UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Tecniche Innovative per la Valorizzazione della Frazione Antiossidante in Matrici AgroAlimentari Bahar Aliakbarian Dicembre 2007 Tecniche Innovative per la Valorizzazione della Frazione Antiossidante in Matrici Agro-Alimentari Olio 16,5-23,5% Mesocarpo (polpa) 70-80% frazione insaponificabile Idrocarburi 50-60% Epicarpo (buccia) Endocarpo (nocciolo) 1,5-3,5% 15-28% Introduzione Alcoli 20-35% Polifenoli 18-35% Steroli 2-3% Obiettivo e Prove Sperimentali frazione saponificabile Tocoferoli 2-3% Altre sostanze Trigliceridi Acidi grassi Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Importanza delle sostanze fenoliche •Cardio-vascolari •Oncologiche •Invecchiamento precoce •Degenerative del sistema nervoso •Altre patologie legate alla presenza dei radicali liberi e ai loro effetti Degenerativi •Effetto protettivo anche nei confronti della (shelf-life) dell’olio •Qualità sensoriale come il gusto amaro e sensazione di pungente Introduzione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria World O live O il Consumption (*1000 metric tone) World O live O il Production (*1000 metric tone) 3,50 3,50 3,00 3,00 2,50 2,50 2,00 2,00 1,50 1,50 1,00 1,00 0,50 0,50 0,00 0,00 1990-91 1995-96 1996-97 2003-04 2004-05 2005-06 1990-91 1995-96 1996-97 2003-04 2004-05 2005-06 World Olive Consumption 2006 Other 26% Italy 30% Syria 3% France 4% Introduzione USA 8% Greece 9% Spain 20% Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Quantità Obiettivo Resa Polifenoli (TP) Qualità O-difenoli (OD) Potere antiossidante (ARP) Introduzione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Pasta di oliva (denocciolata) Uvazym 1000 Extra (A) Enzima Coadiuvante biologico Gramolatura 30°C Maxoliva (B) Uvazym 1000 Couleur (C) Centrifugazione Acido citrico Olio mosto Sansa Centrifugazione Olio di oliva Introduzione Acqua di vegetazione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria I parte Effetto di attività enzimatica e concentrazione Variabile dipendente Variabile indipendente TP Formulazione enzimatica A B C OD X (mL/kgpasta) 5 10 15 Livelli ARP Introduzione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria II parte Effetto di tempo di gramolatura e il concentrazione enzimatica Variabile dipendente Variabile indipendente TP t (min) 30 90 150 OD X (mL/kgpasta) 5 15 25 Livelli ARP Y Introduzione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria III parte Effetto di tempo di gramolatura e il concentrazione di ac.citrico Variabile dipendente Variabile indipendente TP t (min) 30 60 90 OD X (mL/kgpasta) 5 10 15 Livelli ARP Y Introduzione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Effetto di differenti formulazione enzimatici (A, B e C) e livelli sul TP, OD, ARP y = 0,0648x - 22,095 R2 = 0,9418 1000 25 15 35 600 400 A B 200 600 10 700 5 800 Enzym e level (m L/kg TP paste (mg)caffeic acid /goil ) Introduzione 2 R = 0,9398 80 60 15 15 500 y = 0,6729x - 32,925 100 25 800 0 5 ARP (m g DPPH /m lextract) OD (mgcaffeic acid/goil) m gcaffeic acid /goil ARP (m g Dpph /m lextract) 35 C Cont rol 900 1000 40 A 20 5 65 B 0 15 75 10 85 C Control 95 5 OD (mgcaffeic acid /goil ) Enzyme level (mL/kgpaste) Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Effetto di miscele binarie e ternarie di formulazione enzimatica sul TP, OD Formulazione enzimatica (mgcaffeic acid/goil) Incremento di TP (%) (mgcaffeic acid/goil) Incremento di OD (%) A:B:C 804,3 40 97,69 37 A:B 786.3 37 87.77 23 A:C 723.3 26 83.15 17 B:C 690.9 20 82.20 15 A 740.6 29 86.17 21 B 705.6 23 82.75 16 C 686.4 19 78.77 10 Control 575.1 - 71.31 - Introduzione TP OD Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Effetto di concentrazione di miscele ternarie enzimatica (X) e tempo di gramolatura (t) sul TP, OD, ARP e Y 150 OD ( m g/golio) TP ( m g/golio) 800 600 400 100 50 200 0 30 60 t (min) 90 5 25 90 15 120 t (min) X (ml/kg pasta) 40 5 150 X (ml/kg pasta ) Y (g/100g) 20 30 20 10 15 10 5 0 0 30 t (min) 30 60 90 25 t (min) 60 90 15 120 150 Introduzione 60 15 120 150 ARP (mg dpph/ml estr) 30 25 5 25 120 15 150 5 X (ml/kg pasta) X (ml/kgpasta) Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Ottimizzazione del Processo METODOLOGIA DELLE SUPERFICI DI RISPOSTA (RSM) Variabili codificate xi ( X * X i i X i • xi: valore codificato della i-esima variabile • Xi: valore NON codificato della i-esima variabile • Xi*: valore NON codificato della i-esima variabile nel punto centrale • Xi: passo della variabile i-esima Introduzione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria RSM y = b0 + b1x1 + b2x2 + b11x12 + b22x22 + b12x1x2 • y : variabile di risposta • b0: intercetta Student’s t-test • b1 e b2 : coefficienti lineari • b11 e b22 : coefficienti quadratici • b12: coefficiente di interazione Fisher test • x1 e x2 : variabili indipendenti Introduzione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Polifenoli totali R2=0.9528 Y1 717.30 12.39 x1 126.70 x2 120.00 x12 Introduzione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria o-difenoli totali R2=0.9430 Y1 84.43 3.17 x1 22.69 x2 11.56 x12 13.59 x22 Introduzione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Potere antiossidante R2=0.9684 Y1 24.41 2.49 x1 0.61x2 4.53x12 0.70 x1 x2 Introduzione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Resa di estrazione R2=0.8368 Y1 14.91 1.88x1 0.75x2 Introduzione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Ottimizzazione grafica X (mL/kgpaste) 25 X (mL/ kgpaste ) TP = 855.60 mgCAE/goil OD = 128.40 mgCAE/goil ARP = 25.28 mgDPPH/mLextract Y = 15.45 goil/100gpaste t = 92.00 min X = 24.68 mL/kgpaste 20 TP = 800mgCAE/goil OD = 100mgCAE/goil ARP = 24 mgDPPH/mLextract 15 Y = 15 goil/100gpaste 10 5 60 75 90 115 120 t (min) Introduzione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Conclusione Un aumento di t nell’intervallo 30-90 min comporta un incremento di TP, OD ed ARP; Per t > 90 min l’innesco di fenomeni ossidativi causa ingenti perdite qualitative; Un incremento di X comporta forti aumenti di TP ed OD, indipendentemente da t, e dell’ARP, per 30 < t < 90 min; Per incrementare Y occorre operare aumentando sia t che X; Le metodologie statistiche si sono dimostrate un utile strumento per ottimizzare il processo oggetto dello studio. Introduzione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Effetto di concentrazione di acido citrico (X) e tempo di gramolatura (t) sul pH, TP, OD e ARP 1,0 0,8 25 20 0,6 y = 0,0655x - 14,078 0,4 R2 = 0,8729 0,2 0,0 10 60 10 90 t (min) 5 X (mL/kg paste ) 400 450 500 550 600 TP (mg caffeico /g olio ) 800 600 OD (mg CAE/g oil) 400 200 15 0 10 90 t (min) control 60 X (mL/kg paste) 700 750 100 80 60 40 20 0 30 5 30 Introduzione 650 t (min) 60 Obiettivo e Prove Sperimentali 90 15 350 10 5 0 300 TP (mg CAE/g oil) 15 30 5 15 control 30 pH ARP (m gDPPH /m lextract ) 35 X (mL/kg paste) Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Conclusione Le migliori condizione operative risultano : t = 30 min e X = 10 mL/kgpaste In queste condizioni si verifica un aumento del 38%, 30% e 51% sul TP, OD e ARP, rispetto all’olio proveniente dal processo standard Utilizzando questo tipo di coadiuvante con le proprità antiossidante e in seguito conservante diminuisce il costo di produzione dell’olio di oliva Introduzione Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI GENOVA Facoltà di Ingegneria Prospettive per futuro Study the effect of high pressure CO2 and enzyme on the oil and phenolic extraction efficieny of the olive oil industrial residues Introduzione Lavori scientici • De Faveri, D., Torre, P., Aliakbarian, B., Domínguez, J.M., Perego, P., & Converti, A. (2007). Response surface modeling of vanillin production by Escherichia coli JM109pBB1. Biochemical Engineering Journal, 36(3), 268-275 • De Faveri, D., Aliakbarian, B., Avogadro, M., Perego, P., & Converti, A. Improvement of olive oil phenolics content by means of enzyme formulation: effect of different enzymatic activities and concentrations. Biochemical Engineering Journal, under revision • Aliakbarian, B., De Faveri, D., Converti, A., & Perego, P. Optimization of olive oil extraction by means of enzyme processing aids using response surface methodology. Journal of Food Engineering, submitted Obiettivo e Prove Sperimentali Risultati e Discussione