Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Report VEQ FARMACONTROL Aspetti della gestione del programma VEQ Numero dei solleciti per farmacontrol 2014 Il 7% dei laboratori partecipanti ha ricevuto almeno un sollecito (da 1 a 7) Paola Pezzati • • FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Report VEQ FARMACONTROL • • • • • • • • • Sali di litio (carbonato di litio Li2CO3) Terapia fondamentale per i disordini bipolari: stabilizza l’umore e previene il suicidio Efficacia dose-dipendente Effetti avversi: neurologici, cardiovascolari, renali Indice terapeutico ristretto: 0.8-1.2 mmol/L Variabilità farmacocinetiche inter e intra individuali Possibile tossicità per interazioni farmacologiche Monitoraggio dopo una settimana dall’inizio della terapia, allo steady state, 12 ore dopo l’ultima dose Successivamente ogni 1-2 settimane fino al raggiungimento del livello sierico ideale, successivamente ogni 2-3 mesi per i primi 6 mesi di trattamento , quindi ogni 6-12 mesi FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati LITIO Report VEQ FARMACONTROL LITIO • • Ogni 6-12 mesi : creatinina siero – GFR, calcio Ogni 6 mesi TSH per i primi 3 anni di trattamento successivamente 1 volta / anno Non raccomandato nei bambini<12 anni Poco raccomandato negli anziani, se non sostituibile: range terapeutico 0.5-0.8 mmol/L FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Necessità di ulteriori monitoraggi: Report VEQ FARMACONTROL Risultati litio inviati per metodo analitico ciclo 2014 1400 1200 Paola Pezzati 1000 800 600 400 200 0 colorimetrico dry chemistry fotometro a fiamma FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 ise diretta Report VEQ FARMACONTROL Paola Pezzati Range terapeutico 0.4-1.2 mmol/L Goal analitico CLIA ±0.3 mmol/L ±20% FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL Assorbimento atomico Roche integra FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 OCD Vitros Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL Siemens Dimension Roche Cobas FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Thermo Scientific Infinity Report VEQ FARMACONTROL • • • • I programmi di VEQ hanno non solo funzione «educativa» per il singolo partecipante, ma facilitano il confronto tra i vari metodi analitici e mettono in evidenza i problemi nella performance dei vari assay Roche Integra ha la migliore performance in termini di CV (1.5-5.5%) e bias (da -1.0%-a -4.1%) Il metodo colorimetrico Thermo Scientific Infinity mostra una scarsa concordanza con il metodo di riferimento, con un errore sistematico e proporzionale (cattiva qualità dei materiali di calibrazione-cattiva standardizzazione?) e un bias medio -9.4% Scarsa concordanza tra i vari metodi a disposizione e conseguente mancata concordanza nella interpretazione del risultato <0.8 mmol/L= subterapeutico 1.2-2.0 mmoli/L = potenzialmente tossico >2.0 mmol/L = gravemente tossico FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Conclusioni degli Autori Report VEQ FARMACONTROL 2 campioni /anno FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati NEW Report VEQ FARMACONTROL Negli ultimi 10 anni sono stati approvati per l’uso in USA ed Europa 14 «nuovi antiepilettici» Felbamato Gabapentin Lacosamide Lamotrigina Levetiracetam Oxcarbazepina Pregabalin Rufinamide Stiripentol Tiagabina Topiramato Vigabatriv Zonisamide FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Elicarbazepina acetato Report VEQ FARMACONTROL Antiepilettici di prima generazione: carbamazepina, fenobarbital, fenitoina, primidone, acido valproico. Svantaggi antiepilettici di prima generazione: basso indice terapeutico alta variabilità interindividuale nella farmacocinetica FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati RICERCA DI FARMACI ANTIEPILETTICI ALTERNATIVI le motivazioni Report VEQ FARMACONTROL TDM VALORE AGGIUNTO del TDM RCT lamotrigina, oxcarbazepina, stiripentol, zonisamide FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Il monitoraggio del farmaco fa parte di un percorso specifico di cura Report VEQ FARMACONTROL Frequenza irregolare delle crisi epilettiche Possibili lunghi intervalli («spontanei» ) tra le crisi Effetti avversi dei farmaci di difficile riconoscimento in quanto «mascherati» dalla patologia neurologica sottostante EEG unico «gold standard» FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati La valutazione della efficacia/benefici della terapia AED non è immediata a causa di: TDM Assunto: la concentrazione misurata correla con la concentrazione al sito di azione (canali ionici dei neuroni cerebrali) Ma: Tolleranza Irreversibilità della azione del farmaco Presenza di metaboliti attivi (da cui: TDM parent drug/parent drug+metaboliti/metaboliti) FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL Variabilità interindividuale della farmacocinetica del metabolismo per funzione d’organo alterata fattori genetici interazioni farmaco/farmaco , farmaco/cibo Fenomeno dell’induzione enzimatica (CBZ,PHE, fenitoina) via cyt P450 (aumenta la eliminazione di AED e di altri farmaci) FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL Report VEQ FARMACONTROL Inibizione di enzimi epatici (a. valproico) Dialisi (alto legame del farmaco alle proteine = bassa clearance) FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Fenomeno della auto induzione (Carbamazepina: il metabolismo è accelerato se l’uso è cronico: la dose deve essere aumentata, fino ad un plateau) Report VEQ FARMACONTROL Range terapeutico più ampio * Effetti avversi di minore gravità Utilizzati anche in altre patologie (disordini bipolari, sindromi di dolore cronico, emicrania) Matrici: siero, plasma, saliva, liquor FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati I nuovi antiepilettici generalmente sono più “maneggevoli” Report VEQ FARMACONTROL Definizione probabilistica I nuovi AED sono spesso studiati come terapia aggiuntiva e non come monoterapia Soggettività della risposta Tipologia delle manifestazioni epilettiche Tipologia della patologia non epilettica Scelta della popolazione sulla quale sono stati condotti originariamente gli studi FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati * Problema del «range di riferimento» Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL Range terapeutico 1-14 mg/L FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL Range terapeutico 1-14 mg/L FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Farmaci immunosoppressori Inibitori della calcineurina (CNI) ciclosporina tacrolimus Inibitori della inosina Monofosfato Deidrogenasi (IMPDH) acido micofenolico Inibitori di mTOR (mammalian target of rapamycin) sirolimus everolimus FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL Report VEQ FARMACONTROL Ciclosporina: nel citoplasma dei linfociti T si lega alla ciclofillina e questo complesso inibisce l’attività della calcineurina enzima critico per la trascrizione dell’interleuchina 1 e 2 e dell’interferone gamma, essenziali per l’attivazione dei linfociti T. significative variazioni inter ed intra individuali e possibili interazioni farmacologiche ristretto indice terapeutico molti metaboliti, alcuni attivi costante monitoraggio FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati polipeptide ciclico costituito da 11 amminoacidi Report VEQ FARMACONTROL Concentrazione ng/mL 72.7 89.35 Paola Pezzati 213.72 233 330.81 418.54 687.59 840.98 Emolisati di origine umana- spike FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Report VEQ FARMACONTROL FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Report VEQ FARMACONTROL Paola Pezzati Campione C spike 100 ng/mL FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Report VEQ FARMACONTROL •Scopo: esplorare i fattori che contribuiscono alla variabilità intralaboratorio •Questionario relativo a fase preanalitica, analitica, post analitica •Questionario sulla percezione delle fonti di variabilità del processo FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati •Survey condotta su 76 laboratori in 14 nazioni che eseguono TDM per immunosoppressori Report VEQ FARMACONTROL Ambiti investigati Tipologia dei laboratori Modalità di: prelievo, invio,conservazione Pretrattamento campioni Fase pre analitica Protocollo analitico dettagliato Parametri di performance del sistema e di validazione del metodo Fase analitica Procedure di controllo di qualità Scelta di calibratori, controlli, reference standard Modalità e condizioni di refertazione Percezione delle fonti di variabilità FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Fase post analitica Giudizio qualità processo Paola Pezzati Metodo analitico Piattaforma analitica Report VEQ FARMACONTROL Assegnazione del personale alla attività TDM-immuno Paola Pezzati Numerosità del personale di laboratorio <20 21-100 101-500 >501 a(1-3) FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 b(4-6) c(7-10) d(11-20) e(>20) Report VEQ FARMACONTROL Distribuzione metodo - analita 100% 90% 80% 70% 60% Paola Pezzati 50% 40% 30% 20% 10% 0% FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Report VEQ FARMACONTROL Metodi immunometrici Distribuzione piattaforme-analita 100 90 sirolimus 80 60 50 ciclosporina everolimus 40 acido micofenolico 30 20 10 0 ABBOTT Architect ABBOTT Architect ABBOTT Architect Thermo Fisher CDx90 FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Roche Cobas Paola Pezzati tacrolimus 70 Report VEQ FARMACONTROL Protocolli analitici LC-MS 100% 80% 70% 60% 50% Paola Pezzati AB Sciex Waters Thermo Fisher Scientific 90% 40% 30% 20% 10% 0% FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Modalità di: prelievo, invio,conservazion e campioni biologici Preparazione del campione Non standardizzata Non documentata Report VEQ FARMACONTROL Manuale (72%) Calibratori Scarsa attenzione a: -T centrifugazione -utilizzo di punte con filtro Scarsa attenzione: -T colonna analitica (21%) -pH fasi mobili (35%) Paola Pezzati Corsa cromatografica Nessuna azione per -campione coagulato(29%) -errore di anticoagulante(43%) -volume scarso (53%) Commerciali per immunoassay e LC-MS FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 LC-MS: ciclosporina 76% Tacrolimus 78% ; Sirolimus 70%; Everolimus 59%; A.micofenolico 33% Curve di calibrazione poco estese (3 punti) Report VEQ FARMACONTROL Verifica performance analitiche LC-MS quando sono utilizzati kit del commercio Linearità, imprecisione accuratezza (80%) Verifica performance analitiche LC-MS quando sono utilizzati protocolli “in house” -effetto matrice (89%) -trascinamento (80%) -stabilità estratti a bordo dell’autocampionatore(67%) Controlli non indipendenti (34%) Preparazioni per diluizioni da soluzione madre Scarsa attenzione a : -effetto matrice (28%) -trascinamento (57%) -autosampler stability Paola Pezzati Controlli interni di qualità Acquistati o “in house” Validazione metodo -non validati presso la propria struttura (9% LCMS) Rivalidazione del metodo Non eseguita (35% LC-MS) Non eseguita (45% immunoassay) FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Nessuna iniziativa (16%) Report VEQ FARMACONTROL Partecipazione a programmi di controllo esterno di qualità Formazione del personale addetto al TDM immunosoppressori in LC-MS Nessuna iniziativa (14-19%) Esperienza operatore : minimo 3 mesi-massimo 1 anno -sedute mensili di formazione -retraining FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 20% del personale addetto ha <3 mesi esperienza -retraining : “al bisogno”/dopo criticità Paola Pezzati Revisioni programmate e periodiche di CQI e VEQ Problema della variabilità intralaboratorio nel TDM immunosoppressori I kit del commercio sono più affidabili rispetto ai metodi “in house” I range di concentrazione farmaco attualmente misurabili sono adeguati È un problema grave 51% Report VEQ FARMACONTROL Non è un problema grave 56% No Si Si 50% 34% 94% FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Problema della variabilità Interlaboratorio nel TDM immunosoppressori Report VEQ FARMACONTROL Possibilità di sviluppo in house con tempi relativamente brevi e in autonomia rispetto alle ditte Misurazione contemporanea di vari analiti Metodo sensibile e specifico Kit commerciali CE/FDA Potenziale risparmio economico o Investimento economico o Investimento in formazione del personale o Validazione metodo ben condotta (Effetto matrice/soppressione ionica) o Minori possibilità di automazione o Possibilità di errore umano o Relativamente bassa cadenza analitica o Difficoltà operatività 7giorni/settimana o Difficoltà assistenza per manutenzione straordinaria h24 , 7 giorni/settimana FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati LC-MS Report VEQ FARMACONTROL Possibilità di automazione Facilità di integrazione nel corelab Random access Tracciabilità (LIS, barcode) Formazione “standard del personale” Operatività potenziale h 24, 7 giorni/settimana Assistenza per manutenzione straordinaria h 24, 7 giorni/settimana Minore necessità di troubleshooting Semplicità di backup Kit commerciali CE/FDA Armonizzazione di fatto tra laboratori o o Scelta oculata dei kit commerciali bias calibrazione sensibilità analitica specificità analitica interferenze cross reattività per i metaboliti per farmaci anticorpi eterofili composti endogeni Costo FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati Metodi immunometrici Report VEQ FARMACONTROL Metodi immunometrici Costo reagenti Necessità di più piattaforme analitiche Necessità variabili di adattamento dell’ambiente di lavoro Costo reagenti dipendente dalle scelte analitiche (kit commerciali, SI deuterati,estrazione in fase solida, preparatore automatico) FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati LC-MS Costi strumento/service Formazione Mantenimento della formazione Smaltimento solventi organici Gestione dei gas Rumorosità ambiente di lavoro Necessità specifiche di adattamento ambiente laboratorio Report VEQ FARMACONTROL Numero analiti/anno Numero operatori da dedicare Costo della formazione Costo del mantenimento della formazione Costo analisi da tariffario regionale Service vs acquisto/riscatto strumento Frequenza della necessità di aggiornamento tecnologico Costo dei reagenti Costo dei contratti di manutenzione Possibilità di backup Vantaggi del “modello corelab” automazione consolidamento contenimento dei costi Tracciabilità accreditamento istituzionale validazione metodi Performance analitica sensibilità specificità imprecisione accuratezza interferenze analitiche robustezza TAT FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014 Paola Pezzati TDM: desiderata Business plan Report VEQ FARMACONTROL Paola Pezzati Grazie per la cortese attenzione FIRENZE 7 NOVEMBRE 2014