INTRODUZIONE ALLE MICROBILANCE A CRISTALLI DI QUARZO (QCM) Laurea Magistrale in Biotecnologie molecolari ed industriali Università degli Studi di Napoli “Federico II” SENSORE: DEFINIZIONE • Un sensore converte una forma di energia in un’altra, e nel fare ciò trasferisce informazioni riguardo alcuni fenomeni fisici, chimici o biologici. • Misurando (quantità da misurare) Segnale che porta l’informazione (in genere elettrico) SENSORI, ATTUATORI E TRASDUTTORI Grandezza qualsiasi TRASDUTTORE SENSORE Grandezza qualsiasi Grandezza elettrica ATTUATORE SENSORI, ATTUATORI E TRASDUTTORI: QUALCHE ESEMPIO • Termometro a mercurio – Temperatura Lunghezza – Non è un sensore! • Termometro digitale – Temperatura – È un sensore! Resistenza elettrica BIOSENSORI • “A biosensor is a device incorporating a biological sensing element either intimately connected to or integrated within a transducer. The usual aim is to produce a digital electronic signal which is proportional to the concentration of a specific chemical or set of chemicals.” (Turner 1987 "Biosensors: fundamental and applications”). • Necessità di collegare diverse conoscenze: - Biologia Elementi biologici sensibili - Chimica Funzionalizzazione delle superfici - Ingegneria Integrazione delle componenti e fluidica - Fisica Principi di trasduzione e funzionamento del dispositivo 4) SATURAZIONE 100 VALORE IN USCITA 3) REGIONE NON LINEARE 80 60 2) REGIONE LINEARE 40 20 1) REGIONE NON LINEARE 0 0 20 40 60 Misurando 80 100 PRINCIPALI CARATTERISTICHE DI UN SENSORE • Sensibilità - Nella regione lineare: ∆V/∆M • Limit Of Detection (LOD) - S/N=3 • Selettività - Biomolecole QUARTZ CRYSTAL MICROBALANCE (QCM) • Wafer di oro e quarzo • Effetto piezoelettrico inverso EFFETTO PIEZOELETTRICO • Proprietà di alcuni materiali cristallini di generare una differenza di potenziale quando sono soggetti a deformazione meccanica. • Effetto diretto e inverso • Esempi: – Orologi al quarzo – Puntine di giradischi FUNZIONAMENTO DELLE QCM Equazione di Sauerbray LE QCM SONO TRASDUTTORI MICROGRAVIMETRICI Pompa peristaltica µLibra DUE ESEMPI DI SENSORI BASATI SU QCM • INORGANICO: Sensore per la rivelazione di L-Istidina basato su MIP (Molecularly Imprinted Polymer) • ORGANICO: Immunosensore basato su anticorpi (IgG) attivati mediante luce UV TECNOLOGIA SOL-GEL • Alcossidi del silicio + Alcool corrispondente +Acqua • Tecnica usata per produrre nanoparticelle e vetro bioattivo a temperatura ambiente • Strategia dei polimeri molecolarmente impressi • A CONTROLLO • B IMPRESSO • La regione di linearità va da 5.0 · 10-8 a 1.0 · 10-4 M • Detection limit 2.5 · 10-8 M (S/N = 3) PHOTONIC IMMOBILIZATION TECHNIQUE (PIT) UV laser pulses λ 258 nm 0.25 W 10 kHz 350 irradiated not-irradiated 300 f (Hz) 250 200 150 100 50 0 0 10 20 30 40 IgG concentration (mg/mL) 50