Frodi nel settore della pesca Giuseppe Arcangeli Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 • La sostituzione di specie • La vendita di prodotto scongelato per fresco Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 REGOLAMENTO (CE) N. 104/2000 DEL CONSIGLIO del 17 dicembre 1999 relativo all'organizzazione comune dei mercati nel settore dei prodotti della pesca e dell'acquacoltura capo 2 : Informazione dei consumatori a) la denominazione commerciale della specie, b) il metodo di produzione (cattura in mare o nelle acque interne o allevamento), c) la zona di cattura. Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 REGOLAMENTO (CE) N. 2065/2001 DELLA COMMISSIONE del 22 ottobre 2001 che stabilisce le modalità d'applicazione del regolamento (CE) n. 104/2000 del Consiglio per quanto concerne l'informazione dei consumatori nel settore dei prodotti della pesca e dell'acquacoltura Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Decreto del Ministero delle Politiche Agricole Alimentari e Forestali del 31 gennaio 2008 (G.U. n. 45 del 22 febbraio 2008) Denominazione in lingua italiana delle specie ittiche di interesse commerciale Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Denominazione in lingua italiana Abramide Alice indopacifica Aragosta atlantica Aspio Berice rosso Bondella Buccina Calamaro occhigrandi Canestrello bianco Cappa del Pacifico Cappalunga o Cannolicchio Cappalunga o Cannolicchio Carango indopacifico Cernia indopacifica Cernia miniata Chiocciola di scogliera Fieto argenteo Gamberetto Gambero bianco Gambero rosso del Pacifico Gamberone malese Granchio cinese Granchio indopacifico Lingua Lumachino Lumachino Lumacone spinoso Lutiano filamentoso Mazzancolla del Pacifico Mazzancolla tropicale Mazzancolla tropicale Melù australe Genere e specie Abramis brama (Linneo, 1758) Stolephorus indicus (Van Hasselt, 1823) Palinurus charlestoni (Forest e Postel, 1964) Aspius aspius (Linnaeus, 1758) Centroberyx affinis ( Günther, 1859) Coregonus macrophthalmus (Nusslin,1882) Buccinum undatum (Linneo,1758) Loligo ocula (Cohen, 1976) Flexopecten spp. Gari solida (Gray, 1828) Ensis ensis (Linneo, 1758) Ensis siliqua (Linneo, 1758) Alepes djedaba (Forsskål, 1775) Epinephelus retouti (Bleeker,1868) Cephalopholis miniatus (Forsskål, 1775) Littorina spp. Pampus argenteus (Euphrasen, 1788) Palaemon adspersus (Rathke, 1837) Pasiphaea rivado (Risso, 1816) Heterocarpus affinis (Faxon, 1893) Trachypenaeus malaiana (Balss, 1933) Eriocheris sinensis (Milne Edwards, 1853) Portunus trituberculatus (Miers, 1876) Cynoglossus cynoglossus (Hamilton, 1822) Melarhaphe neritoides (Linneo, 1758) Nassarius reticulatus (Jeffreys, 1867) Cassidaria echinophora (Linneo, 1758) Pristipomoides filamentosus (Valenciennes, 1830) Farfantapenaeus californiensis (Holmes, 1900) Farfantepenaeus brevirostris (Kingsley, 1878) Litopenaeus vannamei (Boone, 1931), ex Penaeus vannamei Micromesistius australis (Norman, 1937) Famiglia CYPRINIDAE ENGRAULIDAE DECAPODA CYPRINIDAE BERYCIDAE SALMONIDAE BUCCINIDAE LOLIGINIDAE PECTINIDAE GARIDAE SOLENIDAE SOLENIDAE CARANGIDAE SERRANIDAE SERRANIDAE LITTORINIDAE STROMATEIDAE PALAEMONIDAE PENAEIDAE PANDALIDAE PENAEIDAE GRAPSIDAE DECAPODA CYNOGLOSSIDAE NASSARIIDAE NASSARIIDAE CASSIDAE LUTJANIDAE PENAEIDAE PENAEIDAE LITOPENAEIDAE GADIDAE Ordine CYPRINIFORMES CLUPEIFORMES PALINURIDAE CYPRINIFORMES BERYCIFORMES SALMONIFORMES NEOGASTEROPODA DECAPODA OSTREOIDA VENEROIDA VENEROIDA VENEROIDA PERCIFORMES PERCIFORMES PERCIFORMES MESOGASTEROPODA PERCIFORMES DECAPODA DECAPODA DECAPODA DECAPODA BRACHYURA PORTUNIDAE PLEURONECTIFORMES NEOGASTEROPODAE NEOGASTEROPODAE CAENOGASTEROPODA PERCIFORMES DECAPODA DECAPODA DECAPODA GADIFORMES Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Miro Murice comune Murice del Pacifico Nasello atlantico o Merluzzo atlantico Palombo Passera del pacifico Ombrina atlantica Pesci spatola Rana pescatrice atlantica Razza stellata Scrofanotto Scrofanotto Seppia pizzuta Smeriglio del Pacifico Sogliola adriatica Sogliola egiziana Sogliola indopacifica Squalo portoghese Tordo nero Tordo pavone Totano volante Totano volante Trigone viola Vongola cilena Echelus myrus (Linneo, 1758) OPHICHTHIDAE Bolinus brandaris o Murex brandaris (Linneo, 1758) MURICIDAE Trophon spp. MURICIDAE Patagonotothen ramsay (Regan, 1913) NOTOTHENIIDAE Mustelus canis (Mitchill, 1815) TRIAKIDAE Hippoglossoides elassodon (Jordan e Gilbert, 1880) PLEURONECTIDAE Cynoscion guatucupa (Cuvier, 1830) SCIAENIDAE Polyodontidae spp. POLYODONTIDAE Lophius gastrophisus (Miranda-Ribeiro, 1915) LOPHIIDAE Amblyraja radiata (Donovan, 1808) RAJIDAE Scorphaena notata (Rafisesque, 1810) SCORPAENIDAE Scorpena ustolata (Lowe, 1841) SCORPAENIDAE Sepia orbignyana (Férussac, 1826) SEPIIDAE Lamna ditropis (Hubbs e Follett, 1947) LAMNIDAE Pegusa impar (Bennett, 1831) SOLEIDAE Solea aegyptiaca (Chabanaud, 1927) SOLEIDAE Paraplagusia bilineata (Bloch, 1787) CYNOGLOSSINAE Centroscymnus coelolepis (Barbosa du Bocage e Brito DALATIIDAE Capello, 1864) Labrus merula (Linneo, 1758) LABRIDAE Symphodus tinca (Linneo, 1758) LABRIDAE Ommastrephes bartramii (Lesueur, 1821) OMMASTREPHIDAE Todaropsis eblanae, (Ball, 1841) OMMASTREPHIDAE Pteroplatytrygon violacea (Last e Compagno, 1999) DASYATIDAE Mulinia edulis (King, 1931) MACTRIDAE ANGUILLIFORMES NEOGASTEROPODAE NEOGASTEROPODA PERCIFORMES CARCHARHINIFORMES PLEURONECTIFORMES PERCIFORMES ACIPENSERIFORMES LOPHIIFORMES RAJIFORMES SCORPAENIFORMES SCORPAENIFORMES TEUTHOIDEA SQUALIFORMES PLEURONECTIFORMES PLEURONECTIFORMES PLEURONECTIFORMES SQUALIFORMES PERCIFORMES PERCIFORMES DECAPODA DECAPODA RAJIFORMES VENEROIDA Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Fao-Picture Seafood mag.- Picture Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Le frodi con implicazioni COMMERCIALI Cod….…….e simili Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Molva (ling) Baccalà (cod) Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Regolamento (CE) n. 1332/2005 ELASMOBRANCHII (Squali e razze) Rhincodon typus - Squalo balena Carcharodon carcharias - Squalo bianco Cetorhinus maximus - Squalo elefante Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Le frodi con implicazioni sanitarie Fao -Pictures Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 COMPLESSO UROFORO (estremità colonna vertebrale) Courtesy Dr. C. Pellegrino A: Pesce palla; B: Gallinella; C: Rana pescatrice I.P.: ossa ipurali; P.A.: paraipurale; E.P.: epiurale; N.S.: neurospina; E.S.: ematospina; C: centro vertebrale. Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Maggio 2007 - USA Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 FDA News FOR IMMEDIATE RELEASE P07-91 May 24, 2007 Media Inquiries: 301-827-6242 Consumer Inquiries: 888-INFO-FDA FDA Warning on Mislabeled Monkfish Fish Believed to be Puffer Fish; Contains Deadly Toxin The Food and Drug Administration (FDA) is warning consumers not to buy or eat imported fish labeled as monkfish, which actually may be puffer fish, containing a potentially deadly toxin called tetrodotoxin. Eating puffer fish that contain this potent toxin can result in serious illness or death. Tetrodotoxin is not destroyed by common food preparation or storage, such as cooking or freezing. Monkfish do not contain tetrodotoxin. The product was imported and distributed by Hong Chang Corp., Santa Fe Springs, Calif. Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Pesce balestra (trigger fish) Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 FAUNA LESSEPSIANA – DATI CIESM Alepes djedaba (1927) Apogon nigripinnis (1947) Apogon queketti (2006) Asterina burtoni (1966) Atherinomorus lacunosus (1902) Callionymus filamentosus (1953) Crenidens crenidens (1970) Cynoglossus sinusarabici (1953) Dussumieria acuta (1953) Epinephelus coioides (1969) Epinephelus malabaricus (1969) Etrumeus teres (1963) Fistularia commersonii Fulvia fragilis Ferosagitta galerita (2003) Hemiramphus far (1927) Herklotsichthys punctatus (1976) Himantura uarnak (1955) Hippocampus fuscus (2002) Hyporhamphus affinis (1967) Hypselodoris infucata Lagocephalus sceleratus (2005) Lagocephalus spadiceus (1953) Lagocephalus suezensis (1977) Leiognathus klunzingeri (1931) Leonnates persicus Liza carinata (1971) Lutjanus argentimaculatus (1977) Monishia ochetica (1927) Muraenesox cinereus (1982) Nemipterus randalli (2006) Oxyurichthys papuensis (1983) Pampus argenteus (1896) Papilloculiceps longiceps (1990) Paraexocoetus mento (1935) Pelates quadrilineatus (1970) Pempheris vanicolensis (1979) Petroscirtes ancylodon (1989) Platycephalus indicus (1953) Plotosus lineatus (2002) Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Lagocephalus spadiceus (Pesce coniglio) Origine: Indopacifico > Mar Rosso (dati CIESM) Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Sphoeroides pachygaster (Pesce palla) Origine: Indopacifico > Mar Rosso (dati CIESM) Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Lagocephalus sceleratus Città di Suez: 8 decessi nel 2004 (Zaki e Mossa, 2005) Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Fishbase-picture Fishbase map Lagocephalus sceleratus > SUEZ channel Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Courtesy dr. Maurizio Mambelli – ASL Forlì Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Courtesy dr. Maurizio Mambelli – ASL Forlì Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Fishbase picture Ruvettus pretiosus Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Salpa Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Sigano Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Pesce serra invece di branzino………istamina ! Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 La diagnostica di laboratorio Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Isoelectrofocusing (IEF) - + + - 0 0 + pI: 5.2 ddp pI: 9.0 _ XIPHIAS GLADIUS Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 PCR-based techniques La reazione a catena della polimerasi consente di isolare e moltiplicare frammenti di DNA dei quali si conosca la sequenza delle sue porzioni iniziali e terminali Utilizza un enzima termostabile (Taq polimerasi) in grado di elongare un oligonucleotide di innesco di 18-25 nucleotidi (primer) Ripetizione di 25-35 cicli costituiti ognuno da tre fasi: 1 Denaturazione 2 Appaiamento dei primers 3 Elongazione Le fasi del ciclo sono scandite dalla variazione di temperatura del sistema operata in termociclatori Immagine PCR Reazione esponenziale Alla fine della reazione si avranno milioni di copie della sequenza target di partenza Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Esempio: metodica in uso presso l’IZSVe per l’identificazione di Xiphias gladius Questa metodica prevede l’utilizzo di due coppie di primers: XP1 specifica per X. gladius produce una banda di 211bp CONTROL 12S universale produce una banda di 183 bp Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Esempio: metodica di PCR real-time con sonde Taqman in uso all’IZSVe per identificazione della famiglia dei Gadidi Coppia di primers specifici per un tratto del cyt B di 75 bp della famiglia Gadidae Sonda Taqman di 29 bp marcata al 5′ con Hex (fluoroforo) e al 3′ con TAMRA (quencher) Cicli soglia superiori a 32 vengono considerati negativi Gadus Theragra chalcogramma Merluccidi Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Sequenziamento Ci consente di determinare la sequenza dei nostri amplificati Massimo dell’informazione possibile Viene utilizzata correntemente dal nostro istituto in fase di allestimento di test di identificazione e per conferma in casi dubbi Metodo di elezione per valutazioni di tipo filogenetico Esistono varie metodiche di sequenziamento La più utilizzata è quella che sfrutta la chimica dei terminatori dideossi con separazione tramite elettroforesi capillare in sistemi automatizzati (500-600bp) Questo metodo è laborioso, costoso e operato in apparati molto costosi Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Pyrosequencing E`una tecnica di sequenziamento per sintesi che sfrutta una cascata enzimatica perfettamante sincronizzata Permette di sequenziare in modo accurato frammenti di DNA lunghi fino 80-100 bp Consente di determinare la similarità delle sequenze ottenute con quelle presenti in un data-base locale Metodo veloce, con costi per campione limitati e operato in un apparato di costo “ragionevole” Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 “Metodi per differenziare pesce fresco e pesce decongelato e loro utilizzo ai fini del controllo ufficiale” Elena Teneggi, Luca Fasolato, Emanuele Cencetti, Franco Mutinelli Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 METODI PER IDENTIFICARE IL PRODOTTO DECONGELATO Esame Sensoriale Aspetto esteriore Esame organolettico Esami di Laboratorio (Fisiologici; Chimici; Fisici) Istologia (emolisi; alterazione fibre muscolari) Attività enzimatica (cellulari e mitocondriali) Metodi impedenzometrici (Fish Tester; Torrymeter) Metodi spettroscopici (NIRs; Fluorescenza) Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Metodiche in prova Metodi rapidi di screening Spettroscopia a Fluorescenza nell’Ultravioletto Spettroscopia nel vicino infrarosso (NIRs; near infrared reflectance spectroscopy) Metodo di Conferma Analisi istologica del tessuto muscolare Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 TECNICA ISTOLOGICA La prova istologica su tessuto muscolare permette di osservare nel tessuto sottoposto a congelamento caratteristiche lesioni istologiche (es. vacuoli) determinate dalla formazione dei cristalli di ghiaccio nell’interno delle fibre muscolari : Alterazioni a spazi cistici all’interno delle fibre Presenza di materiale amorfo eosinofilico Colorazione con ematossilina/eosina, una delle più comuni in laboratorio: l'ematossilina, basica, colora il nucleo in blu, l'eosina, acida, colora il citoplasma in rosa. Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Fresco Congelato Congelato Congelato Branzino Fresco Congelato Congelato Congelato Nasello TECNICA NIRS La tecnica NIRS ( Near Infrared Reflectance Spectroscopy) viene oggi suggerita quale metodica rapida ed economica per: Caratterizzazione della qualità e freschezza Determinazione del valore nutrizionale Ausilio alla Tracciabilità e Autenticazione di prodotto Essa sfrutta la capacità dei composti organici di interagire con la radiazione luminosa (capacità di assorbire, trasmettere e riflettere la radiazione elettromagnetica) del vicino infrarosso e di correlarla a specifici parametri chimici, reologici e sensoriali. Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Media degli spettri NIRs orata 2.5 absorbance 2 1.5 fresco congelato 1 0.5 2480 2408 2336 2264 2192 2120 2048 1976 1904 1832 1760 1688 1616 1544 1472 1400 1328 1256 1184 1112 1040 968 896 824 752 680 0 wavelenghts Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 Spettroscopia a fluorescenza La tecnica spettroscopica a fluorescenza nell’ultravioletto è stata brevettata principalmente per: Determinazione della tenerezza della carne Caratterizzazione della freschezza del pesce Ausilio alla Tracciabilità e Autenticazione di prodotto E’ un metodo non invasivo che fornisce informazioni sulle molecole fluorescenti (Fluorofori es. Triptofano, aminoacidi aromatici, acidi nucleici), presenti nei campioni biologici, la cui potenzialità discriminante, nel caso in esame, è stata attribuita allo spettro di fluorescenza del NADH (nicotinamide adenindinucleotide). Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 VANTAGGI E SVANTAGGI Istologia VANTAGGI Metodica consolidata Largamente applicabile a molti laboratori Alterazioni evidenti SVANTAGGI Tempi Sostanze tossiche Addestramento operatore Valutare eventuali differenze di specie Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 VANTAGGI E SVANTAGGI Tecniche Spettroscopiche VANTAGGI Tempi rapidi Poca o nessuna preparazione del campione Brevetti trasportabili Le performance aumentano all’aumentare di N SVANTAGGI Elaborazione e studio dei dati Costo della strumentazione da laboratorio Necessitano di curve standard (alto numero di campioni standard) Valutare eventuali differenze di specie Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 CONCLUSIONI Mettere a punto un sistema sensibile (in grado di identificare con sicurezza i campioni positivi) e specifico In grado di escludere con sicurezza i campioni negativi Valutare l’utilizzo di tecniche di screening in abbinato a tecniche di conferma, specie su campioni reputati dubbi. Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009 GRAZIE ! [email protected] Fao-Picture Le frodi alimentari: aspetti tecnici e giuridici – Rovigo – 5 giugno 2009