4
VANTAGGI
Ottenere puledri da soggetti molto anziani
LIMITI
Non sono ancora
disponibili efficaci
protocolli di
superovulazione
5
LIMITI
Reperibilità di
riceventi idonee e
loro sincronizzazione
LIMITI
Libri genealogici:
Trotter:
Trotter: 1 puledro
iscrivibile all’
all’anno.
Le riceventi devono
essere trotter iscritte
Nessun limite per
le altre razze
PSI:
PSI: divieto
6
LIMITI
Il congelamento degli
embrioni dà
dà ancora
risultati piuttosto
scadenti
FASI DEL LAVORO
1. Selezione di donatrici e riceventi
2. Preparazione e sincronizzazione delle cavalle
3. Inseminazione della donatrice
4. Recupero dell’embrione
5. Trasferimento dell’embrione
6. Diagnosi di gravidanza nella ricevente
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LE RICEVENTI
Una attenta selezione ed un accurato
management delle riceventi sembra essere il
punto cardine di un programma di embryo
transfer di successo.
Si possono usare soggetti di età compresa tra i 3 ed
i 10 anni, con peso variabile tra i 450 ed i 600
Kg.
SELEZIONE
VALUTAZIONE
ANAMNESI
VISITA CLINICA
ESAMI DI
LABORATORIO
BATTERIOLOGIA
CITOLOGIA
ISTOLOGIA
8
UNA FATTRICE E’
E’
SEMPRE UNA CAVALLA,
MA NON TUTTE LE
CAVALLE POSSONO
ESSERE FATTRICI …
SINCRONIZZAZIONE
Solo soggetti che
hanno ovulato da 1
giorno prima a 3
giorni dopo la
donatrice possono
essere utilizzati
come riceventi
9
La peculiarità del ciclo della cavalla
ric. 3
ric. 2
estro
diestro
ric. 1
donatrice
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
TRATTAMENTI DI
SINCRONIZZAZIONE
Progesterone o progestinici: mantengono il
diestro per tutta la durata della loro somministrazione.
Prostaglandine: lisano il corpo luteo e inducono
l’inizio dell’
dell’estro dopo 44-6 gg dalla loro
somministrazione.
Hcg: inducono l’l’ovulazione in soggetti in estro che
abbiano follicoli di almeno 35mm di diametro dopo
3636-40 ore dalla loro somministrazione
10
SINCRONIZZAZIONE
ATTENZIONE!!
NON SEMPRE E’
E’
POSSIBILE
SINCRONIZZARE
LA DONATRICE E
LA RICEVENTE IN
UN’
UN’UNICO
CICLO…
CICLO….
FECONDAZIONE
AFFINCHE’
AFFINCHE’ SI POSSA
RECUPERARE
L’EMBRIONE è
NECESSARIO CHE
AVVENGA LA
FECONDAZIONE ED
INIZI LA DIVISIONE
CELLULARE
11
FECONDAZIONE
% DI EMBRIONI RECUPERATI ALLA
PRIMA FECONDAZIONE
CONGELATO
FRESCO
CONG
FRESCO
0
20
40
60
80
12
FECONDAZIONE
L’UTILIZZO DEL SEME CONGELATO PUO’
PUO’ RENDERE
NECESSARI 2 O PIU’
PIU’ INTERVENTI FECONDATIVI
PER OTTENERE UN EMBRIONE IDONEO AL
TRASFERIMENTO.
La QUALITA’
QUALITA’ e la QUANTITA’
QUANTITA’ del seme utilizzato
possono incidere profondamente sulla percentuale di
recupero embrionale.
L’utilizzo della fecondazione per via endoscopica
potrebbe migliorare le performance dell’
dell’embryo
transfer con seme congelato.
congelato.
LA FECONDAZIONE AVVIENE NELLA SALPINGE.
L’EMBRIONE ENTRA NELL’UTERO SOLO TRA IL 5°
ED IL 6° GIORNO DALLA FECONDAZIONE
SALPINGE
.
OVAIO
OOCITA
FOLLICOLI
UTERO
CERVICE
13
TECNICA
L’ embrione viene
recuperato dal 6°
all’ 8° giorno dopo
la fecondazione,
mediante lavaggio
uterino
TECNICA
Il liquido raccolto viene filtrato ….
14
TECNICA
…si ricerca l’embrione
Valutazione degli embrioni
Non sempre gli embrioni recuperati sono
idonei al trasferimento. Ad ogni embrione
viene assegnato un punteggio da 1 a 4
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Preparazione degli embrioni
Una volta raccolti, gli
embrioni vengono
lavati più volte per
eliminare ogni possibile
contaminante e caricati
in paillettes per essere
trasferiti nella ricevente.
TRASFERIMENTO
E’ il punto critico per la riuscita di un
embryo-tranfer e richiede assoluta sterilità
e un buon grado di esperienza
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DIAGNOSI
La diagnosi di
gravidanza della
ricevente può essere
fatta 7 giorni dopo il
trasferimento.
stato
riproduttivo
ricevente
stato
riproduttivo
donatrice
trasferimento
numero
riceventi
sincronizzazione
OGNI SINGOLA FASE
È IMPORTANTE
E PUÒ CONDIZIONARE
SENSIBILMENTE
I RISULTATI FINALI
qualità
embrione
caratteristiche
cliniche giorno
trasferimento
seme
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I NOSTRI RISULTATI
100
90
80
70
60
FLUSH
RECUPERI
gravidanze
50
40
30
20
10
0
2001
2002
2003
18
