ESPERIENZA DI BIOLOGIA E BIOCHIMICA CELLULARE: Analisi dell’espressione e della localizzazione
subcellulare di una proteina fluorescente in cellule di mammifero.
Scopo dell’esperienza: acquisire nozioni di base sulla manipolazione in coltura di cellule di mammifero.
Mettere in pratica procedure sperimentali correntemente utilizzate nei laboratori di ricerca di biochimica
cellulare per studiare l’espressione e la localizzazione dentro la cellula di una proteina di interesse, o per
saggiare l’effetto di sostanze di sintesi chimica o derivati naturali sulla capacità proliferativa delle cellule.
Gli studenti procederanno con il piastramento di una linea cellulare aderente ad una densità d’interesse.
Effettueranno la trasfezione (introduzione di DNA esogeno) per far esprimere a tali cellule una proteina
autofluorescente di cui mediante analisi a microscopio a fluorescenza analizzeranno la localizzazione
subcellulare. Inoltre gli studenti allestiranno una curva di crescita di fibroblasti murini normali e trasformati
(tumorali) in presenza di un agente in grado di modulare la proliferazione cellulare.
ESPERIENZA DI LABORATORIO DI MICROBIOLOGIA E BIOLOGIA MOLECOLARE
Scopo dell’esperienza: acquisire nozioni di base sulle metodologie di identificazione di microrganismi
mediante tecniche molecolari
1. Isolamento in piastra di diverse forme microbiche a partire da campioni ambientali (suolo, acque, ecc.)
che forniremo noi o in parte portati dagli studenti
2. Identificazione molecolare dei batteri isolati mediante tecniche di PCR, isolamento del gene 16S rRNA,
tecnica ARDRA (Amplified Ribosomal DNA Restriction Analysis).
3. Allestimento di antibiogramma su ceppi isolati per identificare la resistenza/sensibilità a diversi
antibiotici
4. Trasformazione di un ceppo batterico con un plasmide ricombinante contenente un gene eterologo
