P.O.P. 94/99 Mis. 10.4 Ricerca applicata, indagini e

Ministero per le politiche agricole
PROGETTO finalizzato
Prodotti e tecnologie innovative su piante ornamentali con particolare riguardo alle
aree del meridione
SOTTOPROGETTO
Innovazione colturale per la valorizzazione di specie adatte al clima
mediterraneo (Germoplasma)
Selezione, risanamento e valutazioni bio-agronomiche di
specie di Citrus adatte per scopi ornamentali
Aree agrumicole e vivaistiche
• Messina:
– Costa ionica e tirrenica
• Bari
• Palermo:
– Giardini pubblici
Genotipi selezionati
•limone ‘Lunario’, limone ‘Lunario Compatto’
• Fortunella japonica, F. obovata, F. margarita, F.
hindsii, kumquat Meiwa
•clementine rifiorente
•calamondin (7 cloni di diversa origine)
•Citrus tardiva
•Citrus myrtifolia a frutto piccolo
•Citrus aurantium ‘Consolei’, Citrus aurantium ‘Fasciata’
•Limetta Taithi, Limetta Romana
•Citrus sinensis Tarocco gianduia
Osservazioni morfo-fisiologiche in
situ
• Fasi fenologiche della pianta
• Caratteri morfo-fisiologici della pianta
• Caratteri morfologici e qualitativi dei frutti
D.M. 14 Aprile 1997
• Il materiale vegetale agrumicolo per la produzione di
piante deve essere sano da virus, viroidi e micoplasmi,
ritenuti patogeni di qualità.
Punti critici
Per i vivaisti: prelevare semi, marze e talee da piante madri
sane.
Per gli agricoltori: utilizzare piante garantite esenti da
virus, viroidi e micoplasmi “certificate”.
Diagnosi dei virus presenti
in situ
• Per via sierologica
• Per via biologica
• Per ibridazione molecolare
Virus e virus simili presenti
• Esocortite “CEVd”
• Fam. Pospiviroidae, genere Pospiviroid, specie Citrus exocortis viroid
• Cachessia-Xiloporosi “HSVd”
• Fam. Pospiviroidae, genere Hostuviroid, specie Hop stunt viroid
• Variegatura Infettiva “CIVV”
• Fam. Bromoviridae, genere Ilarvirus, specie Citrus infections
variegation virus
• Tristeza “CTV”
• Fam. Closteroviridae, genere Closterovirus, specie Citrus tristeza virus
Germoplasma: trasferimento in exsitu
• Propagazione per innesto dei cloni selezionati
(escluso quello affetto da Tristeza) su semenzali
di Arancio amaro nel campo sperimentale di
Lascari
Metodi di risanamento
• Microinnesto validato per tutti i viroidi e
parzialmente per i virus.
• Microinnesto abbinato a termoterapia, validato per
tutti i virus e non per i viroidi.
• Embriogenesi somatica validata per tutti i virus e
viroidi.
Boccioli fiorali in preantesi di W. Navel
Embriogenesi somatica
• Prelevamento di fiori in preantesi.
• Coltura in vitro di stili e stigmi su mezzo MS con
aggiunta di BAP 3mg/L, incubati a 26-27°C e a un
fotoperiodo di 16 ore.
• Formazione di callo embriogenico.
• Differenziamento di embrioni somatici.
• Coltura in vitro di embrioni su mezzo MS.
• Formazione di plantule.
• Trasferimento dal vitro al vivo.
Preparazione dell’espianto per l’embriogenesi somatica
Coltura di stilo e stigma dopo 20 giorni
Callo embriogenetico di Citrus lemon
Embriogenesi somatica a 50 giorni dall’inizio della coltura
Plantule di Citrus lemon provenienti da embriogenesi somatica
Particolare della tecnica del mini innesto per acclimatare il materiale
vegetale proveniente da embriogenesi somatica
Piante bimembri ottenute con la tecnica del mini innesto
Camera umida con base riscaldata
Plantule provenienti dalla radicazione di talee di Citrus lemon
Plantule provenienti dalla radicazione di talee di Citrus lemon
in contenitore alveolato
Plantule provenienti dalla radicazione di talee di Citrus lemon e di
Poncirus trifoliata in Jiffy
Plantule provenienti dalla radicazione di talee di Citrus aurantium
in Jiffy
Frutto di Navelina proveniente da pianta ottenuta da embriogenesi somatica
Controllo stato sanitario e
rispondenza varietale
• Conservazione in serra con doppia rete a prova di
insetto “screenhouse” delle piante rigenerate in
vitro.
• Controllo sanitario sierologico, biologico e per
ibridazione molecolare.
• Controllo per la rispondenza varietale.
• Utilizzazione del genotipo risanato e possibile
clonazione.
Risultati
• Identificazione di 22 genotipi autoctoni, di cui 17 riferiti al genere
Citrus e 5 al genere Fortunella.
• Costituzione del germoplasma di agrumi ornamentali nel campo
sperimentale dell’Istituto di Ricerca per la Genetica degli Agrumi.
• Risanamento di detti genotipi da virus e viroidi.
• Messa a punto dei protocolli “mininnesto” e “ micropropagazione”
utilizzati per il trasferimento dei Citrus dal vitro al vivo.
• Probabile disponibilità di nuove varietà da inserire nei programmi
nazionali di certificazione e da utilizzare nei programmi di
miglioramento genetico.
• Validazione, su nuovi genotipi, di un sistema di rigenerazione
(embriogenesi somatica) utile per preparare materiale vegetale da
conservare e/o scambiare con altri ricercatori.
Programmi per il futuro
•Avviare un progetto per la costituzione di fonti di
approvvigionamento primarie di agrumi ornamentali
•Avviare un nuovo progetto organico redatto e sviluppato da
Istituzioni Pubbliche e da associazioni di vivaisti al fine di
riordinare il comparto produttivo
Valutazione Bio-agronomica
• Valutazione della capacità rizogena di alcuni
genotipi: Limone ”LCNR 12”e Calamondin
“CNR P9” con diversi trattamenti ormonali: 0, 3,
6 g/l IBA e su diversi substrati di radicazione:
Jiffy, torba bionda e terriccio a pH 5.5
• I migliori risultati sono stati ottenuti nelle tesi con
6 g/l di IBA e su Jiffy o su terriccio a pH 5.5
• Standard produttivo del vivaismo siciliano
Piante di Citrus pronte per la commercializzazione
Piante di Citrus pronte per la commercializzazione
Frutto di Citrus digitata
Il responsabile: dott. Fabio De Pasquale
Collaboratori: dott. Francesco Carimi
dott.ssa Anna Maria D’Onghia1
dott.ssa Stefania Fiore2
dott.ssa Giovanna Lombardo3
1 Istituto
Agronomico Mediterraneo (Bari)
2 Dip. Colture Arboree (Palermo)
3 Dip. Scienze Botaniche (Palermo)