DIPARTIMENTO DI SCIENZE BIOLOGICHE, GEOLOGICHE E AMBIENTALI Corso di laurea magistrale in Biologia sanitaria e cellularemolecolare Anno accademico 2016/2017 - 1° anno BIOLOGIA DELLA RIPRODUZIONE E DEL DIFFERENZIAMENTO 7 CFU - 2° semestre Docente titolare dell'insegnamento MARIA VIOLETTA BRUNDO Email: [email protected] Edificio / Indirizzo: Via Androne 81 Telefono: 0957306039 Orario ricevimento: lunedi-mercoledì-venerdì dalle 9,00 alle 11,00 OBIETTIVI FORMATIVI Il corso ha come obiettivo l'approfondimento delle conoscenze nel campo della applicazioni della biologia della riproduzione dell'uomo. Il Corso fornirà elementi di biologia di base del processo riproduttivo nell'uomo, uno studio approfondito dei processi di gametogenesi e di sviluppo embrionale pre-impianto, la conoscenza delle principali tecnologie utilizzate per la riproduzione assistita, e un approfondimento dei problemi legali ed etici relativi alle procedure di fecondazione in vitro nell'uomo. Dal punto di vista applicativo, il corso si propone di approfondire le conoscenze relative alle più recenti tecniche della biologia della riproduzione consentendo di esercitare in maniera autonoma, con originalità, creatività e rigore metodologico, l'attività diagnostica e di ricerca in tale settore. FREQUENZA LEZIONI obbligatoria CONTENUTI DEL CORSO Prima parte: La riproduzione: caratteristiche generali Tappe dello sviluppo embrionale e loro significato La gametogenesi: generalità Spermatogenesi e spermioistogenesi Ciclo dell’epitelio seminifero Morfologia ed ultrastruttura del gamete maschile dei mammiferi; il processo di capacitazione Influenza ormonale nella maturazione del gamete maschile; aspetti degenerativi dello spermatozoo; organizzazione e differenziamento del testicolo: struttura del tessuto interstiziale e del tubulo seminifero. Oogenesi: organizzazione morfologica e strutturale del gamete femminile dei mammiferi; la follicologenesi, evoluzione del follicolo dopo l’ovulazione, atresia follicolare; controllo ormonale della oogenesi; accrescimento dell’uovo; rivestimenti ovulari dei mammiferi: struttura e funzione; organizzazione e differenziamento dell’ovario. La fecondazione nei mammiferi: chemiotassi, interazione tra i gameti, reazione acrosomale, penetrazione dello spermatozoo attraverso gli involucri ovulari, attivazione della cellula uovo. La segmentazione nei mammiferi: caratteristiche generali, compattazione, estrusione dalla zona pellucida; trasporto dell’embrione durante la segmentazione; impianto e deciduazione; organizzazione cellulare nel corso della embriogenesi; i morfogeni e loro modalità di azione. La gastrulazione: movimenti morfogenetici, formazione ed evoluzione dei tre foglietti embrionali; la neurulazione nei mammiferi; ruolo degli ormoni nel differenziamento sessuale dei mammiferi; annessi embrionali: organizzazione, struttura e funzione; la poliembrionia nei mammiferi. Induzione embrionale, attività molecolari nella specificità regionale dell’induzione. Aspetti molecolari durante le prime fasi dello sviluppo. Adesione cellulare e comunicazioni cellulari durante la morfogenesi. Morfogeni. Cellule staminali. Seconda parte: Topografia e cenni di fisio-patologia dell’apparato genitale femminile e maschile La fecondazione assistita Generalità e cenni storici; organizzazione del laboratorio di fecondazione assistita: apparecchiature e terreni di coltura per gameti ed embrioni; indagine di laboratorio del fattore maschile e prove di trattamento per ART; preparazione del seme per inseminazione intrauterina Preparazione del liquido seminale per FIVET ed ICS; preparazione del fluido seminale per ICS Preparazione dei terreni di coltura: prelievo ovocitario ed inseminazione degli ovociti con la tecnica FIVET; il micromanipolatore ed inseminazione degli ovociti con la tecnica ICS; controllo della fertilizzazione degli ovociti e valutazione morfologica degli embrioni umani prima del trasfer: tecnica di apertura della zona pellucida ed aspirazione dei frammenti citoplasmatici embrionali con il micromanipolatore (AHA); il futuro: le cellule staminali. La diagnosi genetica di preimpianto ( PGD ) e la diagnosi pre-concezionale (PCD) Storia della diagnosi genetica di preimpianto; diagnosi genetica di preimpianto: principi e obiettivo; campi di applicazione: malattie genetiche e cromosomiche a trasmissione ereditaria; malattie genetiche legate al sesso; tecniche utilizzate: fecondazione in vitro e biopsia embrionaria; tecniche d’analisi genetica: PCR, FISH e CGH e loro applicazioni diagnostiche. La Diagnosi genetica di preimpianto nel mondo Applicazione alternative della diagnosi genetica di reimpianto; DGP e HLA typing; DGP e predisposizione familiare al cancro; DGP e selezione del sesso. Diagnosi preconcezionale Caratteristiche generali; biopsia del primo e secondo globulo polare; tecniche d’analisi genetica, campi di applicazione e limiti; normativa. La crioconservazione nella fecondazione in vitro Caratteristiche generali della crioconservazione del liquido seminale, dell’oocita e dell’embrione: applicazione cliniche. TESTI DI RIFERIMENTO L'essenziale di biologia della cellula. Zanichelli. Alberts et al. La cellula. Un approccio molecolare. Piccin Ed. Cooper-Hausman Embriologia generale dell'uomo, Edi. Ermes Embriologia umana, Idelson-Gnocchi Embriologia umana. Morfogenesi, processi molecolari, aspetti clinici, Piccin-Nuova Libraria PROGRAMMAZIONE DEL CORSO Argomenti 1 La riproduzione: caratteristiche generali. Tappe dello sviluppo embrionale e loro significato 2 La gametogenesi: generalità 3 Spermatogenesi e spermioistogenesi Ciclo dell’epitelio seminifero 4 Oogenesi 5 La fecondazione 6 La segmentazione 7 La gastrulazione 8 Induzione embrionale, attività molecolari nella specificità regionale dell’induzione. 9 Topografia e cenni di fisio-patologia dell’apparato genitale femminile e maschile 10 La fecondazione assistita 11 La diagnosi genetica di preimpianto ( PGD ) e la diagnosi pre-concezionale (PCD) 12 La crioconservazione nella fecondazione in vitro MATERIALE DIDATTICO Il materiale didattico sarà disponibile su Studium PROVA D'ESAME MODALITÀ D'ESAME orale PROVE IN ITINERE non previste PROVE DI FINE CORSO non prevista Riferimenti testi ESEMPI DI DOMANDE E/O ESERCIZI FREQUENTI tecniche di PMA, crioconservazione, organizzazione apparato genitale maschile/femminile, determinazione del sesso, etc.