9-04-2014 Biologia e Biotecnologie “Virtual Labs” di Biotecnologie Ricombinanti GIORNO 1 ! METODICHE DI BASE: ! Laboratorio virtuale di “Estrazione del DNA” ! Laboratorio virtuale di “Elettroforesi del DNA” ! Laboratorio virtuale di “Reazione a catena della polimerasi (PCR)” ! LABORATORIO VIRTUALE DI CLONAGGIO ! Preparazione del vettore e del DNA da clonare ! Trasformazione di batteri “competenti” ! Selezione delle colonie batteriche ricombinanti ! GIOCO: Clonare con un Click 1 9-04-2014 DNA extraction “virtual lab” Gel Electrophoresis “virtual lab” 2 9-04-2014 PCR Virtual Labs DNA Cloning “virtual lab” 3 9-04-2014 DNA Cloning “virtual lab” - II Games: Clonaggio o clonazione ? 4 9-04-2014 I Potenti Mezzi della Postgenomica ! 5 9-04-2014 “Virtual Labs” di Biotecnologie Ricombinanti GIORNO 2 ! IL GENOMA: DNA fingerprinting Virtual Lab ! IL TRASCRITTOMA: ! DNA Microarray Virtual Lab ! IL MICROBIOMA: ! Bacterial identification Virtual Lab ! Microbioma simulator ! GIOCO: Antibiotici contro batteri Distribuzione di sequenze nel genoma umano Genoma Umano 3200 Mb Geni e sequenze correlate 1200 Mb Geni 48 Mb Sequenze correlate 1152 Mb Pseudogeni Frammenti genici Introni, UTR DNA intergenico 2000 Mb Ripetizioni intersperse 1400 Mb LINE 640 Mb SINE 420 Mb Elementi LTR 250 Mb Altre regioni intergeniche 600 Mb Microsatelliti 90 Mb Varie 510 Mb Trasposoni DNA 90 Mb 6 9-04-2014 I MICROSATELLITI 5’-GAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGA-3’ 5’-TATTTATTTATTTATTTATTTATTTATT-3’ ! 1 base 120.000 ! 6 basi 49.000 ! 2 basi 140.000 ! 7 basi 27.000 ! 3 basi 37.500 ! 8 basi 35.500 ! 4 basi 105.000 ! 9 basi 27.500 ! 5 basi 56.000 ! 10 basi 27.500 DNA Fingerprinting Virtual Lab 7 9-04-2014 Microarrays a DNA consentono l’analisi dei “profili di espressione” di tutti i geni del genoma umano 8 9-04-2014 DNA Microarray Virtual Lab Un esempio di analisi del trascrittoma Giovanna D’Agostino Mario Coiro Vincenzo De Simone Luisa de Magistris Michele Olivieri Francesca Bergantino Francesco Vuolo Dipartimento di Medicina Molecolare e Biotecnologie Mediche Università di Napoli “Federico II” 9 9-04-2014 Bacterial Identification Virtual Lab Microbioma Simulator 10 9-04-2014 Gioco: antibiotici contro batteri ! 11 9-04-2014 Laboratorio di Biotecnologie Ricombinanti GIORNO 3 ! ANALISI DEL DNA DEI PARTECIPANTI: ! Estrazione del DNA dalla mucosa orale ! Elettroforesi del DNA estratto ! Assemblaggio di una reazione di PCR ! ANALISI DEL DNA PLASMIDICO ! Digestione del DNA con enzimi di restrizione ! Elettroforesi del DNA digerito ! Analisi dei risultati ! GIOCO: Clonare con un Click 12