Il ciclo cellulare dei mammiferi Sintesi DNA e sintesi istoni Crescita rapida e preparazione per la sintesi del DNA S fase G0 Cellule quiescenti G1 fase G2 M fase fase Crescita e preparazione per la divisione cellulare Mitosi 1 2 3 Replicazione del DNA è semi-conservativa Filamenti di DNA parentali Ogni filamento parentale serve da stampo per un filamento figlio Filamenti di DNA figli 4 5 Origini di replicazione del DNA in cromosomi di mammiferi origini di replicazione del DNA (ogni ~150kb) 5’ 3’ 3’ 5’ replicazione bidirezionale bolla replicazione fusione di bolle 5’ 3’ 5’ 3’ 3’ 5’ cromosomi figli 3’ 5’ 6 7 8 9 10 11 DNA DNA Reazione catalizzata da DNA polimerasi • tutte le DNA polimerasi richiedono un primer con un gruppo libero 3’ OH • tutte le DNA polimerasi catalizzano crescita della catena in direzione 5’ a 3’ • alcune DNA polimerasi hanno un’attività proofreading 3’ a 5’ 12 13 14 15 16 Proprietà delle DNA polimerasi DNA polymerases of E. coli_ Polimerizzazione: 5’ - 3’ Proofreading esonucleasi: 3’ - 5’ esonucleasi riparazione : 5’ - 3’ pol I si si si pol II si si no pol III (core) si si no DNA polimerasi III è il principale enzima replicativo DNA polimerasi I ha un ruolo nella replicazione per riempire i gaps e tagliare i primers sul filamento lagging, ed è anche un enzima riparo • tutte le DNA polimerasi richiedono un primer con un gruppo3’ OH libero •tutte lel DNA polimerasi catalizzano crescita catena in direzione 5’ - 3’ •alcune DNA polimerasi hanno un’ attività proofreading 3’ - 5’ 17 o replisoma 18 p p 19 20 21 22 23