VON KOSSA
metodo per il calcio
04 - 170801
IVD Dispositivo medico-diagnostico in vitro
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Codice CND: W01030708
numero di test eseguibili ............. 100
tempo di realizzazione ................ 1 ora 25 minuti
validità del prodotto ..................... 1 anno
temperatura di stoccaggio ........... 2-8°C
attrezzatura complementare ....... non richiesta
Scopo previsto
Preparato per allestimento di campioni cito-istologici da esaminarsi in microscopia ottica.
Applicazione
Metodo indicato per la visualizzazione di ioni calcio su sezioni istologiche.
Principio
Alla base di questo metodo vi è una reazione di sostituzione. Il tessuto è trattato con una soluzione di
nitrato d’argento; l’argento cationico presente in soluzione si sostituisce al calcio nel sale originario
formando un sale d’argento che viene evidenziato riducendo l’argento ione ad argento metallico. La
reazione è la seguente:
CaCO3+ AgNO3 =Ag2CO3+ Ca(NO3)2
Ag2CO3+2H*= 2Ag +H2O+CO2
I sali di calcio in grado di reagire con il nitrato d’ argento sono: il carbonato, il fosfato, l’ossalato, il solfato,
l’urato, il cloruro, il solfocianuro. Poiché il calcio è presente nei tessuti dei mammiferi essenzialmente sotto
forma di calcio carbonato e fosfato il metodo è da considerarsi idoneo a rilevarne la presenza. Unica vera
fonte di errore potrebbe essere costituita dalla presenza di urati e di acido urico; questa possibilità è stata
esclusa con una preventiva solubilizzazione di questi sali in una soluzione satura di litio carbonato.
Metodo
1)
2)
3)
4)
5)
6)
Portare la sezione all’ acqua distillata.
Porre sulla sezione 10 gocce del reattivo A: lasciare agire 10 minuti.
Lavare bene in acqua distillata.
Porre sulla sezione 10 gocce del reagente B: lasciare agire all’ oscurità per 1 ora.
Lavare bene in acqua distillata.
Porre sulla sezione 10 gocce di acqua distillata ed aggiungervi 10 gocce del reagente C: lasciare
agire 5 minuti (fino ad annerimento dei sali d’ argento).
7) Lavare in acqua distillata.
8) Porre sulla sezione 10 gocce del reattivo D: lasciare agire 5 minuti.
9) Lavare in acqua distilllata.
10) Porre sulla sezione 10 gocce del reattivo E: lasciare agire 5 minuti.
11) Lavare in acqua distillata, disidratare nella serie ascendente degli alcol; xilene e balsamo
Risultati
Siti in cui erano presenti sali di calcio ................................................................................................. nero
Nuclei ................................................................................................................................................ rosso
Reattivi
A)
B)
C)
D)
E)
Litio carbonato soluzione satura ................................................................................................. 30 ml
Argento nitrato soluzione ............................................................................................................ 30 ml
Soluzione riducente .................................................................................................................... 30 ml
Sodio iposolfito soluzione ........................................................................................................... 30 ml
Carmallume Mayer ..................................................................................................................... 30 ml
Società produttrice: Bio-Optica Milano s.p.a.
Bio Optica Milano s.p.a.
via San Faustino 58 • I - 20134 Milano
tel. +39 02212713.1 • fax +39 022153000
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Avvertenze e
precauzioni
Il prodotto è destinato all’utilizzo di personale tecnico specializzato.
Il prodotto è classificato come pericoloso.
Leggere attentamente le informazioni riportate in etichetta (simboli di pericolo, frasi di rischio e di
sicurezza) e consultare sempre la scheda di sicurezza dove sono reperibili le informazioni relative ai rischi
presentati dal preparato, misure precauzionali da adottare durante l’uso e misure di primo soccorso e in
caso di rilascio accidentale. Non utilizzare in caso di contenitore primario danneggiato.
Conservazione
Conservare il preparato a 2-8°C. Mantenere i contenitori ben chiusi.
Stabilità
Dopo la prima apertura, il reattivo deve ritenersi valido fino alla data di scadenza indicata purchè
correttamente conservato.
Smaltimento
Rifiuto pericoloso; conferire ad aziende specializzate ed autorizzate, secondo legislazione vigente.
Bibliografia
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•
Armed Forces Institute of Pathology: Laboratory Methods in Histotechnology. Washington D.C.
A.F.I.P. 1994; pag. 197.
Cameron GR.The staining of calcium. J Path and Bact 1930; 33: 929-955.
McGee-Russel SM. Histochemical methods of calcium. J Histochem and Cythochem. 1958; 6: 2242.
Von Kossa J. Ueber die im Organismus kuenstlich erzeugbren Verkakung. Beitr Path Anat 1901;
29:62
Data di emissione: Novembre 2014
Società produttrice: Bio-Optica Milano s.p.a.
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Frasi di rischio relative ai reagenti classificati pericolosi
B
H319 H315 H410
Provoca grave irritazione oculare. Provoca irritazione cutanea. Molto tossico per gli organismi acquatici con effetti di lunga
P264 P273 P280 P302+P352 P332+P313
Lavare acc uratamente le mani dopo l’uso. Non disperdere nell’ambiente. Indossare guanti / indumenti protettivi / Proteggere
gli occhi / il viso. IN CASO DI CONTATTO CON LA PELLE: lavare abbondantemente con acqua e sapone. In caso di
irritazione della pelle: consultare un medico.
C
H351 H302 H319 H315 H335 H317
Sospettato di provocare il cancro. Nocivo se ingerito. Provoca grave irritazione oculare. Provoca irritazione cutanea. Può
irritare le vie respiratorie. Può provocare una reazione allergica cutanea.
P280 P301+P312 P304+P340
Indossare guanti / indumenti protettivi / Proteggere gli occhi / il viso. IN CASO DI INGESTIONE accompagnata da malessere:
contattare un CENTRO ANTIVELENI o un medico. IN CASO DI INALAZIONE: trasportare l'infortunato all’aria aperta e
mantenerlo a riposo in posizione che favorisca la respirazione.
E
H318
Provoca gravi lesioni oculari.
P280 P305+P351+P338 P310
Indossare guanti / indumenti protettivi / Proteggere gli occhi / il viso. IN CASO DI CONTATTO CON GLI OCCHI: sciacquare
accuratamente per parecchi minuti. Togliere le eventuali lenti a contatto se è agevole farlo. Continuare a sciacquare.
Contattare immediatamente un CENTRO ANTIVELENI o un medico.
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