Progetto Prof. Giordano Stabellini: Purificazione e

Fondazione CARIPLO
Bandi 2006
PRE-PROPOSTA PER IL BANDO
“PROMUOVERE LA RICERCA SCIENTIFICA E TECNOLOGICA
IN TEMA DI SALUTE E SCIENZE DELLA VITA”
TEMA DI RICERCA:
genomica e proteomica per la prevenzione e la diagnosi precoce delle
malattie;

studi sperimentali basati su metodologie che prevedano l’utilizzo delle
cellule staminali, escluse quelle staminali embrionali umane, in relazione
alla riparazione tessutale

X
.
TITOLO DEL PROGETTO: Purificazione e caratterizzazione di sotto-popolazioni cellulari staminali
multipotenti da polpa dentale umana e loro implicazioni in vitro per terapie basate su trapianti di
cellule in vivo.
AREA DISCIPLINARE DEL PROGETTO: 5 Scienze Biologiche
RESPONSABILE SCIENTIFICO:
Dipartimento di Morfologia Umana
GIORDANO STABELLINI
Professore Straordinario SSD BIO 17
ALTRI PARTECIPANTI UNIMI (nome e struttura di appartenenza):
Dipartimento
di Claudia Dolci
Morfologia Umana
Ricercatore Confermato SSD BIO16
Nicoletta Gagliano
Ricercatore SSD BIO 16
Carlo Torri
Dottorando Ricerca
Gianluca Tartaglia
Cultore della materia SSD BIO16
PARTECIPANTI DI ALTRI ENTI (nome e struttura di appartenenza):
Dipartimento
di Ennio Becchetti
Medicina Sperimentale e
Scienze Biochimiche
Professore Ordinario SSD BIO 17
Professore Straordinario SSD BIO 17
Paola Locci
Mario Calvitti
Ricercatore Confermato SSD BIO 17
Fondazione CARIPLO
Bandi 2006
DURATA DEL PROGETTO: Durata del progetto anni 2
COSTO COMPLESSIVO DEL PROGETTO: : 500.000 euro
IMPORTO RICHIESTO ALLA FONDAZIONE: 190.000 euro
IMPORTO RESO DISPONIBILE DALLA STRUTTURA: 20000 euro
PUBBLICAZIONI RECENTI DEL GRUPPO DI RICERCA (max 5):
1) Lilli C, Marinucci L, Stabellini G, et al. Biomembrane enriched with TGFbeta-1 favor bone
matrix protein expression by human osteoblasts in vitro. J. Biomed. Mater. Res.,
2002;63:577-582.
2) Pierdomenico L, Bonsi L, Becchetti E, et al. Multipotent mesenchymal stem cells with
immunosuppressive activity can be easly isolated from dental pulp. Transplantation,
2005;80:836-842.
3) Bodo M, Baroni T, Bellucci C, et al. Unique human CD133(+) leucemia cell line and its
modulation towards a mesenchymal phenotype by FGF2 and TGFbeta(1). J. Cell. Physiol.,
2006;206:682-692.
4) Marinucci L, Becchetti E, Stabellini G, et al. Biocompatibility of collagen
membranes
crosslinked with glutaraldehyde or diphenylphosphorylazide: an in vitro study. J Biomed
Mater Res A. 2003;67:504-9.
5) Marinucci L, Balloni S, Stabellini G, et al. Biostite, an enriched hydroxyapatite biomaterial,
is a very good substrate for osteogenic induction of hMSC. J. Biom. Med. Res., Submitted,
2006.
DESCRIZIONE DEL PROGETTO (analisi del bisogno, obiettivi scientifici, piano di
intervento, piano finanziario, organizzazione; max 3500 caratteri spazi inclusi):
Obiettivi della ricerca
Studi recenti hanno identificato cellule staminali in diversi tessuti ed organi umani adulti, come cute,
muscolo, midollo osseo, grasso e, ultimamente, anche polpa dentale. I1 nostro gruppo di ricerca è in
grado di isolare cellule staminali dalla polpa dentale umana, di espanderle in vitro, di caratterizzarle dal
punto di vista fenotipico e di indurle in senso osseo o dentinale.
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Attualmente però, il pool di cellule staminali espanse in vitro, sia nostre che di altri ricercatori, consiste
in una popolazione eterogenea di cellule, con possibili differenti potenzialità evolutive. E’ quindi di
grande interesse ottenere sottopopolazione pure di cellule staminali.
La tecnica che sarà impiegata è quella della selezione immuno-magnetica che richiede l’impiego di
anticorpi e apparecchiature già disponibili.
Saranno utilizzati anticorpi in grado di riconoscere antigeni riferiti a cellule staminali di tipo stromale
quali, ad esempio, CD29, P75, CD73, ed anticorpi come lo STRO1 che è considerato marcatore per
cellule ad evoluzione ossea e cartilaginea.
Modalità di attuazione della ricerca:
1° fase
Marcatura e purificazione delle popolazioni cellulari staminali ottenute mediante selezione
immunomagnetica (MACS), ad esempio con anticorpo anti STRO-1, marcatore comune a cellule
con destino osseo o cartilagineo. Separazione delle cellule positive da quelle negative all’anticorpo
e recupero delle frazioni cellulari ottenute. Entrambe le frazioni cellulari, saranno analizzate in
citofluorimetria per l'analisi della purezza cellulare.
2° fase
Induzione della popolazione staminale isolata verso una determinata linea differenziativa: ossea e
dentinale. A tale scopo, le cellule verranno mantenute in specifici terreni differenziativi.
3° fase
Le popolazioni cellulari staminali purificate verranno indotte in vitro o in vivo, dopo impianto, a
formare nuovo tessuto osseo o nuovo tessuto dentinale per integrare parti di tessuto danneggiato
nello stesso soggetto (trapianto autologo) o anche, seppure con qualche riserva dovuta al potenziale
rischio di rigetto, in soggetti diversi (trapianto eterologo), data la recentemente dimostrata bassa
immunogenicità delle cellule staminali rispetto alle adulte.
Prof. Giordano Stabellini
10 Marzo 2006
Fondazione CARIPLO
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Valido solo per il bando: SALUTE E SCIENZE DELLA VITA
Voci
Personale strutturato
Euro
%
Euro da
Euro da far
finanziati al richiedere alla quadrare con le
Fondazione spese generali
250.000,00
50,00%
0%
200.000,00
60.000,00
50.000,00
45.000,00
45.000,00
40,00%
70%
140.000,00
50.000,00
10,00%
100%
50.000,00
-
100%
190.000,00
38%
Deve essere MINIMO il 56,67% del totale progetto
Deve essere MINIMO Euro 170,000
Spese Addizionali totali
Personale ex novo
Materiale di consumo
Prestazioni di terzi
Missioni e Pubblicazioni
Cariplo
copre il
0%
60.000,00
70%
Deve essere MASSIMO il 33,33% del totale progetto
Deve essere MINIMO Euro 100,000
Spese generali
Deve essere OBBLIGATORIAMENTE il 10,00% del totale progetto
Deve essere MINIMO Euro 30,000
Totale
500.000,00
100,00%
Compilare solo gli spazi evidenziati in giallo e nell'ordine sotto indicato:
1. le spese addizionali nella misura minima di euro 100.000 totale
2. le spese di personale strutturato nella misura minima del 56,67%
Note
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Le spese generali non devono essere rendicontate in modo analitico
Se la Fondazione riduce il finanziamento non è consentito ridurre il cofinanziamento
E' possibile rendicontare nelle spese addizionali (personale ex novo) il costo dei Dottorandi che partecipano al progetto