CORSO DI BIOCHIMICA E BIOLOGIA MOLECOLARE

CORSO DI BIOCHIMICA E BIOLOGIA MOLECOLARE
PROGRAMMA DI BIOLOGIA MOLECOLARE
DOCENTE: PROF M.C.ROSATELLI
DENATURAZIONE E RINATURAZIONE DEL DNA
Concetti generali
Ibridizzazione del DNA, sonde molecolari.
Ricerca mutazioni puntiformi mediante analisi del DNA con elettroforesi su gel denaturanti
(DGGE)
DNA SATELLITE
Concetti generali
Utilizzo di minisatelliti e microsatelliti come marcatori polimorfici del DNA
REPLICAZIONE IN VITRO DEL DNA
Ruolo della DNA pol.I nelle metodologie del DNA ricombinante
Southern Blotting e sonde molecolari
Amplificazione enzimatica del DNA (PCR)
Sequenziamento del DNA col metodo di Sanger
TRASCRIZIONE E REGOLAZIONE TRASCRIZIONALE DELL'ESPRESSIONE GENICA IN
EUCARIOTI
Inizio della trascrizione, promotori di classe I, II e III
Potenziatori o enhancer, meccanismo d'azione, sequenze caratteristiche
Fattori di trascrizione, meccanismo d'azione, sequenze di riconoscimento, domini proteici
caratteristici
Recettori stereoidei
Regolazione della espressione genica attraverso la formazione del complesso d'inizio della
trascrizione
Organizzazione della cromatina e sua funzione nella regolazione dell'espressione genica,
nucleosoma
Funzione regolatoria dei siti ipersensibili, Locus Control Region nella cluster dei geni beta globinici
Regolazione dell'espressione genica attraverso metilazione delle isole CpG, genomic imprinting,
Sindromi di Prader-Willi e Angelman
MATURAZIONE RNA
Maturazione RNA eterogeneo nucleare, cappuccio, splicing, poliadenilazione
REGOLAZIONE POST-TRASCRIZIONALE DELL'ESPRESSIONE GENICA
IL SISTEMA IMMUNITARIO
Differenziazione somatica ed espressione genica
DAL GENE ALLA MALATTIA
Delezioni, inserzioni, sostituzioni nucleotidiche, mutazioni frameshift.
Importanza delle diverse sequenze geniche conservate, correlazione genotipo fenotipo nelle (
talassemie, geni modificatori
DAL GENE ALLA PROTEINA
Polimorfismi biallelici e multiallelici del DNA, analisi di linkage, clonaggio per posizione, DNA
databases
genomica, proteomica, farmacogenomica