Protocollo di autopsia

AUTOPSIA DEI
CETACEI
Corso di formazione sulla gestione degli spiaggiamenti di
animali marini
Viareggio 19-20 settembre 2006
Giuliana Terracciano
IZS Lazio e Toscana sez. di Pisa
AUTOPSIA CETACEI
•I cetacei, come tutta la fauna selvatica, sono patrimonio
indisponibile dello Stato, tutte le specie inoltre sono comprese
nella Convenzione di Washington, che regolamenta il commercio
e la detenzione delle specie in via di estinzione.
•In questo quadro normativo i veterinari ASL possono essere
individuati come i referenti ufficiali autorizzati per gli interventi
di tipo sanitario sui cetacei vivi arenati e sulle loro carcasse.
•Nel caso di rinvenimento di carcasse di cetacei spiaggiati
l’autopsia deve essere effettuata da un veterinario eventualmente
coadiuvato da figure professionali qualificate (biologi esperti in
animali marini).
•Un cetaceo spiaggiato rappresenta una fonte preziosa di
informazioni scientifiche ai fini della conoscenza della specie e
delle sue patologie.
Il Regolamento di Polizia Veterinaria D.P.R.320/54 (art. 5 e 12)
prevede l’obbligo di denuncia malattie zoonotiche e adozione
di provvedimenti relativi in caso di focolaio
Salmonellosi
Possibili patologie
trasmissibili all’uomo e ad
altri animali
Mal rossino
Epatite virale
Streptococcosi
Stafilococcosi
Pasteurellosi
Norme di igiene in corso di autopsia sul territorio
• Tenere lontano le persone estranee.
•Stendere telo di plastica al di sotto dell’animale oppure
predisporre il contenimento dei liquami con segatura
giornali,paglia ecc
• Usare dispositivi di protezione individuale (DPI)
(guanti resistenti, stivali di gomma, mascherina)
Materiale occorrente per la necroscopia ed i relativi prelievi
• Coltelli - forbici- bisturi - siringhe-pinze-sega- trinciaossa
• Barattoli con tappo a vite di diverse dimensioni
• Tamponi sterili, provette, siringhe.
• Buste di plastica per congelatore di diverse dimensioni
• Pennarelli indelebili
• Alcool etilico
• Borsa frigo
I prelievi devono essere effettuati nel più breve tempo
possibile e conservati in funzione del tipo di ricerca in
Frigo-Congelatore- Formalina -Alcool.
Protocollo di base per prelievi autoptici
•Riportare nella scheda di autopsia almeno i seguenti parametri :
specie, sesso, località del ritrovamento, stato di
conservazione della carcassa, alcuni dati biometrici
•E’ necessari campionare tutti i tessuti e gli organi dell’animale
•Effettuare per alcuni reperti più prelievi in funzione delle
ricerche da effettuare (microbiologico tossicologico ecc)
• Prelevare i parassiti dividendoli per tipologia e localizzazione
•Conservare in singolo contenitore ogni prelievo riportando su
ognuno il materiale che contiene.
•Fare un elenco dei tessuti ed organi prelevati
•Effettuare foto
Encefalo:
Apertura della scatola cranica: (1 taglio parallelo alla cresta
nucale + 1 taglio a metà tra i condili occipitali + 2 tagli lungo
l’asse parietale per congiungere i precedenti tagli.
Asportazione di tutto l’encefalo
Separazione dei due emisferi con conservazione
rispettivamente in formalina e in frigo (+4°C) o congelatore
(-20°C).
Porre sul fondo del contenitore del cotone in modo da far
penetrare bene la formalina
Apparato genitale:
Per testicoli di dimensioni superiori ai 10 cm prelevare la parte
centrale e porla in formalina e in alcool al 70%
Per utero sup a 4 cm di larghezza e 20 cm di lunghezza separare le
due parti e specificare la lateralità.
Quantità da prelevare :
Da tessuti ed organi: 150 gr ca di forma cubica (microb e tossic.)
Contenuto intestinale : 30 ml
Sangue : 20 ml (dal cuore)
Modalità di conservazione.
esami batteriologici e:
virologici
REFRIGERATI A +4°C o
CONGELATI A –20°C
Esami istologici:
Formalina neutra tamponata al
10% (5cm di dimensione)
esami tossicologici
CONGELARE A –20°c
PRELIEVI DA EFFETTUARE PER ESAMI
MICROBIOLOGICI ed ISTOLOGICI
aFegato
a Rene
a Polmone (anche grossi bronchi)
aCervello
aLinfonodi (meseraici,mediastinici,prescapolari) a Timo
a Milza
a Intestino
a Pancreas
a Stomaco
a Trachea
a Miocardio
a Organi genitali
a Sangue
a Tiroide
Prelievi per esami tossicologici
Cute con sottocute
Muscolo (mm dorsali in prossimità della
pinna dorsale)
Melone
Cervello
Rene
Cuore
Polmone
Sangue
Tessuto osseo
Stomaco
Latte
Feto
Prelevare
almeno 200 gr
di materiale
Prelievi per esami istologici
I tessuti devono essere posti in formalina appena prelevati,
di circa 5cm di dimensioni.
Devono essere freschi (non dopo congelamento)
Rapporto tra il reperto ed il volume della formalina deve
essere di 1:5.
Rinnovare il liquido dopo 24 h.
Composizione della formalina neutra tamponata al 10%.
Formaldeide(37-40%)
100ml
acqua distillata
900ml
fosfato di sodio dibasico
6,5gr
fosfato di sodio monobasico 4 gr
CONSERVAZIONI
I PARASSITI DEVONO ESSERE CONSERVATI IN
ETANOLO AL 70% E GLICERINA 5%
CONSERVARE IN CONGELATORE IL
CONTENUTO DELLO STOMACO. NON in
formalina perché i cefalopodi vengono distrutti.
DENTI ODONTOCETI : CONSERVAZIONE IN
FORMALINA AL 10% ( determinazione dell’età)
FANONI CONGELARE A –20°C.
Per esami genetici prelevare cute muscolo fegato e costola e
congelare a –20°C
Tabella riassuntiva modalità di conservazione
Reperto
Conservazione
Parassiti
alcool/congelatore
denti
formalina
fanoni
congelatore
genitale
formalina/alcool
contenuto stomaco
congelatore
Per genetica
congelatore
Cetacei esaminati dall’IZS di Pisa
Dal 1991 al 2000
1991: 1 Stenella
1992: 2 Stenelle
1993: 2 Stenelle
1 Tursiope 1 Balenottera minore
1994: 1 Tursiope
1995: 1 Stenella
1 Balenottera comune
1996: 1 Balenottera comune
1997:
-
1998:
1 Delfino (?)
1999
-
2000: 1 Tursiope
Isolamenti batterici :
Staphylococcus sp
Pseudomonas sp.
Vibrio alginolyticus
Aeromonas sp.
Parassiti riscontrati:
Protozoi
(Toxoplasma g.)
Trematodi (Pholeter g. Ogmogaster a.)
Cestodi
(Monorigma spp,Phyllobotrium d.)
Scheda autopsia1
balenottera minore
Scheda di autopsia
Specie : Balenoptera acutorostrata (Balenottera minore)
Sesso:maschio
Peso: 28 ql
Lunghezza: 7,5 mt
Data: 16/05/93
Località: litorale di Viareggio
Comune : Viareggio
Stato di conservazione: buono
Data presunta della morte:…….
Luogo dell’autopsia: macelli di Viareggio
Operatori:….
Prelievi autoptici effettuati da…..
Collocati presso…..
Scheda autopsia 2
balenottera minore
ESAME ANATOMO-PATOLOGICO
Testa:
Cute e sottocute:
Cheratite monolaterale sx
Presenza di numerosi parassiti infissi nello spessore della
cute.
Cavità addominale
Intestino congesto con scarsa presenza di
materiale alimentare
Aree di flogosi a carico dello stomaco
Fegato di colore giallo-ocra (megalico).
Splenomegalia con polpa procidente al taglio
Cavità toracica:
Abbondante liquido pericardico giallo citrino
(idropericardio)
Presenza di grasso pericardico gelatinoso
Scheda autopsia 3 balenottera minore
Cavità toracica:
Polmoni.intensa congestione ed edema in presenza
di enfisema interlobulare.
Effettuati prelievi per ricerche:
batteriologiche, virologiche,istologiche e tossicologiche
ESITI
Esame batteriologico : polimicrobismo aspecifico da polmone.
Esami virologici : Test di sieroneutralizzazione nei confronti di
CDS (canine distemper virus): POSITIVO al titolo di 1:16
Esami immunoistochimici: Confermato infezione morbillivirale
Scheda autopsia 1
Stenella c.
Scheda di autopsia
Specie.: Stenella coeruleoalba
Sesso: maschio giovane
Peso:……. Lunghezza:…….
Data: 1/09/93
Località ritrovamento: litorale di Viareggio
Comune : Viareggio
Stato di conservazione:buono
Data presunta della morte:……………………..
Luogo dell’autopsia: macelli di Viareggio
Operatori:……………………………………
Prelievo autoptici effettuati da………………..
Collocati presso………………………………..
Scheda autopsia 2
Stenella c.
Esame esterno:
Soggetto cachettico
Presenza di escoriazioni
Steatonecrosi diffusa del grasso
sottocutaneo
Cavità
addominale
Ulcere gastriche nella 1 e 2 camera .
Enterite con intensa congestione della
mucosa
Presenza di due becchi di calamaro nello
stomaco
Iperplasia dei linfonodi meseraici
Scheda autopsia 3
Stenella c.
Cavità toracica
App.genitale
Sistema nervoso
Enfisema polmonare
Presenza di cisti parassitarie
Iperemia delle meningi
Prelievi effettuati per ricerche: batteriologiche, virologiche,istologiche
(tossicologiche?)
ESITI
Esame batteriologico : isolato Bacillus spp da polmone.
Esami immunoistochimici: lesioni da infezione morbillivirale
SCHEDA DI AUTOPSIA
Specie : Balenoptera physalus (Balenottera comune)
Sesso: maschio
Data:
26/05/95
Località: Darsena Toscana (Li)
Comune : Livorno
Stato di conservazione: buono
Data presunta della morte: 25/05/96
Luogo dell’autopsia: Discarica del Cisternino (LI)
Operatori:….
Prelievi autoptici effettuati da…..
Collocati presso