Chapter 17 Regulation of Gene Expression in Bacteria and Bacteriophages CORSO GENETICA LAUREA TRIENNALE “ROMA TRE” Copyright © 2010 Pearson Education Inc. Prof. A. Antoccia GENI COSTITUTIVI (Housekeping) GENI REGOLATI Copyright © 2013 Pearson Italia Spa Copyright © 2013 Pearson Italia Spa Copyright © 2013 Pearson Italia Spa IL POLICISTRONE lac IL METABOLOSIMO DEL GLUCOSIO CONTENUTO NEL TERRENO MINIMOE’ SOTTO IL CONTROLLO DI GENI INDUCIBILI ALLOLATTOSIO INDUTTORE DI lac MUTAZIONI CHE ALTERANO LA REGOLAZIONE DEI GENI DELL’ OPERONE lac -MUTANTI CON SINTESI COSTITUTIVA PER LA BETA-GAL E PERMEASI, CIOE’ CON SINTESI SIA IN PRESENZA CHE IN ASSENZA DI LATTOSIO (INDUTTORE) MUTAZIONI REGOLATIVE CHE INFLUENZANO L’ ESPRESSIONE DEI GENI COINVOLTI NEL METABOLISMO DEL LATTOSIO JACOB E MONOD ISOLARONO 2 TIPOLOGIE DI MUTANTI COSTITUTIVI 1) QUELLI PER UNA PICCOLA REGIONE A MONTE DEL GENE lacZ: OPERATORE (lacO) 2) QUELLI CHE MAPPAVANO A MONTE DELL’ OPERATORE: GENE PER IL REPRESSORE (lacI) F. JACOB E J. MONOD: L’ OPERONE lac 1) beta-Galattosidasi ; 2) lattosio permeasi 3) betaGalattoside transacetilasi MUTAZIONI COSTITUTIVE DELL’ OPERATORE: lacOC USO DEI DIPLOIDI PARZIALI F’ lacO+ lacZ- lacY+ lacOc lacZ+ lacYPRODUZIONE DI BETA-GAL E PERMEASI IN ASSENZA E PRESENZA DI LATTOSIO 1) IN ASSENZA LAT: BETA-GAL NORMALE E PERMEASI MUTATA 2) IN PRESENZA LAT: SINTESI PERMEASI ATTIVA lacZ è sotto il controllo in cis dell’ operatore ed è espresso in modo costitutivo, mentre lacY è sotto il normale controllo inducibile L’ OPERTORE (lacO) CONTROLLA SOLO I GENI POSTI A VALLE E NON QUELLI POSTI SULL’ ALTRA MOLECOLA DI DNA: CIS-DOMINANZA, INDICA INOLTRE CHE lacO NON CODIFICA PERUN PRODOTTO DUFFUSIBILE F’ lacO+ lacZ- lacY+ lacOc lacZ+ lacY- MUTAZIONI NEL GENE REGOLATORE: lacI CEPPO APLOIDE CON lacI- : MUTANTE COSTITUTIVO F’ lacI+ lacO+ lacZ- lacY+ lacI- lacO+ lacZ+ lacYPRODUZIONE DI BETA-GAL E PERMEASI IN ASSENZA E PRESENZA DI LATTOSIO 1) IN ASSENZA LAT: NO BETA-GAL NO PERMEASI MUTATA 2) IN PRESENZA LAT: SINTESI BETA-GAL E PERMEASI NORMALI Entrambi gli operoni risulatano inducibili IL GENE lacI CONTROLLA I GENI POSTI SU ENTRAMBE LE MOLECOLE DI DNA: TRANS-DOMINANZA, INDICA INOLTRE CHE IL GENE lacI CODIFICA PER UN PRODOTTO DUFFUSIBILE, CIOE’ UN REPRESSORE DIFFUSIBILE CEPPI BATTERICI APLOIDI lacI- NON PRODUCONO REPRESSORI ATTIVI E PERTANTO SONO COSTITUTIVI AL CONTRARIO IN UN CEPPO lacI-/lacI+ ENTRAMBI GLI OPERONI SONO INDUCIBILI MUTAZIONI DEL PROMOTORE (Plac-) A MONTE lacZ: CONTROLLA SOLO I GENI POSTI A VALLE NELLA STESSSA MOLECOLA DI DNA: CIS-DOMINANZA, NON VENGONO PRODOTTI BETA-GAL E PERMEASI ANCHE IN PRESENZA DELL’ INDUTTORE F’ lacI+ lacO+ lacZ- lacY+ lacI- lacO+ lacZ+ lacY- lacIs SUPER-REPRESSORE