SYLLABUS Insegnamento: Fecondazione Artificiale e Tecniche di Riproduzione Assistita (2 CFU; 24 ore: 18 di lezione frontale e 6 [x4] di esercitazione) Obiettivi formativi del corso: il corso forma lo studente sull’impiego dell’inseminazione artificiale (IA), per gli animali d’allevamento, dalla conoscenze del ciclo estrale, sincronizzazione dei calori e l’utilizzo del seme per l’inseminazione; lo studente apprende inoltre le tecniche di riproduzione assistita più avanzate (produzione di embrioni in vivo ed in vitro, sessaggio e congelamento degli embrioni, embryo transfer, clonazione) come strumento per il miglioramento genetico, per l’incremento dell’efficienza riproduttiva, per il recupero della fertilità e l’impiego nelle biotecnologie. Lezioni Temi e competenze acquisite Argomenti Contenuti specifici Parametri riproduttivi nell’allevamento della vacca da latte ed interpretazione dei dati disponibili in allevamento efficienza riproduttiva Ripresa del ciclo estrale dopo il parto, intervallo parto concepimento, interparto, fattori determinati per il rilevamento dei calori, tecniche e strumenti per il corretto rilevamento del calore Ore 1 Ciclo estrale, durata dell’estro, dinamica follicolare, Manipolazione del ciclo estrale Sincronizzazione sincronizzazione dell’estro, protocolli di inseminazione con i diversi protocolli di dei calori programmata sincronizzazione dei calori 1 1 Inseminazione artificiale come e quando effettuarla IA nella specie bovina Manifestazioni estrali, scongelamento del seme e preparazione della strumentazione necessaria, deposizione del materiale seminale, tecnica di IA Manipolazione del ciclo estrale Acquisizione delle nozioni sull’ IA nella specie equina IA nella specie equina Rimozione dell’anestro stagionale, ciclo estrale, durata dell’estro, sincronizzazione dell’estro e dell’ovulazione, tecniche di IA standard in relazione al tipo di materiale seminale utilizzato, tecniche di IA “low dose” Manipolazione del ciclo estrale e acquisizione delle nozioni sull’ IA nella scrofa e ovicaprini IA nella scrofa e negli ovicaprini Ciclo estrale, durata dell’estro ed momento dell’ovulazione, manifestazioni estrali esterne, sincronizzazione dell’estro, scongelamento del seme e preparazione della strumentazione necessaria, deposizione del materiale seminale, tecnica di IA transvaginale e laparoscopica Induzione della Scelta della donatrice, valutazione ginecologica, trattamenti Produzione di superovulazione per la farmacologici e prodotti utilizzati, inseminazione, flushing embrioni bovini in produzione di embrioni bovini uterino per la raccolta degli embrioni vivo in vivo Classificazione ed identificazione degli embrioni secondo gli Scelta degli embrioni per il Valutazione trasferimento e per il morfologica degli standard dell’ IETS. Identificazione dello stadio di sviluppo e della qualità congelamento embrioni Tecniche di congelamento degli embrioni per la loro Congelamento degli conservazione a lungo termine embrioni in azoto liquido 1 1 1 1 Scongelamento e trasferimento degli embrioni nelle riceventi Trasferimento dell’embrione Meccanismo d’azione del crioprotettore utilizzato, utilizzo del glicerolo e del glicole etilenico, equilibramento, confezionamento. Strumentario e curva di congelamento. Cenni di vitrificazione Scelta delle manze riceventi e loro gestione. Scelta della ricevente idonea al trasferimento. Scongelamento dell’ embrione, trasferimento previa anestesia epidurale Raccolta e trasferimento degli embrioni nella cavalla Embryo transfer nella cavalla Applicazioni, vantaggi e svantaggi, sincronia donatricericevente, flushing uterino, valutazione dell’embrione, tecniche di trasferimento embrionale 1 Embryo transfer Applicazioni, vantaggi e svantaggi, sincronia donatriceProduzione di embrioni in vivo nella scrofa e negli ricevente, flushing uterino, valutazione dell’embrione, nella scrofa e negli ovicaprini tecniche di trasferimento embrionale ovicaprini 1 Applicazioni, vantaggi e svantaggi, approvvigionamento di Produzione di Protocolli per la produzione di embrioni bovini in oociti (in vivo tramite Ovum Pick Up o al macello), qualità embrioni bovini in vitro degli oociti, IVM, IVF, IVC vitro 2 Raccolta degli ovociti mediante tecnica di Ovum Pick Up Produzione di Protocolli per la produzione di embrioni di cavallo per la maturazione in vitro o per l’oocyte transfer. embrioni equini in vitro Intracitoplasmic sperm injection (ICSI) in vitro 1 1 1 Sessaggio degli spermatozoi ed impiego del seme sessato, Tecniche di determinazione (Pre)determinazione sessaggio embrionale, determinazione del sesso del feto del sesso del sesso durante la gravidanza Cencetti ed applicazioni, bisezione dell’embrione, Tecniche di clonazione separazione dei blastomeri, clonazione mediante Clonazione animale embrionale e somatica trasferimento di nucleo, clonazione embrionale e somatica, efficienza e problematiche rilevate Definizioni, specie animali e tecniche utilizzate, fasi per la Tecniche di ingegneria realizzazione di un animale geneticamente modificato, Ingegneria genetica genetica e possibili impieghi utilizzi in campo biomedico e potenziali utilizzi in campo zootecnico 1 2 1 ESERCITAZIONI Temi e competenze acquisite Argomenti Contenuti specifici Ore - - IA nella specie bovina e equina: esercitazioni su manichino e sull’animale 2 - - Flushing uterino per recupero embrioni bovini 2 - - Prelievo di oociti bovini in vivo mediante tecnica transvaginale ecoguidata 2