Dogma centrale della biologia RNA (acido ribonucleico) - a singolo filamento - 4 ribonucleotidi: • Gruppo fosfato • Base azotata (A, G, C, U) • Zucchero ribosio Tipi di RNA: 1- RNA ribosomiale, rRNA, costituisce i ribosomi 2- RNA di trasferimento, tRNA, traduce la sequenza di basi nel mRNA e porta gli AA al ribosoma 3- RNA messaggero, mRNA, porta il messaggio dal DNA ai ribosomi 4- RNA trascritto primario, hnRNA 5- piccoli RNA nucleari, snRNA Trascrizione: sintesi di RNA diretta da DNA •Vengono trascritti geni per tutti i tipi di RNA •Negli Eucarioti esistono 3 RNA polimerasi diverse, I, II e III •Nei Procarioti c’è una sola RNA polimerasi, α2β’βσ La trascrizione richiede: -RNA polimerasi -DNA stampo -Ribonucleosidi trifosfati (ATP, CTP, GTP, UTP) -Fattori di trascrizione negli Eucarioti RNA polimerasi si lega nel DNA a livello del promotore e aggiunge nucleotidi all’estremità 3’ del nuovo filamento Il filamento di RNA si accresce in direzione 5’-3’ Promotore nei Procarioti Debole attività esonucleasica, proof-reading dell’RNA Nei Procarioti esistono due segnali di terminazione della trascrizione che differiscono per la richiesta della proteina Rho Promotori negli Eucarioti FATTORI GENERALI DI TRASCRIZIONE DEI GENI EUCARIOTICI TERMINAZIONE DELLA TRASCRIZIONE DELL’RNA EUCARIOTICO Segnali diversi a seconda del tipo di RNA polimerasi • RNA polimerasi I: un fattore proteico riconosce un segnale di terminazione di 18 nucleotidi • RNA polimerasi II: gli mRNA vengono tagliati 10-35 nucleotidi a valle della sequenza AAUAAA prima che la trascrizione sia terminata • RNA polimerasi III: i segnali di terminazione sono corte sequenza di U senza richiedere fattori proteici ausiliari Accoppiamento di trascrizione e traduzione nelle cellule batteriche Negli eucarioti trascrizione e traduzione sono spazialmente e temporalmente separate MATURAZIONE DELL’RNA Composizione molecolare dei ribosomi Metilazione del ribosio, -OH in 2’ Nel nucleolo Diidrouracile Pseudouridina Inosina Ribotimina Modificazioni a livello delle basi e dello zucchero nel tRNA Cappuccio spliceosoma SPLICING ALTERNATIVO