Dogma centrale della BIOLOGIA Il DNA è il materiale ereditario e non le proteine Streptococcus pneumoniae S (smooth) capsulato virulento R (rough) acapsulato non-virulento Esperimento di Griffith 1928 PRINCIPIO TRASFORMANTE IDENTIFICAZIONE DEL PRINCIPIO TRASFORMANTE O.T. Avery 1944 Ripetè l’esperimento di Griffith Batteri patogeni S con capsula uccisi dal calore + -DNasi -RNasi -Proteasi Il topo non moriva quando veniva iniettato con batteri R mescolati a batteri S precedentemente trattati con DNasi Critiche da parte della comunità scientifica Quando una cellula batterica Viene infettata da un virus…… ……Solo il DNA del virus entra Esperimento di Hershey-Chase 1952 IL DNA è IL MATERIALE EREDITARIO capsidi virali capsidi pellet Acidi nucleici Acidi nucleici • DNA(acido desossiribonucleico), RNA (acido ribonucleico) • Catene polinucleotidiche • Unità base NUCLEOTIDE: BASE AZOTATA+ZUCCHERO (ribosio nel caso dell’RNA, desossiribosio nel caso del DNA) +FOSFATO NUCLEOSIDE BASE AZOTATA+ZUCCHERO Legami fosfoanidridici DNA tower, Perth, Australia. L’informazione biologica, contenuta in ogni cellula, deve essere: *Conservata stabilmente *Duplicata con esattezza *Letta e compresa Come il nostro linguaggio è fondato su una sequenza di simboli, le lettere, così il linguaggio biologico è fondato su una sequenza di 4 simboli, i quattro tipi di basi azotate. Il significato dell’informazione dipende dalla SEQUENZA delle quattro lettere, le basi, che si susseguono nel DNA. La struttura a doppia elica del DNA consente di portare l’informazione e di autoreplicarsi: I nucleotidi si legano con legame fosfodiestereo Estremità 3’ OH Estremità 5’ P 1950 Chargaff Dati cristallografici R. Franklin e M. Wilkins Struttura ad elica con un motivo strutturale ripetuto ogni 3.4 nm e 0.34 nm DNA B Watson e Crick 1953 Elica a doppio filamento Diametro uniforme Complementarietà fra le basi Elica destrorsa Filamenti antiparalleli DENATURAZIONE Sequenze di DNA ripetitivo Nelle cellule batteriche, il DNA è non ripetuto. Fino al 60% del DNA totale negli Eucarioti è rappresentato da DNA ripetuto. • DNA ripetuto in tandem a sequenza semplice: 10-15% del genoma. Le copie multiple, lunghe da 1 fino 2000 pb, sono organizzate una in fila all’altra in blocchi. Prende il nome di DNA SATELLITE. Tali sequenze non sono normalmente trascritte (centromeri, telomeri). I blocchi sono in genere lunghi 105-107 pb. Esistono anche blocchi più corti 102-105 pb con unità lunghe 10-100 pb (DNA MINISATELLITE) oppure di 10-100 pb con unità lunghe 1-10 pb (DNA MICROSATELLITE). Diverse malattie genetiche (Sindrome X fragile, Hungtington, distrofia miotonica) sono dovute ad un eccesso di triplette all’interno di un gene che sarebbe altrimenti normale. • DNA ripetuto intersperso: 25-50% del genoma. Le unità di ripetizione non sono ripetute ma distribuite all’interno del genoma. Possono essere lunghe centinaia di migliaia di pb. Molti sono trasposoni, sequenze in grado di muoversi nel genoma capaci di lasciare copie di se stessi. Si suddividono in LINE (long interspersed nuclear element) lunghi 6000-8000 pb e SINE (short interspersed nuclear element) più corti, meno di 500 pb. CROMOSOMA BATTERICO GLI EUCARIOTI IMPACCHETTANO IL DNA NELLA CROMATINA …la collana di perle… Genoma mitocondriale 37 geni