Indicare alcuni esempi di promotori inducibili utilizzati per l

Possibili quesiti di esame
1. Indicare alcuni esempi di promotori inducibili utilizzati per l’espressione di proteine eterologhe:
enzimi e/o regolatori coinvolti, molecole induttrici, condizioni di crescita richieste ecc.
2. Il neurotrasmettitore umano NFG-xyz, costituito da 79 amminoacidi, viene espresso in
Escherichia coli ma non mostra alcuna attività biologica. Ipotizzate possibili motivi per questo
problema, e indicate delle procedure sperimentali per ovviare al problema.
3. L’ipotetica proteina AbcD è comune a molti batteri Gram positivi ed ha una alta specificità
antigenica, rendendola un buon candidato per la produzione di vaccini. E’ composta da 243
amminoacidi e la sua conformazione attiva richiede la formazione di 3 ponti disolfuro.
Suggerite uno o più programmi di lavoro per l’espressione di AbcD in Escherichia coli, indicando
le possibili difficoltà, e tenendo presente che lo scopo del lavoro è la produzione di questa proteina
come antigene.
4. Il clorobenzoato è un composto che può essere degradato da alcuni ceppi del batterio
Burkholderia; questi batteri rimuovono il gruppo cloridrico producendo benzoato, che può essere
utilizzato come fonte di carbonio da diversi altri batteri, tra cui Pseudomonas.
I geni per la degradazione di clorobenzoato e benzoate si trovano su plasmidi. In seguito ad un
incidente, un suolo viene contaminato con clorobenzoato ad una concentrazione di 10.000 volte
superiore ai limiti di legge.
Che conseguenze vi aspettate sulla popolazione microbica dell’ambiente contaminato?
Come determinereste la presenza di potenziali batteri degradatori?
Come potreste accelerare l’efficienza della degradazione utilizzando strategie di biostimolazione e
bioaugmentazione?