AMPLIQUALITY PROCEDURA HPV-SM Cod. 03-37 DNA ESTRATTO Kit per lo screening del Papilloma Virus Umano mediante amplificazione del DNA nella regione del gene della proteina L1 -------- 200 min -------- AMPLIFICAZIONE B INTRODUZIONE Le diverse proprietà oncogene associate a ceppi differenti di HPV richiedono che il test diagnostico sia in grado da una parte di evidenziare con la massima sensibilità la positività del campione per infezione da HPV, dall’altra di discriminare i ceppi di HPV a basso e ad alto rischio oncogeno. La strategia di screening adottata in questo kit prevede un’amplificazione nella regione L1 del genoma virale. La regione L1 infatti risulta particolarmente conservata e permette quindi di rilevare la presenza di un elevato numero di genotipi virali differenti. VISUALIZZAZIONE Premix monodose pronta all’uso SEQUENZIAMENTO (opzionale) 1 2 3 4 5 L’amplificato ottenuto dai campioni positivi al virus può essere poi sequenziato, in modo da valutare l’oncogenicità o meno del genotipo presente. Il primer HPV 2 necessario per il sequenziamento viene fornito su richiesta del cliente. CARATTERISTICHE TECNICHE Fig 1: Elettroforesi su gel d'agarosio al 3% NUMERO DI TEST: 25 o 50 test. STABILITA’: 6 mesi. MATERIALE DI PARTENZA: DNA estratto da tamponi cervico-vaginali e biopsie fresche, congelate o fissate ed incluse in paraffina. ESTRAZIONE: Rapida, su colonnina. 1. 2. 3. 4. 5. Marcatore di Peso Molecolare Controllo negativo amplificazione DNA di HPV Controllo positivo amplificazione DNA HPV (449bp-458 bp) Controllo negativo amplificazione DNA di β-globina Controllo positivo amplificazione DNA di β-globina (268 bp) INFORMAZIONI PER GLI ORDINI REGIONE AMPLIFICATA: gene della proteina L1. CONTROLLO POSITIVO: plasmidico ricombinante). incluso: HPV 54 (DNA CONTROLLO INTERNO: Amplificazione del gene della Beta-globina. Cod. Prodotto Confez. 03-37A AMPLIQUALITY HPV-SM AMPLIQUALITY HPV-SM amplification reagents 25/50 test 03-37R AMPLIFICAZIONE: in provette monodose pronte all’uso. RIVELAZIONE: elettroforesi su gel di agarosio. SPECIFICITA’: L’allineamento dei primers nelle più comuni banche dati ha rivelato l’assenza di appaiamenti aspecifici, e garantito l’amplificazione di almeno 32 genotipi virali. Non sono stati rilevati fenomeni di cross reazione con DNA genomico o di altri microrganismi patogeni. 25/50 test REFERENZE Stoler M H, Pathology Case Reviews 2:1, 8-16, 1997 Zur Hausen H., Biochim. Biophys Acta, 1288: F55-F78, 1996 SENSIBILITA’: fino a 100 copie di HPV 18 (Bauer et al., 1991) PRODOTTI CORRELATI: Cod Prodotto Confez. Tecnologia 03-33 AMPLIQUALITY HPV-SCK 100 tests Raccolta campione SCH TEC_HPV-SM_A-R_R080211 AB ANALITICA srl Via Svizzera 16 – 35127 PADOVA – ITALIA Tel. 049 761698 - Fax 049 8709510 e-mail: [email protected] www. abanalitica.it