LISOZIMA Principali meccanismi di assistenza ala m catalisi enzimatica • • • • • • Catalisi acido-base C t li i covalente Catalisi l t Catalisi da ioni metallici Catalisi elettrostatica Catalisi da effetti di prossimita’/orientam. prossimita /orientam. Catalisi per legame preferenziale dello stato di transizione Page 373 Diagramma schematico dell’involucro cellulare in (a) gram-positive r m p sitiv bacteria b ct ri ; (b) gram-negative r m n tiv b bacteria. ct ri Page e 507 Il polisaccaride alternato NAG–NAM β(1Æ4) componente la parete cellulare. cellulare Page 373 Struttura schematica del peptidoglicano. (Gly)5 (Gly)5 Page 373 Struttura schematica del peptidoglicano componente la parete cellulare in S. aureus. Page e 507 Struttura primaria del lisozima HEW Page e 509 Struttura 3D del lisozima HEW Struttura 3D del lisozima HEW Page e 509 (kin 9) (kin_9) Page e 508 Velocita’ di idrolisi di alcuni oligosaccaridi, catalizzate da Lisozima HEW Page e 509 Struttura 3D del lisozima HEW in complesso con NAG3 e in presenza di 3 unita’ NAG modellate (D, E, F) Page e 510 Interazioni osservate/modellate tra lisozima e substrato Page e 513 Mappatura delle energie libere di legame per i sottositi del lisozima HEW + - Page e 510 Conformazioni a sedia e semi-sedia per un anello a 6 atomi Page e 511 Meccanismo catalizzato da H+ per l’idrolisi di un acetale ad emiacetale Page e 512 Il meccanismo “classico” (Phillips) per la reazione catalizzata da Lisozima (v. anim_fig 34 Cap.15) Page e 512 L’intermedio ione-ossonio e’ stabilizzato da risonanza. Page e 513 L’analogo δ-lattone di (NAG)4. Page e 515 Intermedio covalente (glicosil-enzima) osservato per il lisozima HEW. Page e 504 Esigenze di prossimita’ e orientamento in una reazione i SUPEROSSIDO DISMUTASI Cu-Zn Superossido dismutasi Enzima detossificante dal radicale superossido. Lavora in tandem con la catalasi. Mutazioni del gene SOD1 sono associate al 20% di casi di FALS. Page e 480 Values of KM, kcat, and kcat/KM for Some Enzymes and Substrates. Page e 481 Cross section through the active site of human superoxide dismutase (SOD). Regolazione dell’attivita’ enzimatica i i • Necessita’ Necessita di risposta a stimoli ambientali • Processi di crescita e differenziamento • Coordinamento tra distretti metabolici • ... SI REALIZZA ATTRAVERSO: • Regolazione della disponibilita’ degli enzimi (induzione della sintesi/degradazione) • Controllo dell’attivita’ catalitica tramite transizioni allosteriche (conformazionali)