16/12/2016 Introduzione al Citoscheletro Biotecnologie http://zeiss-campus.magnet.fsu.edu/galleries/cells/index.html Le cellule animali sono cellule eucariotiche caratteristiche, racchiuse da una membrana plasmatica e contenenti un nucleo circondato da una membrana e organelli. Al contrario delle cellule degli altri regni eucarioti (piante e funghi) le cellule animali NON contengono una parete cellulare. La struttura della cellula animale – [1] http://micro.magnet.fsu.edu/cells/animalcell.html 1 16/12/2016 La struttura della cellula animale – [2] La mancanza di una parte cellulare rigida ha permesso agli animali di sviluppare una maggiore diversità di tipi cellulari e organi. Cellule specializzate che formano i nervi e i muscoli – tessuti che le piante non sono state in grado di sviluppare – hanno dato a questi organismi la mobilità. La capacità di muoversi mediante l’uso di tessuti muscolari specializzati è il marchio caratteristico del regno animale. I Protozoi (organismi eucarioti unicellulari) si muovono, ma non tramite strutture muscolari, bensì mediante cilia, flagelli o pseudopodi. http://micro.magnet.fsu.edu/cells/animalcell.html 2 16/12/2016 Citoscheletro Rete proteica complessa e dinamica formata da tre strutture filamentose distinte ma interconnesse strutturalmente e funzionalmente: Microfilamenti Microtubuli Filamenti intermedi 3 16/12/2016 Note sulla dinamica del citoscheletro Proteine: polimeri di amminoacidi legati covalentemente (legami peptidici; forti, molto stabili). Citoscheletro: polimeri di proteine (sintetizzate in ribosomi liberi nel citosol) collegate da legami non‐ covalenti (più deboli, maggiore possibilità di riorganizzazione rapida e di flessibilità). Microtubuli Microfilamenti Filamenti intermedi 4 16/12/2016 Funzioni del citoscheletro – [1] Fornire un supporto strutturale Fornire una impalcatura interna che determina la posizione dei vari organelli all’interno della cellula. Funzioni del citoscheletro – [2] Collaborare ai meccanismi necessari al movimento di organelli e vescicole nelle cellule. 5 16/12/2016 «Il citoplasma è incredibilmente dinamico e simile ad un’autostrada organizzata ma molto occupata con motori attivamente traghettando componenti in tutte le direzioni» Lodish et al., 7° ed Funzioni del citoscheletro – [3] Agire come elementi generatori di forza che determinano il movimento dell’intera cellula o di alcune regioni di una cellula. 6 16/12/2016 Filamenti di actina e movimento cellulare 7 16/12/2016 Cilia, trachea (sostegno interno che permette alle cilia di muoversi: assonema di microtubuli, dineina, ecc,) Stereocilia nelle cellule «capellute» dell’orecchio interno (sostegno interno: microfilamenti di actina) 8 16/12/2016 Funzioni del citoscheletro – [4] Servire come sito di ancoraggio per gli RNA messaggeri, facilitandone la traduzione in polipeptidi. Jung H, Holt CE. Local translation of mRNAs in neural development. Wiley Interdiscip Rev RNA. 2:153‐165, 2011. 9 16/12/2016 RUOLO DELLE PROTEINE ASSOCIATE AL CITOSCHELETRO – [1] All’interno delle cellule, centinaia di proteine accessorie associate al citoscheletro regolano la distribuzione spaziale e il comportamento dinamico dei filamenti. Queste proteine accessorie si legano ai filamenti oppure alle loro sub‐ unità per: Determinare il sito di assemblaggio dei nuovi filamenti Regolare la ripartizione delle proteine fra filamenti polimerici e subunità monomeriche Alterare la cinetica di assemblaggio e disassemblaggio dei filamenti Fornire energia per generare forza Collegare i filamenti gli uni agli altri o ad altre strutture cellulari quali la membrana plasmatica o degli organelli RUOLO DELLE PROTEINE ASSOCIATE AL CITOSCHELETRO – [2] In questi processi le proteine accessorie portano le strutture citoscheletriche sotto il controllo di segnali intracellulari o extracellulari, ad es. dei segnali che scatenano le notevoli trasformazioni del citoscheletro durante il ciclo cellulare. Collaborando con diverse proteine accessorie permettono alle cellule eucariotiche di mantenere una struttura interna altamente organizzata ma flessibile e, in molti casi, di muoversi. 10 16/12/2016 MOVIMENTO CELLULARE Livelli subcellulare, cellulare e di organismo Richiede ATP (energia) Mediato dal citoscheletro Assemblaggio e disassemblaggio di fibre del citoscheletro (microfilamenti e microtubuli) Proteine motore usano le fibre del citoscheletro (microfilamenti e microtubuli) come rotaie Mov_1 11 16/12/2016 Mov_2 Mov_3 12 16/12/2016 Mov_4 PROTEINE MOTORE “Caminano” o scivolano lungo le fibre del citoscheletro: Miosina sui microfilamenti Chinesina e dineina sui microtubuli Usano l’energia dell’idrolisi dell’ATP Fibre del citoscheletro: Servono come rotaie per trasportare organelli o vescicole Scivolano una rispetto all’altra 13 16/12/2016 Membrana plasmatica & Citoscheletro ESTROFLESSIONI, PLASTICITA’ E DINAMICITA’ 14 16/12/2016 Cellule isolate in coltura (ovaio di hamster): fase intercinetica (interfase) Cellule isolate in coltura (ovaio di hamster): Mitosi 15 16/12/2016 16 16/12/2016 Pericita http://www.sciencephoto.com/media/303516/enlarge 17