Testi del Syllabus Resp. Did. TONAZZI Annamaria Matricola: 010297 Anno offerta: 2014/2015 Insegnamento: 27002231 - BIOLOGIA MOLECOLARE Corso di studio: 0724 - SCIENZE E TECNOLOGIE BIOLOGICHE Anno regolamento: 2013 CFU: 7 Settore: BIO/11 Tipo Attività: B - Caratterizzante Anno corso: 2 Periodo: Secondo Semestre Sede: UNIVERSITA' DELLA CALABRIA Testi in italiano Tipo testo Testo Lingua insegnamento Italiano Contenuti Struttura del DNA. Struttura, numerazione e nomenclatura dei nucleotidi. Legame fosfodiestere. Trasformazione (esperimento di Avery,Mac Leod e Mc Carty). Esperimento di Hershey e Chase. Regole di Chargaff. Modello di Watson e Crick. Strutture del DNA (forma A, B e Z). Chimica degli acidi nucleici. Duplex ibridi. Trasformazioni non enzimatiche dei nucleotidi. Metilazione del DNA. Sequenziamento del DNA Metabolismo del DNA Modello semiconservativo (esperimento di Meselson e Sthal). Direzionalità delle forcine di replicazione. Origini di replicazione singole e multiple. Enzimologia della replicazione: Topoisomerasi, Polimerasi, Single-strand binding protein (SSB), Elicasi, Topoisomerasi, Primasi e DNA ligasi. Attività di proofreading della polimerasi. Struttura tridimensionale e meccanismo molecolare della reazione catalizzata dalla DNA polimerasi III e dalla DNA Tipo testo Testo ligasi. Meccanismi biologici che salvaguardano il DNA. Mutazioni e cancerogenesi, test di Ames. Sistemi di riparazione del DNA: riparazione di errori di appaiamento di basi, per escissioni e riparazione diretta. Riparazione soggetta ad errori, sistema SOS. La ricombinazione del DNA. Ricombinazione omologa e sito specifica. Intermedio di Holliday. Metabolismo dell’RNA Unità di trascrizione. RNA polimerasi batterica: enzima “core” e sigma. Regioni promotori nei batteri: identificazione del sito d’inizio e dei siti di legame dell’ RNA polimerasi (punto di inizio, Pribnow box, footprinting.Terminazione della sequenza –35). Tecnica del trascrizione nei batteri: sequenze di terminazione, terminotori RHO indipendenti, terminatori RHO dipendenti. Modificazioni post-trascrizionali dei pre-RNA nei procarioti. Organizzazione dei pre-tRNA, pre-rRNA batterici meccanismi di modificazione dei pretRNA e pre-rRNA batterici:, enzimologia delle modificazioni posttrascrizionali (RNAasiP, RNAasiD, Nucleotidil-CCA–transferasi, RNAasi III). Degradazione dell’RNA. Ribozimi Sintesi proteica tRNA: struttura, funzione, aminoacil-tRNA sintetasi, tRNA iniziatore. rRNA: struttura, funzione. Ribosomi: subunità maggiore e minore, componenti proteiche dei ribosomi, ruolo nella sintesi proteica. Fasi d’inizio, allungamento, e terminazione della sintesi proteica nei procarioti. Caratteristiche strutturali e funzionali dei fattori proteici coinvolti nella sintesi proteica. Codice genetico Codice genetico: degenerazione, vacillamento dell’anticodone, codoni di inizio e di terminazione, mutazioni non-senso e di senso. Quadri di lettura del codice genetico. DNA del batterifago X174. Tipo testo Testo Regolazione dell’espressione genica nei procarioti Geni strutturali e regolatori. Struttura dell’operone. Regolazione negativa e positiva: sistemi inducibili e reprimibili. Proteine CRP. Operone del lattosio, operone dell’arabinosio, operone del triptofano. Retrovirus Trascrittasi inversa. Genomi dei retrovirus. Virus dell’HIV, meccanismo dell’infezione, stadio precoce e tardivo, inibitori della trascrittasi inversa e della proteasi. Ruolo nella cancerogenesi di alcuni retrovirus. Retrovirus ed espressione del gene dell’amilasi nelle ghiandole parotidee umane. Retrovirus e transgeni. Plasmidi Enzimi di restrizione Testi di riferimento Nelson-Cox: I principi di biochimica di Lehninger (terza edizione) Watson: Biologia molecolare del gene. Ed. Zanichelli Allison: Fondamenti di biologia molecolare. Ed. Zanichelli (prima edizione) Lewin: Il Gene VI. Ed. Zanichelli Appunti di lezione Obiettivi formativi Il corso è finalizzato alla preparazione degli studenti nel campo della biologia molecolare ed in particolare a fornire solide conoscenze dei principi di base di questa materia. L'obiettivo da conseguire sarà la conoscenza approfondita della biologia molecolare degli organismi procariotici come ad esempio dei meccanismi molecolari della replicazione, della trascrizione, della sintesi proteica e della regolazione genica. Metodi didattici Lezioni Modalità di verifica dell'apprendimento Prova Orale Testi in inglese Tipo testo Testo Lingua insegnamento Italian Contenuti Structure and function of nucleic acids, DNA, RNA and Proteic metabolism. Genic expression regulation. Retroviruses. Plasmids. Tipo testo Testo Testi di riferimento Biologia molecolare del gene: Watson (ed. Zanichelli) Obiettivi formativi The course will prepare students in the Molecular Biology field and especially it will give clear and strong knowledge of fundamentals of the subject. The aim will be the complete knowledge of molecular biology of prokaryotic organisms such as molecular mechanism of replication, transcription, proteic synthesis and regulation of the transcription processes. Metodi didattici Lectures Modalità di verifica dell'apprendimento Oral