Una breve presentazione della nostra esperienza
“Esercizi di Genotipizzazione”
presso i laboratori Fondazione Rita-Levi-Montalcini,
nell’ambito del progetto Genetica e DNA-Bioform
12 aprile 2012
PROGETTO BIOFORM 2012
PRESENTAZIONE
Dopo un lavoro di approfondimento su alcune tematiche di Genetica
necessario per una preparazione adeguata alla esercitazione del 12 aprile
2012 presso la Fondazione Rita-Levi-Montalcini, siamo pronti per iniziare
l’esperienza.
L’esperienza consiste nell’esaminare l’inserzione Alu nel locus PV92, sul
cromosoma 16.
Vi sono due varianti con o senza Alu e quindi tre possibili genotipi nel locus
PV92 :
omozigoti + +
eterozigoti + ‐
omozigoti ‐ ‐
Alcuni momenti delle varie fasi sperimentali.
La determinazione del genotipo PV92 viene effettuata applicando la tecnica
della PCR (Polymerase Chain Reaction).
Con questa tecnica, si amplifica milioni di volte uno specifico frammento di
DNA genomico, così riusciamo ad isolarlo dal suo contesto.
Possiamo distinguere gli alleli + e ‐, differenti per grandezza, grazie
all’elettroforesi su gel di agarosio.
Questa tecnica analitica e separativa è basata sul movimento di particelle
elettricamente cariche immerse in un fluido per effetto di un campo
elettrico. Maggiore è la massa del frammento, minore sarà la mobilità.
L’individuazione del genotipo sara’ possibile in base al differente peso del
DNA, quello contenente Alu PV92 sara più pesante e quindi in ritardo
rispetto agli altri.
Il primo pozzetto contiene un marker (MK) a peso molecolare noto; gli altri
(1 – 22) contengono il DNA di ogni singolo studente.
Dalla nostra analisi abbiamo ottenuto i seguenti risultati:
Peano-Monterotondo
Nome Scuola
Data esperimento
Studenti
studente 1
studente 2
studente 3
studente 4
studente 5
studente 6
studente 7
studente 8
studente 9
studente
10
studente
11
studente
12
studente
13
studente
14
studente
15
studente
16
studente
17
studente
18
studente
19
studente
20
studente
21
studente
22
Totale
studenti
30
12/04/12
Reazione
riuscita?
Allele +
(presenza
di ALU nel
locus
PV92)
Allele (Assenza di
ALU nel
locus PV92)
Omozigote
-/-
Omozigote
+/+
Eterozigote
+/- e -/+
si
si
si
si
si
si
si
si
si
1
0
0
1
1
0
1
0
0
1
2
2
1
1
2
1
2
2
0
1
1
0
0
1
0
1
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
0
0
1
1
0
1
0
0
si
0
2
1
0
0
si
1
1
0
0
1
si
1
1
0
0
1
si
0
2
1
0
0
si
0
2
1
0
0
no
0
0
0
no
0
0
0
si
0
2
1
0
0
si
0
2
1
0
0
si
0
2
1
0
0
si
1
1
0
0
1
si
1
1
0
0
1
si
1
1
0
0
1
Totale
omozigoti
+/+
Totale
eterozigoti
-/+ e +/-
0
9
Totale
Totale
Totale alleli Totale alleli
omozigoti Studenti
+
/con rezione
riuscita
9
31
11
20
percentuale percentuale percentuale
percentuale percentuale
omozigoti - omozigoti
eterozigoti
alleli +
alleli /+/+
+/- e -/+
23%
78%
55%
0%
45%
Note
percentuali di alleli nella classe
23%
78%
percentuale alleli +
percentuale alleli -
Percentuali di omozigoti ed
eterozigoti nella classe
45%
55%
percentuale omozigoti -/-
percentuale omozigoti +/+
percentuale eterozigoti +/- e -/+
La discussione finale ci ha ulteriormente aiutato a chiarire i nostri dubbi e
curiosità inerenti al lavoro svolto.
Abbiamo infine ricevuto degli attestati di partecipazione
Un ringraziamento alla nostra Scuola che ci ha permesso questa
interessante esperienza!
