Cenni di anatomia e fisiologia di interesse clinico 1 Capitolo 1 Cenni di anatomia e fisiologia di interesse clinico Cesidio Giuliani, Fabrizio Monaco I. Embriogenesi Nell’embrione umano la tiroide origina, alla 3-4ª settimana di vita, da un diverticolo dell’entoderma lungo la linea mediana della superficie ventrale dell’intestino branchiale o faringeo, fra la prima e la seconda tasca branchiale (6). Tale regione corrisponde, a sviluppo terminato, alla base della lingua. Il diverticolo si allunga e si canalizza discendendo caudalmente, nel sottostante mesoderma, verso la parte anteriore del collo e costituisce il dotto tireoglosso, Fig. 1.1. L’estremità caudale del dotto cresce ed assume un aspetto bilobato dando origine ai due lobi tiroidei connessi dall’istmo, mentre la sua porzione prossimale si trasforma in un peduncolo solido che a partire dalla 6ª settimana comincia ad atrofizzarsi e scompare (6). Verso la 7-8ª settimana la tiroide è costituita già da due lobi laterali connessi da un sottile strato di parenchima, l’istmo. Alla 8ª settimana comincia la funzione delle cellule tiroidee che dapprima acquistano la capacità di timpano sintetizzare la tireoglobulina, quindi e tuba di eustachio quella di organizzarsi in follicoli, successivamente di concentrare lo iodio dotto ed infine di sintetizzare gli ormoni tireo-glosso tiroidei (6). Al terzo mese si riscontra tonsilla la colloide nei follicoli. La tireotropina (TSH) è prodotta dall’ipofisi fin dalla paratiroide 7-8ª settimana (6). inferiore Intorno alla 12 a settimana si tiroide identificano all’interno della tiroide le timo cellule C o parafollicolari che derivaparatiroide superiore no da cellule della cresta neurale mitrachea grate nella V tasca branchiale (corpo ultimobranchiale); intorno alla 7 a settimana il corpo ultimobranchiale Fig. 1.1 – Visione ventrale di un modello di entoderma faringeo si fonde medialmente con l’abbozzo di embrione umano alla 7-8° settimana di vita. tiroideo (6, 25). 01.indd 1 04/05/2007 8.13.02 2 Malattie della tiroide La conoscenza dello sviluppo della ghiandola tiroidea fornisce importanti informazioni su alcune particolarità anatomiche e malformazioni congenite. Come già detto il dotto tireoglosso scompare e, normalmente, l’unica vestigia presente dopo la nascita è il suo punto d’origine: il forame cieco, al limite tra la radice e il corpo della lingua, Fig. 1.2; in circa il 40% delle persone permane anche un residuo della porzione inferiore del dotto a costituire il lobo piramidale (o del Morgagni), struttura impari situata medialmente, che si estende Fig. 1.2 – Superficie ventrale della lingua con dall’istmo verso l’alto (32). Talora permane, indicazione del forame cieco. come residuo del dotto, un cordoncino fibroso che si estende, lungo la linea mediana del collo, dal forame cieco fino all’istmo tiroideo; più raramente lungo questo decorso possono residuare nidi cellulari che costituiscono delle tiroidi accessorie o si trasformano in cisti (le cisti mediane congenite del collo o cisti tireoglosse) (13). Anomalie del processo di migrazione dell’abbozzo tiroideo possono dar luogo ad ectopie tiroidee (3, 6, 26). Il tessuto ectopico può essere riscontrato in ogni punto tra il forame cieco e la sede normale della ghiandola, le localizzazioni più comuni sono sopraioidee: alla base della lingua (tiroide linguale), o immediatamente al di sotto di essa (tiroide sublinguale), Fig. 1.3. Se l’ectopia ghiandolare è un evenienza rara, il riscontro di residui microscopici di tessuto tiroideo alla base della lingua è invece relativamente frequente e si è osservato nel 10% delle lingue esaminate nel corso di autopsie (25). Talora si può avere una migrazione eccessiva del dotto tireoglosso con localizzazione della tiroide in sede retrosternale, Fig. 1.3. Gli stretti rapporti che si hanno nel corso dello sviluppo tra il dotto tireoglosso, l’abbozzo del condotto laringotracheale, gli archi branchiali e il mesoderma circostante spiegano il riscontro di tessuto tiroideo ectopico in altre sedi quali: laringe, trachea, arco dell’aorta, pericardio, cuore, esofago, Fig. 1.3 – Sedi ectopiche della tiroide. mediastino (25, 26). 01.indd 2 04/05/2007 8.13.05 Cenni di anatomia e fisiologia di interesse clinico 3 II. Anatomia macroscopica La tiroide, nell’adulto e in condizioni di ottimale apporto iodico, pesa circa 20±5 g, ha la forma di una farfalla ed è situata nella regione anteriore del collo davanti e lateralmente alla laringe e ai primi 2 anelli della trachea, Fig. 1.4. Presenta due lobi laterali connessi medialmente dall’istmo; in circa il 40% dei soggetti è inoltre presente un lobo piramidale che si estende medialmente dall’istmo verso l’alto. L’istmo è localizzato immediatamente al di sotto della cartilagine cricoide, al davanti del 10 e 20 anello tracheale, e la cartilagine cricoide può essere utilizzata come punto di repere nell’esame obiettivo della tiroide. Ogni lobo, in media, è lungo 4-5 cm, largo 1,5-2 cm e ha uno spessore di 1-1,5 cm. Il lobo destro è generalmente maggiore di quello sinistro; ogni lobo ha un volume medio di 4-8 mL e un peso medio di 5-10 g (19, 25). La tiroide è accolta in uno sdoppiamento della fascia pretracheale (detta anche fascia cervicale media) che prende il nome di guaina peritiroidea e tramite essa è adesa all’asse laringo-tracheale. Va segnalata la presenza di un legamento mediano (di Gruber) che fissa la guaina peritiroidea alla cartilagine tiroidea e di due legamenti laterali che connettono la suddetta guaina alla cartilagine cricoide e ai primi anelli tracheali (32). La connessione tra guaina peritiroidea e asse laringo-tracheale permette alla tiroide di seguire i movimenti della deglutizione. La tiroide è ricoperta anteriormente dai muscoli sottoioidei (sternoioideo, sternotiroideo ed omoioideo) e dalla fascia cervicale media, lateralmente dai muscoli sternocleidomastoidei e posteriormente contrae rapporto con il fascio vascolonervoso del collo (arteria carotide comune, vena giugulare interna e nervo vago) e con il condotto laringotracheale. Posteriormente a ognuno dei due lobi tiroidei, in corrispondenza del limite tra 1/3 superiore e 1/3 medio e tra 1/3 inferiore e 1/3 medio rispettivamente, aderiscono due paratiroidi: le superiori in prossimità del punto di penetrazione del nervo laringeo superiore nella larin- Fig. 1.4 – Tiroide: visione anteriore. 01.indd 3 04/05/2007 8.13.05 4 Malattie della tiroide ge, e le inferiori in prossimità dell’arteria tiroidea inferiore, Fig. 1.5 (32). Entrambe le paratiroidi, sia superiore che inferiore, sono vascolarizzate dall’arteria tiroidea inferiore e pertanto, nel corso di interventi chirurgici sulla tiroide, bisogna sezionare questa arteria a valle delle diramazioni dirette alle paratiroidi in modo da salvaguardare la loro vascolarizzazione. Alla vascolarizzazione delle paratiroidi superiori contriFig. 1.5 – Tiroide: visione posteriore. buisce, in modo meno costante, anche l’arteria tiroidea superiore. Di particolare interesse clinico sono i rapporti che la tiroide contrae con il nervo laringeo superiore e con il nervo laringeo inferiore (o ricorrente). Il nervo laringeo superiore nella maggior parte dei casi decorre sulla superficie del muscolo cricotiroideo, Fig. 1.4, ma in un 15% dei soggetti esso decorre con i vasi tiroidei del peduncolo superiore (arteria e vena tiroidee superiori) formando un’ansa sulla superficie superiore del lobo tiroideo. Tale peculiarità anatomica deve essere conosciuta per individuare il nervo nel corso di interventi chirurgici ed evitare una sua lesione responsabile della sindrome del laringeo superiore caratterizzata da paralisi del muscolo cricotiroideo con abbassamento del tono della voce, facile affaticabilità e limitazione all’emissione dei suoni acuti (15). Il nervo laringeo inferiore o ricorrente decorre bilateralmente, lungo il canale tracheoesofageo medialmente all’arteria carotide e contrae rapporti con l’arteria tiroidea inferiore (decorrendo in genere anteriormente o posteriormente ad essa rispettivamente nel lato destro o sinistro) e con la parte postero-mediale del lobo tiroideo, Fig. 1.5. Una lesione del nervo ricorrente causa paralisi della corda vocale che assume una posizione paramediana: se la lesione è unilaterale si ha emiplegia laringea con disfonia, mentre se la lesione è bilaterale si ha diplegia laringea con afonia e dispnea. La vascolarizzazione della tiroide è fornita dalle arterie tiroidee superiori e inferiori rami rispettivamente delle arterie carotidi esterne e delle succlavie. Con meno frequenza è presente un’arteria tiroidea ima che deriva dal tronco brachiocefalico o dalla carotide comune (32, 33). Esse forniscono, nel soggetto adulto, circa 5-6 mL/g/min di sangue, flusso ematico maggiore di qualsiasi altro tessuto in assoluto, in rapporto al peso. Il drenaggio venoso è effettuato dalle vene tiroidee superiori e inferiori, tributarie rispettivamente delle vene giugulari interne e brachiocefaliche. Il drenaggio linfatico è garantito da una estesa rete di capillari intratiroidei che confluisce in rami collettori subcapsulari, questi si distaccano dalla ghiandola seguendo il decorso dei vasi venosi e si riversano in 5 diversi 01.indd 4 04/05/2007 8.13.06 Cenni di anatomia e fisiologia di interesse clinico 5 gruppi di linfonodi regionali (25): 1) i linfonodi pericapsulari, 2) il gruppo dei linfonodi pretracheali, paratracheali e prelaringei (da segnalare il linfonodo Delfiano localizzato in prossimità dell’istmo tiroideo), 3) i linfonodi della catena giugulare interna, 4) i linfonodi della catena del nervo ricorrente, 5) il gruppo dei linfonodi retrofaringei e retroesofagei. I diversi gruppi di linfonodi hanno un elevato grado di anastomosi per cui ognuno di essi può essere sede di metastasi indipendentemente dalla sede del tumore nella tiroide (25). L’innervazione della ghiandola è effettuata da fibre del sistema nervoso autonomo simpatico e parasimpatico. Le fibre simpatiche derivano dai gangli cervicali, quelle parasimpatiche da rami dei nervi laringei (25, 32). Il ruolo principale dell’innervazione autonoma è quello di regolare il tono vasale e quindi il flusso ematico, ma si ritiene possibile anche un effetto diretto sulla funzione tiroidea data la presenza di recettori colinergici e adrenergici sulla membrana del tireocita (11). III. Anatomia microscopica L’unità anatomo-funzionale della tiroide è rappresentata dal follicolo, struttura grossolanamente sferica, costituita da un singolo strato di cellule epiteliali, dette appunto cellule follicolari o tireociti, che delimitano una cavità centrale, il lume follicolare, in cui è depositata la tireoglobulina (Tg) sotto forma di colloide. La colloide è una miscela proteica costituita in massima parte dalla Tg e in minor quantità da altre iodoproteine con minor peso molecolare e da albumina. Le cellule follicolari hanno un polo basale che è a contatto con lo stroma e un polo apicale che delimita il lume follicolare. I follicoli tiroidei sono strettamente adesi gli uni agli altri ed hanno dimensioni variabili (0,05-0,5 mm di diametro) (32). Esiste una correlazione tra volume dei follicoli, spessore dell’epitelio e funzione del follicolo: i follicoli di maggiore dimensione hanno un epitelio piatto e sono ipofunzionanti, mentre i follicoli di dimensioni ridotte hanno un epitelio cubico o cilindrico e sono iperfunzionanti (11). Le dimensioni follicolari sono influenzate dai livelli di TSH. Infatti sotto stimolo del TSH le cellule si ingrandiscono e da piatte diventano cuboidali o colonnari, mentre il lume follicolare si riduce; inoltre il TSH induce anche varie modificazioni morfologiche dei tireociti di cui la più evidente è costituita dalla formazione di pseudopodi sulla membrana apicale, responsabile del riassorbimento della tireoglobulina mediante il processo di macropinocitosi (11). Studi sperimentali hanno evidenziato una eterogeneità funzionale e di crescita sia tra i diversi follicoli di una stessa ghiandola che fra i tireociti costituenti un unico follicolo (7). Tale eterogeneità è probabilmente conseguente a una diversa sensibilità delle cellule ai vari stimoli. Lo stroma tiroideo è molto ricco di vasi che formano un esteso plesso di capillari interfollicolari adiacenti alla membrana basale delle cellule follicolari. Esso inoltre presenta un’abbondante rete di terminazioni nervose adrenergiche e colinergiche che circondano i follicoli. Nella tiroide si trovano anche le cellule parafollicolari (“cellule C”), secernenti la calcitonina. Queste cellule, voluminose e rotondeggianti con grosso nucleo centrale, sono localizzate sia nel contesto della parete follicolare senza però raggiungere il lume del follicolo, sia nello stroma interfollicolare organizzate in piccoli raggruppamenti (25, 32). 01.indd 5 04/05/2007 8.13.06 6 Malattie della tiroide IV. Fisiologia A. Sintesi e secrezione degli ormoni tiroidei La tiroide umana produce due ormoni metabolicamente attivi: la T4, tiroxina o tetraiodotironina, e la T3, triiodotironina, Fig. 1.6. La sintesi degli ormoni tiroidei avviene attraverso sette principali passaggi: 1) sintesi della tireoglobulina e sua immissione nel lume follicolare; 2) captazione dello ioduro attraverso la membrana basale della cellula tiroidea; 3) ossidazione dello ioduro in iodio molecolare; 4) iodazione dei residui tirosinici della tireoglobulina; 5) accoppiamento delle iodotirosine con formazione di T3 e T4; 6) riassorbimento della colloide; 7) proteolisi intracellulare della tireoglobulina con: liberazione in circolo della T4 e T3, liberazione intracellulare di aminoacidi che vengono riutilizzati per la sintesi proteica e desiodazione intracellulare delle iodotirosine (MIT e DIT) con riutilizzazione Fig. 1.6 – Struttura degli ormoni tiroidei. dello iodio. 1. Sintesi della tireoglobulina. La Tireoglobulina (Tg) è una glicoproteina, con peso molecolare di 660.000 daltons (Da), che contiene circa il 10% di carboidrati, Tab. 1.1 (10, 17). Essa costituisce circa il 75% delle proteine contenute nella tiroide ed è per la quasi totalità immagazzinata nel lume follicolare. La Tg è prodotta solo dalle cellule follicolari tiroidee ed è costituita da 2 subunità identiche, ciascuna con peso molecolare di 330.000 Da, legate fra loro mediante legami non covalenti (10, 17). Il gene per la Tg è localizzato, nell’uomo, nel braccio lungo del cromosoma 8 (8q24) e codifica per un polipeptide di 2768 aminoacidi (incluso il peptide segnale di 19 aminoacidi) che corrisponde alla singola subunità di Tg. Il polipeptide dopo essere stato sintetizzato subisce i processi di glicosilazione e fosforilazione nel reticolo endoplasmatico rugoso e nell’apparato di Golgi e quindi viene secreto nel lume follicolare. La Tg contiene 132 residui di tirosina di cui circa 1/3 sono iodati e 8-10 residui sono implicati nella ormonogenesi: infatti per ogni subunità sono stati descritti nell’uomo 4 siti ormonogenetici principali (designati A, B, C e D) e un sito minore (N), la cui utilizzazione varia in base all’apporto iodico e al grado di glicosilazione della Tg, Tab. 1.2 (10, 17, 35). Tabella 1.1 – Caratteristiche fisico-chimiche della Tg umana. 01.indd 6 Peso molecolare 660.000 Da Coefficiente di sedimentazione 19S Contenuto in carboidrati ~10% del peso Contenuto di iodio ~0,1-1% del peso Punto isoelettrico 4,3-4,7 04/05/2007 8.13.06 Cenni di anatomia e fisiologia di interesse clinico 7 Tabella 1.2 – Siti ormonogenetici della Tg umana. Sito Residuo aminoacidico Ormone prodotto A 5 T4 B 2554 T4 C 2747 T3 D 1291 T4 N 685 T3 o T4 Le alterazioni della formazione di Tg (deficit di sintesi o di glicosilazione, alterata conformazione molecolare) rappresentano le cause più comuni di gozzo disormonogenetico. 2. Captazione dello ioduro. Funzione primaria della tiroide è l’organificazione dello iodio, processo necessario per la sintesi degli ormoni tiroidei. Lo iodio, introdotto con la dieta, viene ridotto nello stomaco a ione ioduro e rapidamente assorbito. Lo ioduro è trasportato dal sangue all’interno della cellula tiroidea da una proteina sita sulla membrana basale del tireocita detta NIS, Na+/I- symporter (cotrasportatore del Na+/I-) il cui gene è localizzato sul cromosoma 19, Fig. 1.7 (8, 17). Il NIS è una glicoproteina di 613 aminoacidi e p.m. di circa 85.000 Da, che appartiene alla famiglia delle proteine di trasporto sodio/glucosio, che trasporta 2 molecole Na+ e una di I- dall’esterno all’interno della cellula. La captazione dello ioduro mediata da NIS è un trasporto attivo che utilizza l’energia del sistema Na+/K+-ATPasi e permette un gradiente di iodio 40-100 volte maggiore all’interno della tiroide rispetto alla Fig. 1.7 – Rappresentazione schematica della cellula tiroidea in cui si attua la ormonogenesi tiroidea. 01.indd 7 04/05/2007 8.13.06 8 Malattie della tiroide concentrazione nel sangue, determinando una concentrazione intratiroidea maggiore di oltre 10.000 volte rispetto alla quantità introdotta con la dieta (lo iodio costituisce quindi il maggiore elemento presente nella tiroide: 0,02-0,2% del peso secco) (8). Il NIS non è espresso solo dalle cellule follicolari tiroidee ma è presente anche in altri organi e tessuti: le ghiandole salivari, la mucosa gastrica, la ghiandola mammaria durante l’allattamento, il plesso coroideo, dove media in varia misura la captazione di ioduro (8, 28). Di importanza clinica è la proprietà di NIS di trasportare anche altri anioni oltre lo ioduro con diversa selettività come riportato nella Tab. 1.3 (8, 38, 39). Il pertecnetato e il perclorato sono gli anioni a più alta competizione per NIS, il primo è utilizzato in sostituzione dello iodio nelle scintigrafie (ma misura solo la captazione poichè non viene organificato), il secondo è utilizzato nel test di “discharge” e nella terapia delle tireotossicosi iodoindotte poichè è un potente inibitore del trasporto di I- e ne favorisce l’efflusso dalla cellula (39). L’espressione di NIS nella tiroide è stimolata dal TSH e dagli anticorpi antirecettore del TSH, mentre è inibita dallo ioduro e dal TGF-β (8). Un’aumentata espressione di NIS si osserva nella malattia di Basedow-Graves e nei noduli autonomi iperfunzionanti, mentre un’espressione ridotta o assente si riscontra in adenomi e carcinomi tiroidei caratterizzati da una ridotta o assente captazione del radioiodio (8, 28). Inoltre alcune forme di gozzo disormonogenetico sono conseguenti ad un deficit della captazione di ioduro per mutazioni di NIS (8). Il trasporto dello ioduro dal citoplasma cellulare al lume follicolare viene effettuato da 2 sistemi di trasporto localizzati sulla membrana apicale del tireocita: la pendrina e il Trasportatore Apicale dello Ioduro (AIT), Fig. 1.7. La pendrina è una glicoproteina transmembrana di 780 aminoacidi che costituisce il prodotto del gene PDS (della sindrome di Pendred) e appartiene alla famiglia delle proteine di trasporto per gli anioni. Essa media il trasporto I-/Cl- e la sua espressione è sotto il controllo della Tg presente nel lume follicolare (29, 37). Mutazioni del gene PDS sono responsabili della sindrome di Pendred dove è presente un deficit parziale del processo di organificazione dello iodio. AIT è una proteina di 610 aminoacidi appartenente alla stessa famiglia di NIS con cui ha un omologia di circa il 45%. Le informazioni sul ruolo di AIT sono al momento limitate, si ritiene che medi il trasporto passivo dello ioduro attraverso la membrana apicale (24). Tabella 1.3 – Selettività di NIS per gli anioni. TcO4- ≥ ClO4- > ReO4- > SCN- > BF4- > I- > NO3- > Br- > ClTcO4-: pertecnetato ClO4-: perclorato ReO4-: perrenato SCN-: tiocianato BF4-: tetrafluoruro di boro 01.indd 8 I-: ioduro NO3-: nitrato Br-: bromuro Cl-: cloruro 04/05/2007 8.13.06 Cenni di anatomia e fisiologia di interesse clinico 9 3. Ossidazione dello ioduro in iodio molecolare. Il processo di organificazione dello iodio, cioè la sintesi delle iodotironine a partire dagli ioduri e dai residui tirosinici della Tg, è un processo molto rapido che richiede l’ossidazione dello ione ioduro. L’ossidazione è catalizzata dalla tireoperossidasi (TPO), enzima presente sulla membrana apicale del tireocita, Fig. 1.7, che media anche il processo di organificazione dello iodio (9, 17). La TPO è una glicoproteina con un gruppo eme il cui gene è localizzato sul cromosoma 2; la sua sintesi ed attività è regolata principalmente dal TSH (9). L’attività della TPO necessita di H2O2, la cui produzione avviene a livello della membrana apicale ad opera di un sistema di ossidasi NADPH-dipendenti (THOX-1 e THOX-2) (9). Non è ancora del tutto nota la forma chimica che lo iodio deve avere al momento della sua incorporazione; sono state ipotizzate varie forme di ossidazione quali lo ione iodinio (I+), il radicale libero I0 o forme intermedie quali l’ipoiodito (OI-) (9, 17). Le mutazioni della TPO costituiscono una causa importante di ipotiroidismo congenito e gozzo disormonogenetico e recentemente è stato individuato un caso di mutazione di THOX-2 responsabile di gozzo disormonogenetico con ipotiroidismo (23). Inoltre il riscontro di difetti del sistema di ossidazione è molto frequente nei carcinomi tiroidei. 4. Iodazione dei residui tirosinici della tireoglobulina. L’incorporazione dello iodio nei residui tirosinici della Tg avviene nell’interfaccia membrana apicale/colloide ed è mediata dalla TPO. Si formano così nella Tg i precursori degli ormoni tiroidei: monoiodotirosina (MIT) e diiodotirosina (DIT), Fig. 1.8, a seconda che siano legati al residuo tirosinico uno o due atomi di iodio rispettivamente (11). Non tutti i residui tirosinici presenti nella Tg sono suscettibili di iodazione in modo simile, infatti alcuni residui dapprima non disponibili per la iodazione lo diventano successivamente quando con il processo di iodazione la molecola subisce un cambiamento della conformazione. Inoltre l’apporto iodico influenza anche la formazione relativa delle iodotirosine: a bassi livelli di iodazione predomina la formazione di MIT mentre a livelli elevati predomina quella di DIT (9, 10, 17). È importante sottolineare che il processo di organificazione previene la diffusione dello iodio dalla cel- Fig. 1.8 – Struttura delle iodotirosine: MIT= monoiodotirosina; DIT= lula tiroidea al compartimento diiodotirosina. plasmatico. 5. Accoppiamento delle iodotirosine con formazione di T3 e T4. I residui di MIT e DIT interagiscono poi tra loro nella tireoglobulina dando luogo alla formazione di iodotironine. Nella reazione di accoppiamento una delle molecole di iodotirosina dona l’anello iodofenolico all’altra generando un residuo di deidroalanina che rimane incorporato nella catena tireoglobulinica, i due anelli iodofenolici sono uniti tra 01.indd 9 04/05/2007 8.13.07 10 Malattie della tiroide loro mediante legame covalente tipo etere. Queste reazioni sono catalizzate dalla TPO e richiedono H2O2 (17). L’interazione fra due residui di DIT dà luogo alla formazione di T4 (o tetraiodotironina o tiroxina) mentre quella di un residuo di DIT e uno di MIT porta alla formazione di T3 (o triiodotironina). I residui di DIT e di MIT possono quindi essere considerati come i precursori degli ormoni tiroidei attivi. L’accoppiamento può avvenire sia fra iodotirosine presenti sulla stessa molecola di Tg che su molecole contigue. L’apporto iodico è determinante nell’influenzare le proporzioni relative degli ormoni tiroidei: in caso di elevata iodazione l’alto rapporto DIT/MIT favorisce la formazione di T4, mentre una ridotta iodazione determina una maggiore formazione di MIT con prevalente produzione di T3 (17). 6. Riassorbimento della colloide. La Tg iodata e accumulata nel lume follicolare come colloide viene riassorbita e idrolizzata dal tireocita sotto lo stimolo del TSH. Il processo di riassorbimento avviene sia mediante fagocitosi (o macropinocitosi) con formazione di pseudopodi nella membrana apicale che incorporano gocciole di colloide, sia mediante micropinocitosi con formazione sulla membrana apicale di vescicole rivestite di clatrina che inglobano microgocciole di colloide, Fig. 1.7 (9, 17). Entrambi i processi sono stimolati dal TSH e sono variamente prevalenti nelle diverse specie, nell’uomo il processo più utilizzato è quello della micropinocitosi. Sia i fagosomi che le vescicole di endocitosi una volta penetrate nel citoplasma si fondono con i lisosomi a formare fagolisosomi dove la Tg viene degradata (9, 17). Si ritiene che la Tg presente nel siero possa derivare da vescicole che non si fondono con i lisosomi e che raggiungono la membrana basale della cellula (transocitosi) dove la Tg viene secreta (20). Alcuni Autori però contestano questa ipotesi e ritengono che la Tg sierica sia conseguenza di una diretta secrezione di proteina neosintetizzata da parte del tireocita quale retaggio filogenetico del tessuto tiroideo non ancora organizzato per formare i follicoli (22). La secrezione della Tg presenta una notevole importanza clinica in quanto la sua determinazione sierica è utilizzata per la diagnosi differenziale di alcune tireopatie (ipotiroidismo congenito, tireotossicosi) e per il follow-up del carcinoma tiroideo differenziato. 7. Proteolisi della tireoglobulina. All’interno dei fagolisosomi la Tg è degradata da enzimi proteolitici quali endo- ed esopeptidasi liberando T3, T4, MIT, DIT e i vari aminoacidi. Gli ormoni tiroidei che si liberano nel processo di proteolisi migrano verso il polo basale della cellula ed entrano in circolo; non è attualmente noto se esiste uno specifico meccanismo di trasporto intracellulare o se c’è una semplice diffusione (9, 11, 17). Va ricordato che all’interno del tireocita si forma una piccola quota di T3 a partire dalla T4 per la presenza degli enzimi 5’-desiodasi di tipo I (D1) e II (D2): si ritiene che circa il 10% della T4 intratiroidea è convertita in T3. Le molecole di MIT e DIT che si liberano dal processo proteolitico vengono desiodate da specifiche iodotirosine-desiodasi intratiroidee NADPH-dipendenti; lo ioduro liberato 01.indd 10 04/05/2007 8.13.07 Cenni di anatomia e fisiologia di interesse clinico 11 rientra in gran parte nel pool intratiroideo dello iodio per essere riutilizzato dalla stessa cellula e solo in piccola parte viene immesso in circolo (9, 11, 17). L’importanza che la desiodazione intratiroidea di MIT e DIT ha nel recupero dello ioduro è dimostrata dal fatto che deficit congeniti di tale processo causano gozzo disormonogenetico. La maggior parte degli aminoacidi che derivano dalla proteolisi della Tg sono riutilizzati dalla cellula per la sintesi proteica. La proteolisi della Tg e la secrezione di ormoni tiroidei sono inibite dall’eccesso di iodio e dal litio con meccanismi d’azione non ancora conosciuti (12). B. Metabolismo dello iodio Lo iodio, un oligoelemento solubile in acqua ma relativamente scarso in natura, viene assunto con l’acqua e/o con il cibo e convertito nello stomaco in ioduro. La concentrazione di ioduro nel sangue è bassa (0,1-2,0 µg/dL) e varia a seconda del suo introito alimentare (che può oscillare da <50 a >500 µg/die). L’Organizzazione mondiale della Sanità ritiene ottimale un apporto di iodio di 150 µg per tutte le persone con età >12 anni, 200 µg per le donne in gravidanza e durante l’allattamento, 120 µg per i ragazzi in età scolare (6-12 anni) e 90 µg per i bambini con età inferiore ai 6 anni, Tab. 1.4 (36). Il pool extracellulare scambiabile di ioduro dipendente dall’apporto alimentare, in condizioni ottimali (apporto iodico di 150 µg) è di circa 250 µg, Fig. 1.9. Approssimativamente Tabella 1.4 – Apporto dietetico di iodio raccomandato (WHO, UNICEF, ICCIDD 2001). Bambini con età < 6 anni 90 µg Bambini con età scolare (6-12 anni) 120 µg Persone con età >12 anni 150 µg Donne in gravidanza o allattamento 200 µg Fig. 1.9 – Pool dello iodio. 01.indd 11 04/05/2007 8.13.07 12 Malattie della tiroide la tiroide capta 115 µg di iodio/24 ore di cui 75 µg vengono utilizzati per la sintesi degli ormoni tiroidei e il rimanente 40 µg entra nel pool extracellulare. Il pool dello iodio organificato intratiroideo è di 8-10 mg e rappresenta una forma di deposito sia degli ormoni che dei precursori ormonali; da questo pool circa 75 µg vengono immessi in circolo ogni giorno nella forma organificata e corrispondono alla quota utilizzata e metabolizzata dai tessuti periferici. La quantità di ioduro che si genera dai processi di desiodazione epatica e renale ammonta a circa 60 µg/die che ritornano nel pool dello ioduro, mentre 15 µg/die sono escreti con la bile ed eliminati nelle feci, come conseguenza dei processi di glucuronazione e solfatazione degli ormoni tiroidei che avvengono nel fegato. Il pool dello ioduro extracellulare è quindi costituito dalla quota alimentare (150 µg) cui va sommata la quota immessa come tale dalla tiroide (40 µg) a cui va aggiunta la quota derivante dal metabolismo periferico (60 µg) per una quantità totale pari a 250 µg. La maggior parte dello ioduro alimentare viene invece eliminato nelle urine; la sua determinazione rappresenta pertanto un indice attendibile dell’apporto iodico alimentare. In circolo è inoltre presente iodio organificato circolante (T3 e T4) legato alle proteine plasmatiche la cui quota ammonta a circa 600 µg (9, 11, 21). C. Trasporto degli ormoni tiroidei nel sangue. Gli ormoni tiroidei sono secreti all’esterno della cellula e circolano nel sangue quasi completamente sotto forma legata alle proteine sieriche. Solo lo 0,03% della T4 e lo 0,3% della T3 circolano libere e costituiscono gli ormoni metabolicamente attivi. La maggior parte della T4 totale ematica (99,97%) e della T3 totale ematica (99,7%) circola legata alla Thyroxine-binding globulin (TBG) e, in minor misura, alla Thyroxin-binding prealbumin (TBPA), all’albumina e alle lipoproteine. La TBG è la proteina che possiede maggiore affinità per gli ormoni tiroidei, mentre TBPA e l’albumina hanno un’affinità molto minore anche se una capacità maggiore, Tab. 1.5 (1). Tabella 1.5 - Caratteristiche delle proteine di trasporto degli ormoni tiroidei. TBG Peso molecolare (Da) Struttura Contenuto in carboidrati (%) Albumina 54.000 55.000 66.000 Monomero Tetramero Monomero 23 0 0 1,5-2 15-25 3,5-4,5 Emivita plasmatica (giorni) 5 2 15 Numero di siti leganti 1 2 >5 Concentrazione plasmatica (mg/dL) Capacità di legame per la T4 (µg/dL) Frazione dei siti occupata dalla T4 % degli ormoni legati alle singole forme di proteine sieriche T4 T3 01.indd 12 TBPA 20 4 0,8 0,33 0,02 <0,001 70-75 75-80 10-15 5-9 15-20 5-11 04/05/2007 8.13.07 Cenni di anatomia e fisiologia di interesse clinico 13 La TBG è una glicoproteina con il 23% di carboidrati, ha un peso molecolare di 54.000 Da, è sintetizzata dal fegato ed è presente nel siero alla concentrazione di 1,5-2 mg/dL. La TBG, grazie alla sua elevata affinità per la T4 e la T3, trasporta circa il 75% degli ormoni tiroidei circolanti. Ogni molecola di TBG ha un sito legante per gli ormoni tiroidei; il legame con la T4 presenta un’affinità 10-20 volte maggiore rispetto a quello con la T3. In condizioni fisiologiche circa un terzo della TBG circolante lega gli ormoni tiroidei e prevalentemente la T4, in caso di completa saturazione la capacità della proteina è di 20 µg di T4/dL di siero. La TBG è un membro della famiglia degli inibitori delle serin-proteasi (SERPIN), cui appartengono l’α1antichimotripsina, l’α1antitripsina e la proteina di trasporto del cortisolo (CBG). Sia gli estrogeni che la gravidanza aumentano il contenuo in acido sialico della molecola con conseguente diminuzione della sua clearance metabolica e aumento dei livelli sierici; gli androgeni e i glucocorticoidi invece diminuiscono i livelli di TBG. Alcuni farmaci come i salicilati e la difenilidantoina competono per il legame fra ormoni tiroidei e TBG aumentando i livelli delle frazioni libere. La TBPA nota anche come transtiretina è una proteina costituita da 4 subunità identiche ciascuna contenente 127 aminoacidi. La proteina è sintetizzata dal fegato, ha un peso molecolare di 55.000 Da e circola nel siero alla concentrazione di 15-25 mg/dL. La TBPA lega circa il 10-15% della T4 circolante ed ha una affinità per la T4 10 volte maggiore rispetto alla T3. Sebbene la TBPA trasporti una minore quantità di ormoni tiroidei per molecola, rispetto alla TBG, il suo contributo alla quota di ormone libero rilasciato a livello tessutale è pari a quello della TBG poichè la costante di dissociazione del legame ormone-proteina è 5 volte maggiore. La TBPA ha un ruolo specifico nel facilitare il passaggio di T4 attraverso il plesso corioideo, costituisce il 25% delle proteine presenti nel liquido cerebrospinale dove lega l’80% della T4. La TBPA inoltre ha un ruolo nel trasporto del retinolo e dell’acido transretinoico. L’Albumina è anch’essa sintetizzata dal fegato e possiede un peso molecolare di circa 66.000 Da. Essa possiede un sito di legame forte per la T4 e la T3 e più siti di legame debole. L’affinità della proteina per gli ormoni tiroidei è bassa ma in conseguenza della sua elevata capacità (la concentrazione sierica è di 3,5-4,5 mg/dL) essa trasporta circa il 15-20% di tutta la T4 e T3 circolanti. Il legame dell’albumina agli ormoni tiroidei presenta inoltre una elevata costante di dissociazione e questo associato alla elevata capacità fa si che l’albumina sia la principale fonte degli ormoni tiroidei liberi. Le lipoproteine e in maniera significativa le HDL legano una piccola quota di ormoni tiroidei (3% di T4 e 6% di T3). Le funzioni delle proteine di trasporto sono essenzialmente cinque: 1) costituiscono un deposito extracellulare degli ormoni tiroidei; 2) possiedono un’azione “tampone” che mantiene una concentrazione costante delle frazioni libere nonostante eventuali fluttuazioni della secrezione ormonale; 3) sono responsabili della ottimale e omogenea distribuzione ormonale a livello tessutale; 4) consentono un rilascio delle frazioni libere metabolicamente attive in relazione alle esigenze tessutali; 5) aumentano significativamente l’emivita plasmatica degli ormoni tiroidei. 01.indd 13 04/05/2007 8.13.07 14 Malattie della tiroide Nonostante la molteplicità delle funzioni descritte, le proteine di trasporto non sono indispensabili per la funzione tiroidea; infatti una marcata riduzione della loro concentrazione o addirittura la completa mancanza, come si osserva in alcune condizioni con deficit congeniti di ciascuna delle proteine, non alterano la funzione tiroidea. È pur vero che non esiste una condizione clinica in cui tutte le proteine di trasporto siano contemporaneamente carenti e che altre proteine sieriche (SHBG, immunoglobuline, ecc.) contribuiscono al trasporto degli ormoni tiroidei (1). D. Metabolismo degli ormoni tiroidei. La produzione media giornaliera di ormoni tiroidei è illustrata nella Fig. 1.10 (11). In condizioni fisiologiche la tiroide produce in modo predominante T4 e solo in piccola quantità T3, quest’ultima infatti è prodotta soprattutto a livello tessutale periferico mediante desiodazione dell’anello fenolico esterno della T4. Nel siero la T3 ha un’emivita di circa 1 giorno mentre la T4 di 7-8 giorni, Tab. 1.6. Circa un terzo della T4 viene convertita in T3 che rappresenta l’ormone biologicamente attivo essendo 3-8 volte più potente della T4, mentre il 45% è trasformato in reverse-T3 (rT3) che è invece un metabolita privo di attività biologica con emivita relativamente breve (~0,5 h). Gli ormoni tiroidei sono metabolizzati mediante desiodazione nei tessuti periferici (principalmente fegato, rene, cervello) attraverso tre differenti enzimi: la desiodasi tipo I (D1), la desiodasi tipo II (D2) e la desiodasi tipo III (D3), Fig. 1.11. Questi enzimi sono delle selenio-proteine che contengono nel loro sito catalitico un residuo di seleniocisteina Fig. 1.10 – Produzione giornaliera degli ormoni tiroidei. 01.indd 14 04/05/2007 8.13.07 Cenni di anatomia e fisiologia di interesse clinico 15 la cui presenza è essenziale per l’attività enzimatica. Le tre forme di desiodasi differiscono per la diversa localizzazione tessutale e attività enzimatica Tab. 1.7 (2, 11). Tabella 1.6 - Caratteristiche degli ormoni tiroidei. T4 T3 5-11 0,07-0,2 0,8-1,8 ng/dL 2,5-4,5 pg/mL Concentrazione totale (µg/dL) Frazione libera Frazioni libere (% del totale) 0,03 0,3 Produzione giornaliera (µg) 80-100 30-40 Emivita plasmatica (giorni) 8 1 Fig. 1.11 – Metabolismo degli ormoni tiroidei ad opera delle desiodasi. Tabella 1.7 - Caratteristiche delle desiodasi umane. 01.indd 15 D1 D2 Peso molecolare (Da) 27.000 30.000 D3 32.000 Attività desiodasica 5’, 5, 3’, 3 5’ 5 Localizzazione tessutale Fegato, rene, tiroide Ipofisi, tiroide, tessuto adiposo bruno, cuore, SNC, muscolo, placenta Placenta, SNC, cute Inibizione da parte del PTU Elevata Assente Assente Fattori stimolanti l’attività T4 ? T4 Fattori inibenti l’attività Citochine acido iopanoico Acido iopanoico, T4 Acido iopanoico 04/05/2007 8.13.07 16 Malattie della tiroide La D1 rappresenta l’enzima con maggiore distribuzione nell’organismo, e si trova principamente nel fegato, nel rene e nella tiroide. Essa agisce sulla T4 desiodandola in posizione 5’ con formazione della T3. L’attività enzimatica di D1 costituisce la principale fonte di T3 circolante. La D1 possiede inoltre anche l’attività 5-desiodasica e catalizza la trasformazione della T4 in rT3. Una caratteristica distintiva della D1 rispetto alle altre desiodasi è la sua inibizione da parte del propiltiouracile (PTU). L’attività enzimatica è stimolata dagli ormoni tiroidei e pertanto è ridotta nell’ipotiroidismo e aumentata nell’ipertiroidismo. La D1 è inoltre ridotta da varie citochine quali IL-1, IL-6, TNF-α. La D1 catalizza anche la 3’ e 3 desiodazione, reazioni importanti nel catabolismo degli ormoni tiroidei. L’enzima D2 è localizzato soprattutto a livello ipofisario, del sistema nervoso centrale (SNC), del tessuto adiposo bruno e del muscolo scheletrico. Possiede solo l’attività 5’desiodasica ed è insensibile all’azione del PTU. La D3 è presente principalmente nel SNC, nella placenta e nella cute. Possiede solo attività 5-desiodasica e costituisce la principale fonte della rT3 circolante. Riassumendo, in condizioni fisiologiche circa il 35% della T4 è desiodato in T3 per azione della D1 o della D2, il 45% è desiodato in rT3 per azione della D1 o della D3 e circa il 10% è secreto nella bile come metabolita glucuronato o solfato ed escreto con le feci. Il processo di solfatazione è molto importante per il catabolismo degli ormoni tiroidei poichè aumenta l’affinità del substrato con le desiodasi e di conseguenza l’efficienza dei processi di desiodazione a livello epatico. Le frazioni della T4 che vengono desiodate in T3 o in rT3 dipendono dalle condizioni dell’organismo e sono influenzate dallo stato nutrizionale (iper o ipoalimentazione) e dalle condizioni di salute (benessere, febbre o malattie), infatti si osserva una riduzione dell’attività della D1 nel corso di malattie e nel digiuno. La funzione della rT3 nell’uomo non è nota anche se sperimentalmente essa inibisce l’attività 5’-desiodasica, suggerendo così un suo effetto nella regolazione della produzione degli ormoni tiroidei (2). La funzione delle desiodasi è quella di modulare a livello locale, nell’organo bersaglio, l’attività degli ormoni tiroidei regolando la quantità di ormone attivo (T3) che viene prodotta in relazione alle necessità dell’organismo. Le concentrazioni ematiche di MIT e DIT sono molto basse, meno di 0,1 ng/mL, e rappresentano soprattutto il prodotto catabolico della rottura del legame etere fra i due residui iodofenolici delle iodotironine. Le iodotirosine hanno emivita biologica breve, di circa 4-5 ore, sono prive di attività biologica, vengono desiodate principalmente a livello epatico e lo iodio entra nel pool circolante dello ioduro (2, 34). Un’ulteriore tappa metabolica cui vanno incontro gli ormoni tiroidei è la reazione di desaminazione della catena laterale alaninica con formazione di acido tetraiodotiroacetico (TETRAC) e 3,3’,5’-triiodotiroacetico (TRIAC) rispettivamente dalla T4 e dalla T3. Questo processo è di minore importanza dal punto di vista quantitativo e i metaboliti prodotti sono successivamente desiodati. TETRAC e TRIAC sono privi di attività biologica ma il TRIAC è in grado di legarsi con buona affinità ai recettori per gli ormoni tiroidei e competere con la T3 per il legame a livello nucleare (2, 34). 01.indd 16 04/05/2007 8.13.07 Cenni di anatomia e fisiologia di interesse clinico 17 E. Meccanismo d’azione degli ormoni tiroidei. La maggior parte delle azioni degli ormoni tiroidei sono conseguenti all’interazione con specifici recettori nucleari; entrambi gli ormoni si legano ai recettori ma la T3 presenta un’affinità 10-15 volte maggiore e pertanto costituisce il ligando d’elezione (40, 41, 42). La modulazione della trascrizione genica è il principale meccanismo d’azione degli ormoni tiroidei tramite il legame al recettore nucleare. Gli ormoni tiroidei circolanti liberi sono trasportati all’interno della cellula sia per diffusione passiva che mediante un trasporto attivo attraverso la membrana cellulare; la T4 viene convertita in T3 all’interno della cellula e quest’ultima migra nel nucleo dove si lega al recettore nucleare specifico, (11, 40, 41, 42). I recettori per gli ormoni tiroidei (TR) appartengono alla superfamiglia dei recettori nucleari per gli ormoni steroidei/tiroidei, comprendenti i recettori per gli ormoni steroidei, la vitamina D, l’acido retinoico e il recettore attivante la proliferazione dei perossisomi (PPAR) (11, 40, 41, 42). I recettori membri della superfamiglia presentano un’alta omologia strutturale tra loro e derivano da un gene precursore comune nel corso dell’evoluzione; essi agiscono tutti come fattori di trascrizione e modulano l’espressione genica. I TR costituiscono l’omologo cellulare dell’oncogene virale v-erbA responsabile della eritroleucemia aviaria. Si distinguono due tipi di recettori, α e β, i cui geni sono localizzati rispettivamente sul cromosoma 17 e 3, Fig. 1.12 (40, 41, 42). Il gene α codifica per 2 isoforme recettoriali distinte α1 e c-erbAα2. Il TRα1 è espresso in quasi tutti i tessuti, è particolarmente abbondante nel sistema nervoso centrale, nel muscolo scheletrico, nel grasso bruno, nel tessuto adiposo e nel cuore, e agisce come un classico recettore legando la T3 e modificando la trascrizione genica. Il c-erbAα2, presente soprattutto nel testicolo, nel SNC e nell’ipotalamo, non è in grado di legare l’ormone e agisce come un repressore dell’attività mediata dagli altri TR. Il gene β codifica anch’esso per 2 isoforme: TRβ1 e TRβ2, Fig. 1.12. ll TRβ1, presente in molti tessuti, è particolarmente espresso nel fegato e nel rene, mentre il TRβ2 è presente quasi esclusivamente nell’ipofisi e nell’ipotalamo, Tab. 1.8. Le tre isoforme TRα1, TRβ1 e TRβ2 legano tutte la T3 con alta affinità (la T3 si lega con un’affinità 10-15 volte maggiore rispetto alla T4) e modulano la trascrizione di geni specifici svolgendo un ruolo nella funzione, differenziazione e divisione cellulare. Il recettore si lega a specifiche sequenze nucleotidiche, denominate “thyroid hormone response element” (TRE), sotto forma di dimeri. Il TRE è costituito generalmente da una coppia di esameri (sequenza di 6 basi nucleotidiche) disposti in Fig. 1.12 – Struttura schematica dei recettori degli ormoni tiroidei. modo palindromico a diretto 01.indd 17 04/05/2007 8.13.07 18 Malattie della tiroide Tabella 1.8 - Distribuzione tessutale dei recettori per la T3. Recettore Tessuto TRα1 Muscolo scheletrico, SNC, cuore, fegato, tessuto adiposo c-erbAα2 Testicolo, SNC, ipotalamo TRβ1 Fegato, rene, SNC, muscolo TRβ2 Ipofisi, ipotalamo contatto o separati da una sequenza di DNA di lunghezza variabile, Fig. 1.13 (40, 41, 42). I recettori leganti la T3 si legano al DNA formando degli eterodimeri con i recettori per il retinoide X (RXR) o per l’acido retinoico (RAR), mentre i TR senza T3 si legano al DNA sia come eterodimeri che come omodimeri. Infatti una caratteristica peculiare dei TR è quella di legarsi al DNA e modulare la trascrizione genica anche in assenza di ligando. Il legame della Fig. 1.13 – Sequenza Consensus del TRE. T3 al recettore induce, a seconda del gene, un aumento o una riduzione della trascrizione, quindi nei geni regolati positivamente dagli ormoni tiroidei i TR privi di ligando esercitano una inibizione della trascrizione e il legame con la T3 inverte il processo determinando una stimolazione di essa; il processo inverso si verifica nei geni regolati negativamente. Come già accennato l’isoforma c-erbAα2 del recettore non è in grado di legare la T3 ma è in grado di legare il TRE sul DNA. Oltre agli effetti trascrizionali, sono state descritte anche delle azioni non genomiche degli ormoni tiroidei, Tab. 1.9, mediate, probabilmente, da recettori non nucleari diversi dai TR, localizzati sulla superficie della membrana cellulare e a livello mitocondriale (5, 40, 41, 42). Studi “in vitro” hanno identificato varie proteine, sia a livello mitocondriale (ADP/ATP translocasi) che della membrana plasmatica (integrina αVβ3), leganti gli ormoni Tabella 1.9 – Azioni non genomiche degli ormoni tiroidei. – Stimolo dell’attività Ca++-ATPasi di membrana – Stimolo del trasporto transmembrana del glucosio – Inibizione dell’attività desiodasica di D2 – Azione sulla adenina-nucleotide translocasi mitocondriale (enzima chiave dello scambio ATP/ADP) – Polimerizzazione dell’actina costituente il citoscheletro 01.indd 18 04/05/2007 8.13.08 Cenni di anatomia e fisiologia di interesse clinico 19 tiroidei, ma il loro ruolo è ancora in discussione (5). Studi recenti hanno evidenziato che l’interazione degli ormoni con l’integrina αVβ3 è correlata all’attivazione del segnale di trasduzione di MAP-chinasi e con il rimodellamento del citoscheletro (5). F. Effetti degli ormoni tiroidei. Gli ormoni tiroidei hanno molteplici effetti e intervengono nella regolazione dei processi di crescita e metabolici di quasi tutti gli organi ed apparati, Tab. 1.10 (11, 21, 42). Alcuni effetti, quali l’attivazione del trasporto intracellulare di glucosio e degli aminoacidi, sono precoci, cioè si manifestano nell’arco di minuti e sono di natura non genomica; la maggior parte degli effetti invece sono tardivi e richiedono un periodo di latenza di alcune ore; questi effetti sono genomici e mediati dai TR. Gli ormoni tiroidei sono fondamentali per lo sviluppo fetale e per i processi di accrescimento postnatale, e il loro ruolo per lo sviluppo del SNC e dell’apparato muscolo-scheletrico è particolarmente importante. Essi inoltre sono importanti regolatori delle funzioni metaboliche: in quasi tutti i tessuti aumentano il consumo di O2, la produzione di calore e la sintesi proteica; intervengono nel metabolismo glucidico aumentando la gluconeogenesi e la glicogenolisi epatica e stimolando l’assorbimento intestinale di glucosio; influenzano il metabolismo lipidico aumentando la sintesi epatica dei recettori per le LDL, l’attività della lipoproteinlipasi e la lipolisi nel tessuto adiposo. Gli ormoni tiroidei sono necessari per la conversione epatica del carotene in vitamina A; infatti nell’ipotiroidismo si ha un accumulo di carotene nel plasma responsabile dal colorito giallastro della cute. Altri importanti effetti degli ormoni tiroidei si riscontrano nell’apparato cardiovascolare dove esercitano un effetto inotropo e cronotropo positivo conseguenti alla stimolazione della sintesi nelle cellule miocardiche delle catene α di miosina, dell’enzima Ca++-ATPasi e dei recettori β-adrenergici (16). La sintesi di questi ultimi è stimolata anche in altri tessuti quali il muscolo scheletrico e il tessuto adiposo. Tabella 1.10 – Principali effetti degli ormoni tiroidei. 01.indd 19 Organo/tessuto Effetti Cuore Aumentano il numero dei recettori β adrenergici e la sintesi della catena pesante α della miosina Tessuto adiposo Stimolano la lipolisi Muscolo Aumentano il catabolismo proteico Osso Promuovono la crescita e lo sviluppo Sistema Nervoso Promuovono lo sviluppo Intestino Stimolano l’assorbimento di glucosio Fegato Aumentano la sintesi del recettore per le LDL, stimolano la conversione del carotene in vitamina A Tutti (eccetto testicolo, utero, tessuto linfatico e adenoipofisi) Aumentano il consumo di O2 e la produzione di calore 04/05/2007 8.13.08 20 Malattie della tiroide G. Controllo della funzione tiroidea. 1. Asse ipotalamo-ipofisi-tiroide. La sintesi e secrezione degli ormoni tiroidei è regolata primariamente dalla tropina ipofisaria Thyroid Stimulating Hormone (TSH) o tireotropina, che a sua volta è regolata dal fattore ipotalamico Thyrotropin-Releasing Hormone (TRH) (34). Il TRH è un tripeptide sintetizzato nei nuclei sopraottico e paraventricolare dell’ipotalamo, il cui gene si trova sul cromosoma 3. Esso stimola la sintesi e la secrezione del TSH legandosi a specifici recettori di membrana delle cellule tireotrope. La risposta dell’ipofisi al TRH è bimodale liberando inizialmente il TSH già sintetizzato e presente nell’ipofisi e quindi inducendone la sintesi. Il TRH stimola anche la sintesi e il rilascio della prolattina. Esso è prodotto anche in altre parti del SNC e nell’apparato gastroenterico (14). Il TRH viene metabolizzato rapidamente con una emivita ematica di circa 5 minuti, i livelli sierici sono di 25-100 pg/mL. La sua secrezione è stimolata dagli agonisti α-adrenergici mentre gli ormoni tiroidei esercitano un feed-back negativo sulla sua produzione (14). Il TSH è una glicoproteina del p.m. di 28.000 Dalton costituita da due subunità, α e β. La subunità α, di 92 aminoacidi, è comune agli altri ormoni glicoproteici ipofisari (FSH, LH) e all’hCG, mentre la subunità β, di 112 aminoacidi, è specifica per ciascun ormone. Il TSH ha una concentrazione ematica di 0,4-4,0 µU/mL e un’emivita di circa 60 min. Costituisce il principale regolatore della crescita e della funzione tiroidea intervenendo su tutte le tappe dell’ormonogenesi ed agisce legandosi ad uno specifico recettore di membrana (TSHR) appartenente alla famiglia dei recettori accoppiati alle G-proteins (31). Il legame del TSH al recettore attiva diversi sistemi di trasduzione del segnale; il principale è rappresentato dal sistema adenilatociclasi/AMPc, ma un ruolo importante è svolto anche dai sistemi della fosfolipasi C (PLC) e della fosfolipasi A2 (PLA2) (27). Lo studio del TSHR si è rivelato molto utile per la comprensione della patogenesi delle tireopatie autoimmuni e del meccanismo d’azione degli autoanticorpi stimolanti e bloccanti il recettore. Inoltre studi molecolari hanno evidenziato mutazioni attivanti del TSHR responsabili di alcune forme di ipertiroidismo (ipertiroidismo familiare non autoimmune, adenoma autonomo iperfunzionante) e di ipotiroidismo (sindrome da resistenza al TSH) (31). La produzione di TSH è inversamente regolata dalla concentrazione degli ormoni tiroidei presenti nell’ipofisi anteriore, dove la 5’-desiodasi tipo II converte rapidamente la T4 in T3. Pertanto, la regolazione ipofisaria della secrezione del TSH è influenzata soprattutto dalla concentrazione della T4 sierica piuttosto che da quella della T3. Inoltre, l’attività della desiodasi specifica dell’ipofisi e del cervello è aumentata dalla riduzione dei livelli di T4 sierica; in questi organi anche la conversione della T4 in T3 aumenta non appena la T4 sierica si riduce. Il sistema di desiodazione ipofisaria rappresenta il meccanismo regolatore principale della produzione di TSH da parte dell’ipofisi (2, 11). 2. Autoregolazione da parte dello iodio. Lo iodio non è solo un costituente indispensabile per la formazione degli ormoni tiroidei, ma è anche un regolatore della funzione tiroidea. Un rapido aumento della concentrazio- 01.indd 20 04/05/2007 8.13.08 Cenni di anatomia e fisiologia di interesse clinico 21 ne di ioduro sierico, maggiore di 20-30 µg/dL, determina un blocco dell’organificazione dello iodio e quindi dell’ormonogenesi. Tale fenomeno è definito effetto Wolff-Chaikoff e generalmente è transitorio (~48 ore). Infatti se permane l’elevata concentrazione di ioduro l’inibizione scompare e l’ormonogenesi tiroidea viene ripristinata (fenomeno chiamato “escape” dall’effetto Wolff-Chaikoff) (4). Non è tuttora noto come l’eccesso di ioduro agisca a livello molecolare, studi “in vitro” hanno dimostrato che esso interferisce con la trasduzione del segnale indotta dal TSH e che modifica a livello trascrizionale l’espressione di vari geni tiroidei fra i quali NIS. Lo ioduro esercita inoltre un effetto inibitorio sulla crescita del tireocita (4). 3. Altri fattori. Altri ormoni, fattori di crescita e neurotrasmettitori partecipano alla regolazione della crescita e funzione tiroidea. Sebbene i loro effetti sono stati ben descritti in studi sperimentali “in vitro”, il loro ruolo nella fisiologia e fisiopatologia umana non è ancora chiaro. Alcuni tra i fattori meglio studiati sono riportati in Tab. 1.11, molte delle loro azioni sono strettamente integrate a quelle del TSH modulandone l’effetto finale sul tireocita (18). Recentemente è stato osservato che la Tg presente nel lume follicolare agisce in modo autocrino sulla regolazione dell’espressione di geni tiroide specifici quali il TSHR, TPO, NIS e PDS (29, 30). Tabella 1.11 – Fattori che intervengono nella regolazione della crescita e funzione tiroidea. Crescita Funzione TSH S S LH, hCG (alte concentrazioni) S S FGF S ? Ioduro I I TGF-β I I Noradrenalina ? S Insulina/IGF-I S S Acetilcolina ? I Citochine (IL-1, TNF-α, IFN-γ) I I Tireoglobulina ? I -S = stimolazione - I = inibizione Gli studi sul meccanismo d’azione degli ormoni tiroidei e in modo particolare sulle loro azioni trascrizionali, mediate dai recettori nucleari, hanno consentito la sintesi di ligandi selettivi dei TR denominati STORMs (selective thyroid hormone receptor modulators). Tali ligandi sono in grado di esercitare una stimolazione dei TR tessuto-specifica che si ritiene possa essere di grande utilità in clinica. Sono in atto studi per confermare un loro utilizzo terapeutico (Flamant F, Gauthier K, Samarut J, Thyroid hormones signaling is getting more complex: STORMs are coming, Mol Endocrinol, 2007, 21, 321). 01.indd 21 04/05/2007 8.13.08 22 Malattie della tiroide Bibliografia 1. Benvenga S, Thyroid hormone transport proteins and the physiology of hormone binding, in Werner and Ingbar’s The Thyroid: a Fundamental and Clinical Text, 9th Ed, Braverman LE, Utiger RD Eds, Lippincott Williams and Wilkins, Philadelphia, 2005, 97. 2. Bianco AC, Reed Larsen P, Intracellular pathways of iodothyronine metabolism, in Werner and Ingbar’s The Thyroid: a Fundamental and Clinical Text, 9th Ed, Braverman LE, Utiger RD Eds, Lippincott Williams and Wilkins, Philadelphia, 2005, 109. 3. 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