ESERCIZIO 2 (6 punti) ESERCIZIO 3 (12 punti) In E. coli, quattro ceppi Hfr donano i marcatori mostrati nell'ordine dato: ceppo 1 ceppo 2 ceppo 3 ceppo 4 Q A B B W X N Q D P C W M T A D T M X M Tutti questi ceppi Hfr derivano dallo stesso ceppo F+. Qual è l'ordine di questi marcatori sul cromosoma circolare dell'F+ originale? Due ceppi auxotrofi di E. coli vengono fatti coniugare. L’incrocio eseguito è: Hfr met- thr- pan- pro+ bio+ his+ X F- met+ thr+ pan+ pro- bio- hisdove le abbreviazioni stanno, rispettivamente, per metionina, 1 treonina, acido pantotenico, prolina, biotina ed istidina. Piastrati su terreno completo, si ottengono le sei colonie illustrate a lato. 3 2 Con la tecnica del replica-plating si eseguono sei copie della 4 piastra madre, su piastre contenenti terreno minimo più i 6 5 nutrienti indicati sotto ciascuna piastra (figure in basso). In base a questi dati determinare il genotipo di ciascun clone. (2 punti per ciascun clone caratterizzato correttamente) RISPOSTA met, thr met, pan thr, pan pro, bio pro, his bio, his RISPOSTA Il ceppo 1 cresce sempre, quindi non ha bisogno di nulla, quindi è genotipicamente selvatico per tutti i geni; il ceppo 2 cresce solo se do CONTEMPORANEAMENTE thr e pan, quindi ha bisogno di entrambi i nutrienti, e non di uno solo; il ceppo 3 cresce solo se do CONTEMPORANEAMENTE met e pan, quindi ha bisogno di entrambi i nutrienti, e non di uno solo; il ceppo 4 cresce su pro/his, ma anche su bio/his (e su nessun altra piastra): questo significa che ha bisogno di his (che è aggiunto in entrambe le piastre) ma non degli altri due; infatti non ha bisogno di bio perché sulla piastra 5 cresce anche senza, e non ha bisogno di pro perché sulla piastra 6 cresce anche senza; per i ceppi 5 e 6 vale lo stesso ragionamento che per il ceppo 4. Quindi: clone 1 2 3 4 5 6 met + + + + + thr + + + + - genotipo del clone pan pro + + + + + + + + + bio + + + + + + his + + + + + QUIZ A RISPOSTA MULTIPLA (1 punto per ogni risposta corretta, una sola risposta è quella esatta) CORSO DI GENETICA - ESONERO 2 (a.a. 2003-2004 - Prof. Piergentili) RISPOSTE In base alle regole di Chargaff, se un campione di DNA contiene il 30% di adenina, quale sarà il suo contenuto di guanina? ¸ 20% q 30% q 40% L’unità di ricombinazione è: q l’allele q una tripletta di basi ¸ una coppia nucleotidica La conseguenza delle traslocazioni è: q pseudo-dominanza q soppressione del crossing-over ¸ semisterilità ESERCIZIO 1 (6 punti) In un esperimento di mappatura per coniugazione sono stati analizzati i geni his, leu, mal e xyl. La coniugazione è stata interrotta dopo 25 minuti e l’analisi del ceppo ricevente ha dato i seguenti risultati: 90% batteri ricombinanti per xyl; 80% batteri ricombinanti per mal; 20% batteri ricombinanti per his; 0% batteri ricombinanti per leu. Determinare la posizione relativa dei geni tra loro (2 punti) e la loro distanza rispetto al sito di origine O del fattore F (1 punto per ciascun gene). RISPOSTA Il DNA si replica in modo: q conservativo ¸ semi-conservativo q non-conservativo I geni più vicini all’origine O sono quelli che, a parità di tempo, si trasferiscono con maggiore efficienza; quindi l’ordine dei geni è: In base agli esperimenti di Avery, MacLeod e McCarty, il fattore trasformante dell’esperimento di Griffith era: ¸ il DNA q le proteine q i lipidi Inoltre, i geni xyl e mal sono molto vicini tra loro, mentre his starà all’altro estremo del frammento trasferito; il gene leu è il più lontano, a una distanza superiore ai 25 minuti, perché non viene mai trasferito. Le distanze, calcolate come percentuale dei minuti dell’esperimento, sono: Completare la seguente affermazione: l’adenina è una _________ e nel DNA si lega ad una __________. ¸ purina, timina q purina, adenina q pirimidina, timina O – xyl – mal – his – leu O – xyl xyl – mal mal – his his – leu 10% 2,5 minuti 10% 2,5 minuti 60% 15 minuti indeterminato xyl è a 2,5 minuti da O mal è a 5 minuti da O his è a 20 minuti da O leu è a più di 25 minuti da O