uso previsto riassunto e spiegazione principio del test

Da usare solo con Analizzatore Sofia
USO PREVISTO
Sofia RSV FIA si avvale dell'immunofluorescenza per il rilevamento dell'antigene della
nucleoproteina del virus sinciziale respiratorio (RSV) direttamente da campioni di tamponi
rinofaringei e lavaggi/aspirati rinofaringei provenienti da pazienti sintomatici. Questo test qualitativo
è previsto come ausilio nella diagnosi rapida di infezioni acute da RSV. I risultati negativi non
escludono l'infezione da RSV e non devono essere utilizzati come sola base per il trattamento o
altre decisioni di gestione.
RIASSUNTO E SPIEGAZIONE
RSV è un agente che causa infezione virale acuta e altamente contagiosa dell'apparato respiratorio
nelle popolazioni pediatriche e negli anziani. Il virus sinciziale respiratorio è un virus a RNA a
singolo filamento.1 Nel primo anno di vita quasi la metà dei bambini viene infettata da RSV. È anche
la principale causa virale di patologie nosocomiali nei bambini già ricoverati in ospedale per altri
motivi.2 Negli Stati Uniti, si stima che il virus RSV sia responsabile da 73.400 a 126.300 ricoveri in
ospedale per bronchiolite e polmonite solo tra i bambini di età inferiore a 1 anno.3 Tra i bambini
ricoverati per infezione da RSV, si ritiene che sia la causa virale più comune di morte nei bambini di
età inferiore a 5 anni, soprattutto nella fascia di età inferiore a un anno.4 Tra i bambini ricoverati in
ospedale per infezione da RSV, il tasso di mortalità è stimato tra 0,3%-1,0%3, 5 e tra 2,5%-4,0% nei
bambini affetti da patologia cardiaca o polmonare latente.3, 5, 6
PRINCIPIO DEL TEST
Il test Sofia RSV FIA impiega la tecnologia a immunofluorescenza utilizzata con l'analizzatore Sofia
per il rilevamento rapido degli antigeni RSV. Il test Sofia RSV FIA prevede la disgregazione degli
antigeni virali RSV. Il campione del paziente viene inserito nella provetta del reagente e durante tale
periodo le particelle del virus nel campione vengono disgregate, esponendo le nucleoproteine virali
interne. Al termine della disgregazione, il campione viene posto nel pozzetto per campioni della
cassetta. Dal pozzetto, il campione migra attraverso una striscia di test che contiene numerosi
ambienti chimici particolari. Se presenti, gli antigeni virali RSV verranno intrappolati in una posizione
specifica.
Nota: in base alla scelta dell'utente, la cassetta viene inserita all'interno dell'analizzatore Sofia per
uno sviluppo automatico temporizzato (Modalità Walk Away) o posizionata sul banco o tavolo per
uno sviluppo manuale temporizzato, quindi inserita nell'analizzatore Sofia per la scansione
(Modalità Read Now).
L'analizzatore Sofia eseguirà la scansione della striscia di test e misurerà il segnale fluorescente
elaborando i risultati tramite algoritmi specifici. L'analizzatore Sofia visualizzerà il risultato del test
(positivo, negativo o non valido) sullo schermo. I risultati possono anche essere stampati
automaticamente sulla stampante integrata, se questa opzione è selezionata.
Sofia RSV FIA
Pagina 1 di 20
REAGENTI E MATERIALI FORNITI
Kit per 25 test
 Cassette in confezione individuale (25): anticorpi monoclonali di topo anti-RSV
 Provette di reagente (25): tampone liofilizzato con detergenti e sostanze riducenti
 Soluzioni di reagente (25): ampolle con soluzione salina
 Tamponi rinofaringei sterili (25)
 Pipette grandi, rosa, a volume fisso (25)
 Pipette piccole, trasparenti a volume fisso (25)
 Tampone di controllo positivo RSV (1): tampone rivestito con antigene RSV non infettivo
 Tampone di controllo negativo (1): tampone rivestito con antigene di streptococco C non
infettivo, disattivato mediante calore
 Foglietto illustrativo (1)
 Guida rapida di riferimento (1)
 Scheda CQ (sulla scatola del kit)
 Traduzioni su CD-ROM (1)
 Carta per stampante (1)
MATERIALI NON FORNITI NEL KIT
 Timer o orologio per l'uso in modalità Read-Now
 Analizzatore Sofia
 Soluzione salina sterile per il prelievo di campioni da aspirato o lavaggio rinofaringeo
 Attrezzatura utilizzata per il prelievo di aspirato o lavaggio rinofaringeo
 Cassetta di calibrazione (in dotazione con l'analizzatore Sofia)
AVVERTENZE E PRECAUZIONI
 Per uso diagnostico in vitro
 Non usare oltre la data di scadenza indicata all’esterno della confezione.
 Attenersi alle dovute precauzioni durante il prelievo, la conservazione, il trattamento e lo
smaltimento di campioni clinici e contenuti di kit usati.7
 Si raccomanda l'uso di guanti di nitrile o lattice (o equivalenti) per maneggiare i campioni dei
pazienti.7
 Smaltire i contenitori e i contenuti usati in conformità con la normativa nazionale e locale in
vigore.
 Non riutilizzare la cassetta, le pipette a volume fisso, le provette dei reagenti, le soluzioni o i
tamponi di controllo usati.
 L'utente deve aprire il sacchetto laminato della cassetta di test, esponendola all'ambiente, solo
al momento dell'uso.
 Smaltire e non utilizzare cassette o materiale danneggiati.
 La soluzione di reagente contiene una soluzione salina. Se la soluzione entra in contatto con la
pelle o gli occhi, lavare con abbondante acqua corrente.
 Per ottenere risultati accurati, seguire le istruzioni del foglietto illustrativo.
Sofia RSV FIA
Pagina 2 di 20
 La cassetta di calibrazione deve essere conservata nel sacchetto laminato tra un uso e l'altro.
 Il prelievo, la conservazione e il trasporto non corretti o inadeguati dei campioni può causare
falsi risultati di test.
 Le procedure per il prelievo e il trattamento dei campioni necessitano di addestramento e
istruzioni specifiche.
 Usare i terreni di trasporto virali raccomandati nel Foglietto illustrativo.
 Quando si preleva un campione di tampone rinofaringeo, utilizzare il tampone rinofaringeo
contenuto nel kit.
 Utilizzare la pipetta a volume fisso appropriata conformemente alle procedure del test:

la pipetta piccola, trasparente a volume fisso deve essere utilizzata SOLO per aggiungere
il campione del paziente alla cassetta di test;

la pipetta grande, rosa a volume fisso deve essere usata SOLO con la procedura di test
tramite aspirato/lavaggio o terreni di trasporto virali durante il trasferimento del campione del
paziente dalla vaschetta di prelievo alla provetta di reagente.
 Non scrivere sul codice a barre della cassetta. Esso viene utilizzato dall'analizzatore Sofia per
identificare il tipo di test da eseguire e la singola cassetta, in modo da evitare una seconda
lettura della cassetta da parte dello stesso analizzatore Sofia.
 Le cassette non devono essere sottoposte a più di una scansione. Il codice a barre sulla
cassetta contiene un identificatore univoco che impedisce all'analizzatore Sofia di eseguire una
seconda lettura su una cassetta precedentemente sottoposta a scansione. Se una cassetta
viene sottoposta a più di una scansione, verrà visualizzato un messaggio di errore.
 Dato che il reagente di rilevamento è un composto fluorescente, non si otterranno risultati visibili
sulla striscia di test. Per l'interpretazione dei risultati è necessario utilizzare l'analizzatore Sofia.
CONSERVAZIONE E STABILITÀ DEL KIT
Conservare il kit a temperatura ambiente 15–30 °C (59–86 °F), al riparo dai raggi diretti del sole. Il
contenuto del kit è stabile fino alla data di scadenza indicata sulla scatola esterna. Non congelare.
CONTROLLO DI QUALITÀ
Esistono tre tipi di controllo di qualità per l'analizzatore Sofia e la cassetta. Procedura di
controllo calibrazione per l'analizzatore Sofia, caratteristiche di controllo procedurale
incorporate e controlli esterni.
Procedura di controllo calibrazione dell'analizzatore Sofia
Nota: questa è una procedura di “Controllo calibrazione”.
La procedura di controllo calibrazione deve essere eseguita ogni trenta (30) giorni. L'analizzatore
Sofia può essere impostato per ricordare all'utente di completare la procedura di controllo
calibrazione.
Il Controllo calibrazione è una funzione necessaria che controlla il gruppo ottico e i sistemi di calcolo
dell'analizzatore Sofia con l'ausilio di una cassetta di calibrazione specifica. Questa cassetta di
calibrazione viene fornita con il pacchetto di installazione Sofia. Fare riferimento al manuale per
l'utente dell'analizzatore Sofia per dettagli relativi alla procedura di controllo calibrazione.
Importante: assicurarsi che, dopo ogni utilizzo, la cassetta di calibrazione sia tenuta sigillata
all'interno dell'apposito sacchetto fornito per proteggerla dall'esposizione alla luce.
Sofia RSV FIA
Pagina 3 di 20
1. Per verificare la calibrazione dell'analizzatore Sofia, selezionare
“Calibrazione” dal Menu principale.
2. Seguire i messaggi, inserire la cassetta di calibrazione nell'analizzatore
Sofia e chiudere il cassetto. L'analizzatore esegue automaticamente il
controllo di calibrazione senza l'input dell'utente.
L'analizzatore Sofia indica quando il controllo di calibrazione è completato. Selezionare OK per
ritornare al Menu principale.
NOTA: se il controllo della calibrazione non viene completato con successo, informare il
supervisore in sede o contattare l'assistenza tecnica Quidel dalle 7:00 alle 17:00, fuso orario del
Pacifico al numero (800) 874-1517 (all'interno degli Stati Uniti); (858) 552-1100 (fuori dagli Stati
Uniti); Fax: (858) 455-4960; [email protected] (assistenza clienti); [email protected]
(assistenza tecnica) oppure contattare il distributore locale.
Controlli procedurali incorporati
Il Sofia RSV FIA contiene una funzione di controllo procedurale incorporata. Ogni volta che
l'analizzatore Sofia esegue un test, l'area del controllo procedurale viene sottoposta a scansione da
parte dell'analizzatore che visualizza il risultato sullo schermo.
Per il controllo giornaliero, il produttore raccomanda di documentare i risultati di questi controlli
procedurali incorporati per il primo campione analizzato ogni giorno. Questa documentazione viene
registrata automaticamente nell'analizzatore con ciascun risultato di test.
Un risultato valido ottenuto con il controllo procedurale dimostra che il test è fluito correttamente e
che l'integrità funzionale della cassetta è stata mantenuta. Questo controllo procedurale viene
interpretato dall'analizzatore Sofia dopo che la cassetta è stata sviluppata per quindici (15)
Sofia RSV FIA
Pagina 4 di 20
minuti. Se il test non è fluito correttamente, l'analizzatore Sofia indicherà che il risultato non
è valido. In questo caso, riesaminare la procedura e ripetere il testo con un nuovo campione del
paziente e una nuova cassetta di test.
Esempio: questa schermata mostra un
risultato non valido.
Controllo di qualità esterno
Per verificare la performance dei reagenti e la correttezza della procedura di dosaggio, è possibile
utilizzare anche dei controlli esterni.
Quidel raccomanda che i controlli esterni positivi e negativi vengano eseguiti:
una volta per ciascun operatore non addestrato
una volta per ciascuna nuova spedizione di kit – sempre che ogni lotto diverso ricevuto nella
spedizione sia testato
come ritenuto necessario dalle procedure interne di controllo della qualità e secondo la
normativa vigente o i requisiti di accreditamento.
L'utente deve prima selezionare Esegui CQ nel Menu principale dell'analizzatore Sofia e, quando
richiesto, eseguire la scansione della scheda CQ (sulla scatola del kit). Questa scheda fornisce
informazioni specifiche sul lotto del kit, compreso il numero di lotto e la data di scadenza.
L'analizzatore inviterà l'utente a selezionare la modalità desiderata (Walk Away o Read Now) e ad
eseguire i tamponi di controllo esterni.
I tamponi per controlli positivi e negativi esterni vengono forniti nel kit e devono essere testati
secondo la procedura di test indicata nel foglietto illustrativo o nella presente Guida rapida di
riferimento.
Al termine del test di CQ, ogni risultato verrà visualizzato come “Passed” (Riuscito) o “Failed” (Non
riuscito) per il controllo positivo e il controllo negativo.
Non eseguire test su pazienti o riportare risultati di test se i test di CQ non producono i risultati
previsti. Se i controlli esterni forniscono il risultato "non riuscito", ripetere il test o contattare
l'assistenza tecnica Quidel prima di testare i campioni del paziente.
È possibile ottenere a parte altri tamponi di controllo esterni contattando l'assistenza clienti di Quidel
al numero (800) 874-1517 (negli Stati Uniti) o (858) 552-1100.
Sofia RSV FIA
Pagina 5 di 20
PRELIEVO E TRATTAMENTO DEI CAMPIONI
PRELIEVO DEI CAMPIONI
Campione di tampone rinofaringeo
Usare il tampone rinofaringeo fornito nel kit.
Per prelevare un campione con il tampone rinofaringeo, inserire con cura il tampone nella narice
che all'esame visivo presenta la secrezione più abbondante. Tenere il tampone vicino alla parete
del setto del naso premendo delicatamente il tampone nella parte posteriore della rinofaringe. Far
ruotare il tampone diverse volte, quindi estrarlo dalla rinofaringe.
Campione di aspirato/lavaggio rinofaringeo
Per prelevare campioni di aspirato/lavaggio rinofaringeo, seguire il protocollo previsto dalla propria
struttura. Usare la minima quantità di soluzione salina consentita dalla procedura. In
alternativa, se la propria struttura non prevede un protocollo, prendere in considerazione le seguenti
procedure utilizzate dai medici.
Per prelevare un campione di aspirato rinofaringeo: instillare alcune gocce di soluzione salina
sterile nella narice desiderata. Inserire il tubo in plastica flessibile lungo la parete della narice,
parallelamente al palato. Una volta raggiunta la rinofaringe, aspirare le secrezioni mentre si rimuove
il tubo. Ripetere la procedura nell'altra narice qualora le secrezioni prelevate dalla prima narice
risultino inadeguate.
Per prelevare un campione tramite lavaggio rinofaringeo: il bambino deve essere seduto sulle
ginocchia del genitore, con il viso rivolto in avanti e la testa appoggiata al petto del genitore.
Riempire la siringa o il bulbo di aspirazione con il volume minimo di soluzione salina richiesto in
base alle dimensioni e all'età del soggetto. Instillare la soluzione salina in una narice tenendo la
testa inclinata all'indietro. Aspirare il campione di lavaggio nella siringa o nel bulbo. Il volume
approssimativo del campione di lavaggio aspirato sarà circa 1 cc.
In alternativa, dopo l'instillazione della soluzione salina, far inclinare la testa in avanti e lasciare
uscire la soluzione salina in una vaschetta di raccolta pulita.
TRASPORTO E CONSERVAZIONE DEI CAMPIONI
I campioni devono essere testati nel più breve tempo possibile dopo il prelievo. Tuttavia, se i
campioni devono essere trasportati, è opportuno eseguire una diluizione minima dei campioni, in
quanto la diluizione può diminuire la sensibilità del test. L'esecuzione ottimale del test rapido ne
richiede un (1) millilitro o meno. I seguenti terreni di trasporto virali elencati in Tabella 1 sono
compatibili con Sofia RSV FIA:
Tabella 1
Terreni di trasporto virali raccomandati
Terreni di trasporto virali
Terreni di trasporto universali Copan
Soluzione salina bilanciata di Hank
Terreno di trasporto liquido Amies
M4
M4-RT
M6
Terreno di trasporto liquido Stuarts
modificato
Sofia RSV FIA
Condizioni di conservazione consigliate
2-8 °C
25 °C
24 ore
24 ore
24 ore
24 ore
24 ore
24 ore
24 ore
24 ore
24 ore
24 ore
24 ore
24 ore
24 ore
24 ore
Pagina 6 di 20
Terreni di trasporto virali
Soluzione salina
Starplex Multitrans
Soluzione salina tamponata con
fosfato
Condizioni di conservazione consigliate
2-8 °C
25 °C
24 ore
24 ore
24 ore
24 ore
24 ore
24 ore
PROCEDURA DI TEST
Tutti i campioni clinici devono essere a temperatura ambiente prima di iniziare il dosaggio.
Data di scadenza: prima dell'uso, controllare la data di scadenza riportata sulla confezione di
ciascun test o all'esterno della scatola. Non usare i test oltre la data di scadenza indicata
sull'etichetta.
Procedura di test con tampone rinofaringeo
1. Verificare che l'analizzatore Sofia sia impostato alla Modalità Analizzatore
desiderata: Walk Away o Read Now. Per ulteriori informazioni,
consultare la sezione “Utilizzo dell'analizzatore Sofia.”
2. Versare tutta la soluzione di reagente nella provetta del reagente.
Ruotare delicatamente la provetta del reagente per
dissolverne il contenuto.
3. Inserire il tampone con il campione prelevato dal paziente nella provetta
del reagente. Far ruotare il tampone almeno tre (3) volte premendone la
testa contro il fondo e la parte laterale della provetta del reagente.
Lasciare il tampone nella provetta del reagente per un (1) minuto.
4. Far ruotare la testa del tampone contro la parte interna della provetta del
reagente mentre lo si rimuove. Gettare il tampone usato nell'apposito
contenitore per rifiuti biologicamente pericolosi.
Sofia RSV FIA
Pagina 7 di 20
5. Riempire la pipetta piccola e trasparente a volume fisso fornita, con il
campione del paziente proveniente dalla provetta del reagente.
Per riempire la pipetta a volume fisso con il campione del paziente:
a) schiacciare FORTE il bulbo superiore;
b) continuando a schiacciare, inserire la punta della pipetta nel
campione del paziente;
c) lasciando la punta della pipetta immersa nel campione del paziente,
rilasciare il bulbo per riempire la pipetta.
6. Schiacciare forte il bulbo superiore per vuotare il contenuto della pipetta
piccola e trasparente a volume fisso nel pozzetto per campioni della
cassetta. È normale che nel bulbo rimanga una quantità di liquido in
eccesso.
NOTA: la pipetta a volume fisso è concepita per raccogliere e versare la
corretta quantità di campione liquido. Gettare la pipetta nell'apposito
contenitore per rifiuti biologicamente pericolosi.
7. Per completare il test, passare alla sezione successiva “Utilizzo
dell'analizzatore Sofia”.
Procedura di test per aspirati/lavaggi rinofaringei o campioni in terreni di trasporto
per colture virali
1. Verificare che l'analizzatore Sofia sia impostato alla Modalità Analizzatore
desiderata: Walk Away o Read Now. Per ulteriori informazioni,
consultare la sezione “Utilizzo dell'analizzatore Sofia.”
2. Versare tutta la soluzione di reagente nella provetta del reagente.
Ruotare delicatamente la provetta del reagente per
dissolverne il contenuto.
Sofia RSV FIA
Pagina 8 di 20
3. Riempire la pipetta grande, rosa a volume fisso fornita, con il campione
liquido del paziente proveniente dalla vaschetta di raccolta.
Per riempire la pipetta a volume fisso con il campione:
a) schiacciare FORTE il bulbo superiore;
b) continuando a schiacciare, inserire la punta della pipetta nel
campione liquido;
c) lasciando la punta della pipetta immersa nel campione liquido,
rilasciare il bulbo per riempire la pipetta.
4. Schiacciare forte il bulbo superiore per vuotare il contenuto della pipetta
grande, rosa a volume fisso nella provetta del reagente. È normale che
nel bulbo rimanga una quantità di liquido in eccesso. Ruotare
delicatamente la provetta del reagente per miscelare il contenuto.
NOTA: la pipetta a volume fisso è concepita per raccogliere e
versare la corretta quantità di campione liquido. Gettare la
pipetta nell'apposito contenitore per rifiuti biologicamente
pericolosi.
5. Riempire la pipetta piccola, trasparente a volume fisso con il campione
del paziente proveniente dalla provetta del reagente.
6. Schiacciare forte il bulbo superiore per vuotare il contenuto della pipetta
piccola e trasparente a volume fisso nel pozzetto per campioni della
cassetta. È normale che nel bulbo rimanga una quantità di liquido in
eccesso. Gettare la pipetta nell'apposito contenitore per rifiuti
biologicamente pericolosi.
7. Per completare il test, passare alla sezione successiva “Utilizzo
dell'analizzatore Sofia”.
Sofia RSV FIA
Pagina 9 di 20
UTILIZZO DELL'ANALIZZATORE SOFIA
Modalità Walk Away/Read Now
Fare riferimento al manuale per l'utente dell'analizzatore Sofia per le istruzioni di
funzionamento.
L'analizzatore può essere impostato in due diverse modalità (Walk Away e Read Now). Le
procedure per ciascuna modalità sono descritte qui sotto.
Modalità Walk Away
In modalità Walk Away l'utente inserisce immediatamente la cassetta nell'analizzatore. Quindi
ritorna dopo quindici (15) minuti per ottenere il risultato del test. In questa modalità, l'analizzatore
stabilirà in modo automatico il momento per lo sviluppo del test, prima di eseguire la scansione e la
visualizzazione del risultato del test.
Modalità Read Now
Consentire al test di svilupparsi per quindici (15) minuti interi PRIMA prima di inserirlo
nell'analizzatore.
L'utente deve prima di tutto posizionare la cassetta sul banco o sul tavolo per quindici (15) minuti
(fuori dall'analizzatore) e programmare la fase di sviluppo in modo manuale. Quindi, l'utente
inserisce la cassetta nell'analizzatore. In modalità Read Now, l'analizzatore eseguirà la scansione e
visualizzerà il risultato del test entro un (1) minuto.
Consigli per eseguire test su lotti
In base al carico di lavoro, sono disponibili diverse opzioni per facilitare l'esecuzione di test su lotti.
L'utente può aggiungere la soluzione di reagente ad una o più provette di reagente, chiuderle e
conservarle sul banco a temperatura ambiente per un massimo di 12 ore senza perdita di attività
prima di aggiungere i campioni. In alternativa, dopo l'aggiunta della soluzione di reagente, l'utente
può elaborare i campioni su tampone o liquidi nella provetta di reagente, quindi dopo aver rimosso il
tampone (se applicabile), chiudere le provette e lasciarle a temperatura ambiente per un massimo
di 12 ore senza perdita di attività prima di eseguire il test.
È particolarmente importante che l'utente non apra il sacchetto laminato esponendo la cassetta
all'ambiente fino al momento dell'uso immediato.
Sofia RSV FIA
Pagina 10 di 20
Avvia test
1. Immettere l'ID utente utilizzando lo scanner di codici a barre oppure inserire manualmente i dati
con il tastierino.
NOTA: se per errore si esegue la scansione del codice a barre sbagliato, usare i tasti freccia
dell'analizzatore Sofia per evidenziare nuovamente il campo. Quindi ripetere la scansione del
codice a barre corretto e quello precedente verrà sovrascritto con il codice a barre corretto.
2. Immettere l'ID Paz o il N. Ordine utilizzando lo scanner di codici a barre oppure inserire
manualmente i dati con il tastierino.
3. Premere Avvia test e il cassetto dell'analizzatore Sofia si aprirà automaticamente.
Sofia RSV FIA
Pagina 11 di 20
4. Verificare che sia stata selezionata la corretta modalità di sviluppo, Walk Away o Read Now.
Inserire la cassetta del test paziente preparata nel cassetto dell'analizzatore Sofia e chiuderlo.
5. L'analizzatore si avvierà automaticamente e visualizzerà l'avanzamento, come mostrato
nell'esempio seguente. Nella modalità Walk Away, i risultati del test verranno visualizzati sullo
schermo entro circa quindici (15) minuti. Nella modalità Read Now, i risultati del test verranno
visualizzati sullo schermo entro un (1) minuto. Vedere la sezione Interpretazione dei risultati.
Esempio: questo display mostra
che il test in modalità Walk Away ha
12 minuti, 13 secondi restanti.
L'analizzatore Sofia legge e
visualizza i risultati in circa
15 minuti.
INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI
Una volta completato il test, i risultati verranno visualizzati sullo schermo dell'analizzatore Sofia. I
risultati possono essere stampati automaticamente sulla stampante integrata, se questa opzione è
selezionata. Le linee di test fluorescenti non saranno mai visibili ad occhio nudo.
Lo schermo dell'analizzatore Sofia visualizzerà i risultati del controllo procedurale come “valido o
non valido” e fornirà un risultato positivo o negativo per RSV. Se il controllo è “non valido”, ripetere il
test con un nuovo campione del paziente e una nuova cassetta.
Sofia RSV FIA
Pagina 12 di 20
Risultati positivi
Esempio: questa schermata mostra un
risultato positivo valido per RSV.
NOTA: un risultato positivo non esclude coinfezioni con altri patogeni.
Risultati negativi
Esempio: questa schermata mostra un
risultato negativo valido per RSV.
NOTA: un risultato negativo non esclude un'infezione virale da RSV. I risultati negativi devono
essere confermati tramite coltura virale.
Risultati non validi
Esempio: questa schermata mostra un
risultato non valido.
Risultato non valido: se il test non è valido, è necessario ripetere il test con un nuovo campione
del paziente e una nuova cassetta di test.
Sofia RSV FIA
Pagina 13 di 20
LIMITAZIONI
 Il contenuto del kit deve essere utilizzato per il rilevamento qualitativo dell'antigene RSV da
campioni su tampone rinofaringeo e aspirato/lavaggio rinofaringeo.
 Questo test rileva il virus RSV sia vitale (vivo) che non vitale. Le prestazioni del test dipendono
dalla quantità di virus (antigene) nel campione e possono essere correlate oppure no ai risultati
della coltura virale ottenuti sullo stesso campione.
 Un risultato di test negativo può verificarsi se il livello di antigeni in un campione è inferiore al
limite di rilevamento del test o se il campione è stato prelevato o trasportato in modo
inadeguato.
 Se la procedura del test non è seguita come indicato, il rendimento del test può essere
compromesso e/o il risultato può essere non valido.
 I risultati del test devono essere valutati facendo riferimento ad altri dati clinici a disposizione del
medico.
 Risultati di test positivi non escludono coinfezioni con altri patogeni.
 I risultati di test negativi non escludono altre infezioni batteriche o virali non RSV.
 I bambini hanno la tendenza a ospitare i virus in maniera più abbondante e per periodi più lunghi
rispetto agli adulti. Pertanto, il test di campioni provenienti da adulti dimostra spesso una
sensibilità inferiore rispetto a quella ottenuta dal test di campioni pediatrici.
 I valori predittivi positivi e negativi dipendono in gran parte dalla prevalenza. I risultati di test falsi
negativi sono più probabili durante l'attività di punta, quando la prevalenza della malattia è
elevata. I risultati falsi positivi sono più probabili durante i periodi di bassa attività RSV quando la
prevalenza della malattia è da moderata a bassa.
 Gli anticorpi monoclonali possono non rilevare, o rilevare con una sensibilità inferiore, i virus
RSV che hanno subito cambiamenti minori degli amminoacidi nella regione degli epitopi target.
 I campioni contaminati con sangue intero >1% v/v possono interferire nell'interpretazione del
test. Non utilizzare i campioni che appaiono visivamente sanguinanti.
 Le prestazioni di questo test non sono state valutate su pazienti che non presentano segni e
sintomi di infezione respiratoria.
VALORI PREVISTI
Il tasso di positività osservato nel test RSV varia in base a fattori quali metodo di prelievo del
campione, sistema di gestione/trasporto adottato, metodo di rilevamento utilizzato, periodo
dell'anno, età del paziente e prevalenza della malattia. La prevalenza osservata con coltura durante
lo studio clinico era di 7 % (81/1142)
CARATTERISTICHE DI RENDIMENTO
Rendimento di Sofia RSV FIA rispetto alla coltura cellulare
Il rendimento di Sofia RSV FIA è stato confrontato con i metodi della coltura cellulare virale e della
DFA in uno studio clinico multicentrico condotto tra febbraio e marzo 2012 negli Stati Uniti. Questo
studio è stato condotto da personale sanitario in 7 siti distinti in svariate regioni geografiche
all'interno degli Stati Uniti. In questo studio multicentrico, point-of-care (POC), sono stati prelevati
due (2) tamponi rinofaringei o campioni di aspirato/lavaggio rinofaringei da ciascuno dei 1142
pazienti. Un paio di campioni di tampone rinofaringeo è stato fornito 412 pazienti ed un campione di
aspirato/lavaggio rinofaringeo è stato fornito da 730 pazienti. Tutti i campioni clinici sono stati
prelevati da pazienti sintomatici (18 anni di età o meno): 56% erano maschi e 44% erano femmine.
L'analisi in loco di un tampone rinofaringeo o di una porzione di campione di aspirato/lavaggio
rinofaringeo è stata eseguita da personale sanitario nell'ambulatorio del medico o in ospedale con
Sofia RSV FIA
Pagina 14 di 20
Sofia RSV FIA. I campioni sono stati testati subito dopo il prelievo. Il campione rimasto è stato
collocato nei terreni di trasporto virale per la coltura. Le coppie di campioni di tampone sono state
randomizzate in base all'ordine di analisi su Sofia RSV FIA rispetto alla coltura. La coltura cellulare
virale è stata eseguita presso un laboratorio locale del centro di test oppure i campioni sono stati
trasportati freddi su pacchi di ghiaccio, non congelati, per la consegna espresso a un laboratorio
centrale per la coltura entro 48 ore. I risultati sono elencati nelle Tabelle 2 e 3.
Tabella 2
Risultati del tampone rinofaringeo Sofia RSV FIA rispetto alla coltura
Coltura
Pos.
Neg.
Sofia Pos
22
14
Sofia Neg
0
376
Sens. = 22/22 = 100%
(95% I.C. 82-100%)
Spec. = 376/390 = 96%
(95% I.C. 94-98%)
PPV = 61%
NPV = 100%
Tabella 3
Risultati di aspirato/lavaggio rinofaringeo Sofia RSV FIA rispetto alla coltura
Coltura
Pos.
Neg.
Sofia Pos
54
15
Sofia Neg
5
656
Sens. = 54/59 = 92%
(95% I.C. 81-97%)
Spec. = 656/671 = 98%
(95% I.C. 96-99%)
PPV = 78%
NPV = 99%
Rendimento di Sofia RSV FIA rispetto alla coltura cellulare quando i campioni per i
test sono collocati in terreni di trasporto virali
Il rendimento di Sofia RSV FIA, quando i campioni per i test sono collocati in terreni di trasporto
virali, è stato confrontato con i metodi della coltura cellulare virale seguiti dal metodo della DFA
nello stesso studio clinico multicentrico, condotto tra febbraio e marzo 2012 negli Stati Uniti. Questa
fase dello studio è stata condotta da personale di laboratorio in due laboratori diversi negli Stati
Uniti. Un campione di tampone rinofaringeo oppure un campione da aspirato o lavaggio rinofaringeo
è stato collocato in un terreno di trasporto universale (Copan) da 1,5 ml e quindi trasportato freddo
su pacchi di ghiaccio, non congelati, per la consegna espresso al laboratorio. Il test Sofia RSV FIA è
stato eseguito su una parte di ciascun campione e la coltura è stata eseguita utilizzando la parte
rimanente dello stesso campione nel terreno di trasporto virale. I campioni di tampone rinofaringeo
sono stati forniti da 413 pazienti, mentre i campioni di aspirato/lavaggio rinofaringeo sono stati forniti
da 738 pazienti. I risultati sono elencati nelle Tabelle 4 e 5.
Tabella 4
Risultati del tampone rinofaringeo Sofia RSV FIA rispetto alla coltura
Coltura
Pos.
Neg.
Sofia Pos
22
11
Sofia Neg
0
380
Sens. = 22/22 = 100%
(95% I.C. 82-100%)
Camp. = 380/391 = 97%
(95% I.C. 95-98%)
PPV = 67%
NPV = 100%
Sofia RSV FIA
Pagina 15 di 20
Tabella 5
Risultati di aspirato/lavaggio rinofaringeo Sofia RSV FIA rispetto alla coltura
Coltura
Pos.
Neg.
Sofia Pos
58
21
Sofia Neg
2
657
Sens. = 58/60 = 97%
(95% I.C. 88-100%)
Camp. = 657/678 = 97%
(95% I.C. 95-98%)
PPV = 73%
NPV = 100%
Limite di rilevamento e reattività analitica
Il limite di rilevamento (LoD) del test Sofia RSV FIA è stato determinato usando un totale di quattro
(4) ceppi di RSV, due (2) isolati di RSV A e due (2) isolati di RSV B (Tabella 6).
Tabella 6
Limite di rilevamento con isolati umani di RSV A e B
Livello minimo
rilevabile
(TCID50/mL)
Ceppo virale
RSV A-2
RSV A Long
RSV B Washington/18537/62
RSV B CH93-18(18)
2073
172
27
225
TCID50/mL=dose infettante coltura tissutale 50%. I livelli
TCID50 sono stati determinati mediante il metodo di ReedMuench.
La reattività analitica è stata dimostrata usando due (2) ceppi aggiuntivi di RSV B: West Virginia
ceppo /14617/85 e RSV 9320. Ogni ceppo ha prodotto risultati positivi corrispondenti o superiori a
142 TCID50/mL (WV) e 7 TCID50/mL (9320).
Specificità analitica
Reattività crociata
Il test Sofia RSV FIA è stato valutato con un totale di 32 microrganismi batterici e fungini e 42 isolati
virali non RSV. Sono stati valutati isolati batterici e fungini ad una concentrazione di 1.76 x1041.76x106 cfu/mL. Isolati virali sono stati valutati a una concentrazione di 2.00x104-1.76x107
TCID50/mL. Nessuno degli organismi o virus non RSV alle concentrazioni elencate qui di seguito
nella Tabella 7 ha mostrato segni di reattività crociata nel dosaggio.Anche il flusso del campione e
l'aspetto della linea di controllo non hanno subito variazioni.
Tabella 7
Specificità analitica e reattività crociata
Organismo/virus non RSV
Acinetobacter baumannii
Bacteroides fragilis
Bordetella pertussis
Sofia RSV FIA
Concentrazione*
RSV
6
Negativo
Negativo
Negativo
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
Pagina 16 di 20
Organismo/virus non RSV
Candida albicans (lievito)
Corynebacterium diptheriae
Escherichia coli
Haemophilus influenzae
Klebsiella pneumoniae
Lactobacillus plantarum
Concentrazione*
6
RSV
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Legionella pneumophila
Moraxella catarrhalis
Mycobacterium avium
Mycobacterium intracellulare
Mycobacterium tuberculosis
Mycoplasma pneumoniae
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
4
1.76x10 cfu/mL
6
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Neisseria meningitides
Neisseria mucosa
Neisseria sicca
Neisseria subflava
Pseudomonas aeruginosa
Serratia marcescens
Staphylococcus aureus
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Staphylococcus aureus (Cowen 1)
Staphylococcus epidermidis
Streptococcus mutans
Streptococcus pneumoniae
Streptococcus pyogenes
Streptococcus sanguinis
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
6
Adenovirus 3
Adenovirus 4
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
6
1.76x10 cfu/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
4
2.00x10 TCID50/mL
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Adenovirus 5
Adenovirus 7A
Adenovirus 11
Coronavirus OC43
Coronavirus 229E
Coxsackievirus B5 (Faulkner)
Citomegalovirus AD-169
6.80x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Citomegalovirus Towne
Echovirus tipo 3
Herpes Simplex virus 1
Herpes Simplex virus 2
Metapneumovirus umano A1
Metapneumovirus umano A2
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Metapneumovirus umano B1
Metapneumovirus umano B2
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
Negativo
Negativo
Streptococcus sp. Gruppo B
Streptococcus sp. Gruppo C
Streptococcus sp. Gruppo F
Streptococcus sp. Gruppo G
Sofia RSV FIA
Pagina 17 di 20
Organismo/virus non RSV
Concentrazione*
Metapneumovirus umano VR-0300181 UIHC
1.76x10 TCID50/mL
Influenza A H1N1 (5 ceppi)
1.76x10 TCID50/mL
Influenza A H3N2
Influenza B Hong Kong
Influenza B Panama
Influenza C/Taylor/1233/47
Morbillo (Edmonston)
Parotite (Enders)
Parainfluenza virus 1
Parainfluenza virus 2
RSV
Negativo
5
5
Negativo
5
1.76x10 TCID50/mL
Negativo
1.76x10 TCID50/mL
7
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Parainfluenza virus 3
Parainfluenza virus 4A
Parainfluenza virus 4B
Rhinovirus tipo 1B
Rhinovirus tipo 2
Rhinovirus tipo 3
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Rhinovirus tipo 7
Rhinovirus tipo 15
Rhinovirus tipo 18
Rhinovirus tipo 37
Varicella Zoster Virus
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
5
1.76x10 TCID50/mL
4
2.69x10 TCID50/mL
5
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
*I livelli di batteri sono stati determinati limitando la diluizione, la coltura batterica e la conta
delle colonie per ottenere un valore espresso in cfu/mL (cfu=unità formante colonia). Le
concentrazioni di virus sono state determinate da metodi di virologia standard, ReedMuench.
Sostanze interferenti
Sono stati valutati campioni di sangue intero, mucina e diversi prodotti farmaceutici da banco (OTC)
e prodotti chimici comuni, con risultati negativi per quanto riguarda le interferenze con il test Sofia
RSV FIA ai livelli analizzati (Tabella 8).
Tabella 8
Sostanze non interferenti
Sostanza [ingrediente attivo]
Sangue intero
Sofia RSV FIA
Concentrazione
1%
Mucina
Collutorio Listerine Cool Mint (eucaliptolo,
mentolo, metilsalicilato e timolo)
Collutorio Crest Pro-Health (cetilpiridinio
cloruro)
7 mg/mL
Collutorio Scope (cetilpiridinio cloruro)
CVS Mentolo (mentolo)
Halls Mentholyptus (mentolo)
Ricola (mentolo)
Vicks Sinex nasale spray (ossimetazolina
HCl)
44%
26%
26%
26%
44%
44%
18%
Pagina 18 di 20
Sostanza [ingrediente attivo]
Concentrazione
Spray nasale 4 Way Fast Acting
(fenilefrina HCl)
18%
Spray nasale Fast Acting Equate
(fenilefrina HCl)
18%
Acetaminofene
Acido acetilsalicilico
Clorfeniramina
Destrometorfano
Difenidramina
Guaiacolo
18 mg/mL
18 mg/mL
3 mg/mL
3 mg/mL
3 mg/mL
35 mg/mL
Fenilefrina
Rimantadina
Albuterolo
9 mg/mL
88 µg/mL
35 mg/mL
ASSISTENZA
In caso di domande sull'uso di questo prodotto o per segnalare un problema relativo al sistema di
test, contattare l'assistenza tecnica di Quidel al numero (800) 874-1517 (numero verde negli Stati
Uniti) o (858) 552-1100, dal lunedì al venerdì, dalle 7:00 alle 17:00, fuso orario del Pacifico, Stati
Uniti. Fuori dagli Stati Uniti, contattare il distributore locale o visitare il sito
[email protected].
BIBLIOGRAFIA
1. Red Book, American Academy of Pediatrics, 28a edizione, (2009) pp. 560–569.
2. Macartney K. et al. Nosocomial Respiratory Syncytial Virus Infections: The Cost-Effectiveness
and Cost-Benefit of Infection Control. Pediatrics, 2000 Sett; 106(3):520–526.
http://pediatrics.aappublications.org/cgi/content/full/106/3/520.
3. Collins P., Chanock R., Murphy B. Fields Virology. Quarta edizione. Volume 1.Chapter 45 –
Respiratory Syncytial Virus. Lippincot Williams and Wilkins (2001).
4. Thompson W. et al. Mortality Associated With Influenza and Respiratory Syncytial Virus in the
United States. JAMA, 2003 gennaio; 289(2):184.
5. Navas L., Wang E. et al. Improved outcome of respiratory syncytial virus infection in a high risk
hospitalized population of Canadian children. Pediatric Investigators Collaborative Network on
Infections in Canada. J Pediatr. 1992 Sett; 121(3):348–54.
6. Moler F.W. et al. Respiratory syncytial virus morbidity and mortality estimates in congenital heart
disease patients: a recent experience. Crit Care Med. 1992 Ott; 20(10):1406–13.
7. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories, 5a edizione. U.S. Department of
Health and Human Services, CDC, NIH, Washington, DC (2007).
Sofia RSV FIA
Pagina 19 di 20
20242 – Sofia RSV FIA – 25 Test
MDSS GmbH
Schiffgraben 41
30175 Hannover, Germania
Quidel Corporation
Sede internazionale
10165 McKellar Court
San Diego, CA 92121, Stati Uniti
quidel.com
1212000IT00 (08/12)
Rappresentante autorizzato nella Comunità
Europea
Numero di catalogo
Controllo positivo
Controllo negativo
Codice lotto
Per uso diagnostico in vitro
Leggere le istruzioni per l'uso
Produttore
Sofia RSV FIA
CD-ROM
Data di scadenza
Limitazione di temperatura
Pagina 20 di 20