METODICHE DI CHIMICA CLINICA
LDH Monodose
PRINCIPIO DI REAZIONE:
Piruvaro + NADH -------------------- L-Lactato + NAD
La lattico deidrogenasi (LDH) catalizza la riduzione del piruvato a lattato, con ossidazione di NADH, formando NAD.
L'attività dell'enzima viene determinata misurando a 340nm il tasso di conversione del NADH in NAD.
CONTENUTO DEL KIT:
R1 (24 cuvette predispensate): composizione = Tampone fosfato pH 7.30 50mM, piruvato 0.60 mM.
R2 (1 gocciolatore): composizione = NADH 0.18 mM.
CAMPIONI:
Siero non emolizzato, plasma (EDTA o eparina). L'attività dell'LDH è stabile 7 gg. nei campioni conservati a 2-8°C.
STABILTÀ:
Il reagente è stabile se conservato tra i 2 e gli 8°C fino alla data di scadenza riportata sulla confezione.
CONDIZIONI OPERATIVE:
Lunghezza d'onda:
340 nm
Percorso ottico:
1 cm
Temperatura:
37°C
Tipo di reazione:
Tempo d'incubazione:
Delay:
Cinetica 3
60 secondi
120secondi
PROCEDURA:
Sugli strumenti Sirio, Vet Evolution e Clin Check Plus
1. Selezionare il programma LDH.
2. Aggiungere 4 gocce di R2 alla cuvetta contenente R1 ed incubare nel termostato a 37°C per 2-3 minuti.
3. Aggiungere 10 l di campione alla cuvetta e agitare.
4. Inserire la cuvetta nella cella di lettura e premere READ/INVIO; dopo 3 minuti comparirà sul display il valore relativo alla
concentrazione di LDH (espressa in U/l) presente nel campione.
Sullo strumento Prime – Vet
1. Accendere l’interruttore posizionato nella parte anteriore dello strumento, inserire la data odierna, e premere ENTER.
2. Scegliere la funzione F4 = START OPERATION. Quindi premere il tasto LDH.
3. Fare l’auto-zero premendo OD REPEAT. Attendere il tempo necessario per l’incubazione e premere ENTER per
confermare l’auto-zero. Sul display comparirà “TEMPERATURE OK”. Quindi premere nuovamente ENTER.
4. A questo punto sarà possibile inserire il numero di indentificazione (ID) del paziente premendo F1 per registrare l’ID
oppure F2 se non si desidera registrarlo.
5. Aggiungere 4 gocce di R2 alla cuvetta contenente R1, agitare e incubare per 2-3 minuti nel termostato a 37°C.
6. Aggiungere 10µl di campione alla cuvetta e agitare.
7. Inserire la cuvetta nella cella di lettura e premere OD REPEAT; dopo tre minuti comparirà sul display il valore relativo alla
concentrazione di LDH (espressa in U/l) presente nel campione.
CARATTERISTICHE:
Il metodo è lineare fino a 1200 U/L.
VALORI DI RIFERIMENTO:
Cane:
10 - 200 U/l
Gatto:
10 - 200 U/l
Cavallo:
< 460
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