? ? ? + L-lisina K ENDONUCLEASI (in vitro) COLORAZIONE CON BROMURO DI ETIDIO IN PRESENZA DI DNA TETRAMERO H3-H4 + DNA 2 DIMERI H2A-H2B DOPPIO ASSE DI SIMMETRIA POSIZIONE DEL TETRAMERO H3-H4 INTERAZIONE TRA DNA E OTTAMERO STABILIZZATA DA CIRCA 40 LEGAMI A IDROGENO QUASI TUTTI TRA RESIDUI AMINOACIDICI E OSSIGENO DEL LEGAME FOSFODIESTERICO ALCUNI (7) CON RESIDUI DI BASI NEL SOLCO MINORE (SU RESIDUI CHE NON SPECIFICANO LA BASE) ASPECIFICITA’ DELLE SEQUENZE DI LEGAME ISTONE H1 Due siti di legame con il DNA Le code (+) di H1 interagiscono con il core (-) di H2A Fibra da 30 nm TOPOISOMERASI SUPERAVVOLGIMENTO DEL DNA (SUPERCOILED DNA) AZIONE DELLA TOPOISOMERSI I (rilassamento del DNA superavvolto) Decatenazione SUPERAVVOLTO TOPOISOMERASI SUPERAVVOLGIMENTO DEL DNA (SUPERCOILED DNA) TOPOISOMERASI I LEGAMI TRA DNA E OTTAMERO INDUCONO LA CURVATURA DEL DNA ACCUMULO DI SUPERAVVOLGIMENTO NEGATIVO EUCROMATINA ETEROCROMATINA FIBRA DI 30 nm 50.000 – 200-000 bp SCAFFOLD CROMOSOMICO o NUCLEARE Proteine SMC (mantenimento struttura cromosomica) Topoisomerasi II La dinamicità della struttura della cromatina è strettamente legata alla espressione del DNA DNA non espresso DNA espresso “CODICE ISTONICO” Classi di enzimi che modificano gli istoni ACETILAZIONE • Histone Acetyl Transferase (HAT) • Histon Deacetylase (HDAC) I N O I I • Histon Methyl Transferase L Z I A B I C I S • Histon Demethylase F I D VER O E FOSFORILAZIONE M R • Histon Kinase METILAZIONE • Histon Phosphatase “CODICE ISTONICO” HAT HDAC NI O I Z I A L I C I B I F I S D R O E V M E R Diapositiva 29 MSOffice1 ; 31/10/2009