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DNA
fingerprinting
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DNA fingerprinting
E’ un metodo di identificazione che
consiste nel comparare DNA provenienti
da individui diversi al fine di metterne in
risalto le similitudini
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DNA fingerprinting
Letteralmente:
“impronta digitale del DNA”
...sottolinea la caratteristica di unicità
del DNA :
•DNA diverso per individui diversi
•DNA uguale fra 2 individui SOLO se questi
sono gemelli monozigoti identici
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IL DNA
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Utilizzi storici della tecnica
(analisi del polimorfismo RFLP)
 STUDI EVOLUZIONISTICI
 STUDI MEDICI
 MEDICINA FORENSE
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Scopo dell’esperienza
Riprodurre un’indagine della polizia scientifica, nel
corso della quale il materiale rinvenuto sulla scena
del delitto viene confrontato con quello di alcuni
sospettati, tra cui va individuato il colpevole.
A scopo didattico utilizzeremo come fonte di
materiale da analizzare il DNA plasmidico.
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Il plasmide
DNA circolare a
doppio filamento
autoreplicante
ereditato in forma
extracromosiomiale
si trova in tutti i
procarioti reca
vantaggio ambientale
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LA TECNICA
Digestione: frammentazione del campione di DNA
ad opera degli enzimi di restrizione.
Elettroforesi: separazione dei frammenti di
DNA in funzione delle loro dimensioni.
Colorazione: dei frammenti di DNA e loro
osservazione
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Enzimi di restrizione
E.R.
In natura fanno
parte dell’arsenale
difensivo
procariotico contro
i fagi, sono:
•sito specifici
•dna specifici
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Digestione
L’E.R. taglia
entrambi i
filamenti di DNA
interrompendo i
legami tra lo
zucchero e il
fosfato.
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LA TECNICA
Digestione: frammentazione del campione di DNA
ad opera degli enzimi di restrizione
Elettroforesi: separazione dei frammenti di
DNA in funzione delle loro dimensioni
Colorazione:
dei frammenti di DNA e loro osservazione
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ELETTROFORESI
Frammenti di DNA sottoposti a
•campo elettrico
•setaccio molecolare
vengono separati in base alle loro dimensioni
• Gel all’1% di agarosio
• Agarosio estratto dalle alghe Agar Agar
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Immagine del gel d’agarosio
Tecnica utilizzata
per separare
molecole di DNA in
base alle loro
dimensioni.
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Corsa elettroforetica
La migrazione dei frammenti di DNA avviene in
campo elettrico.
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Apparato elettroforetico
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LA TECNICA
Digestione: frammentazione del campione di DNA
ad opera degli enzimi di restrizione
Elettroforesi: separazione dei frammenti di DNA
in funzione delle loro dimensioni
Colorazione: dei frammenti di DNA e loro
osservazione
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Colorazione
ETIDIO BROMURO
BIOSAFE
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Osservazione: chi è il colpevole
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