UNIVERSITÀ DEGLI STUDI DI BARI ALDO MORO SCUOLA DI SPECIALIZZAZIONE IN - FISIOPATOLOGIA DELLA RIPRODUZIONE DEGLI ANIMALI DOMESTICI Direttore: Prof. Giovanni Michele Lacalandra DIDATTICA DEL II/III ANNO http://www.uniba.it/scuole-specializzazione/fisiopatologia-riproduzione-animale/didattica Disciplina: BiotecnologieinRiproduzioneAnimale. Docente: Prof.ssa Maria Elena Dell’Aquila Dipartimento: Dipartimento: dell’Emergenza e dei Trapianti D’Organi (DETO) Strada Prov. per Casamassima km 3, 70010 Valenzano (BA) Tel.: +39 0805443888 fax: +39 0805443883 e-mail: [email protected] PROGRAMMA: ParteI(Lezionifrontali–Partegenerale) Introduzioneallebiotecnologieriproduttiveeloroimpattosull’incrementodelleproduzioni animali. Follicologenesieovogenesi.Regolazioneormonaleedelementidiinduzionedella superovulazionefollicolare.Aspettisperimentaliedapplicativineglianimalidareddito. Spermatogenesiesuaregolazioneormonale.Analisimacroscopiche,microscopichee computerizzatedellaqualitàdelseme(concentrazione,vitalità,motilità,morfologia, capacitazioneereazioneacrosomiale,integritàdellacromatinaspermaticaeapoptosi). Produzionediembrioniinvitro.Recupero,selezioneematurazioneinvitrodell’ovocita; Fecondazioneinvitro;Colturadell’embrioneinvitronellefasireimpianto;Trasferimentodi embrioni).Efficienzaerisultatiattualidelleprocedurediproduzionediembrioniinvitro neglianimalidareddito.Ovumpick‐up:prelievoinvivodegliovocitiperlaproduzionedi embrioniinvitro. Tecnologiedimicrofertilizzazioneassistita.ApplicazionidellatecnicaICSI(Intracytoplasmic sperminjection)neglianimalidomestici. Crioconservazionediovocitiedembrioni. ParteII(Lezionifrontali‐ParteSpecialistica) Criteriperlavalutazionedellaqualitàdiovociti(Polscope),spermatozoi(SpermCASASystem eCitofluorimetria)edembrioni(softwaresperanalisimorfometrica).Risultatiattualidell’ICSI piezo. ApplicazionidelletecnologieOMICHE(GenomicaedellaProteomicaallostudiodella competenzameioticadell’ovocitaedellosviluppoembrionalepre‐impianto.Analisidelle differenzenell’espressionegenicadiovocitimaturatiinvivo/vitroedembrioniprodottiin vivo/vitro. Crioconservazioneetrapiantoditessutoovaricoetesticolareecolturainvitrodelfollicolo preantrale. Statodell’artedellaricercainmodellianimali. Manipolazioniembrionali: Diagnosisull’embrionepreimpianto,biopsiaembrionale,sessaggio,diagnosidisbilanciamenti cromosomici,identificazionediungenepatologico,diagnosisuglobulipolariprelevatipost‐ fertilizzazione. Manipolazionifinalizzatealmiglioramentodellaqualitàembrionaria:rimozionediframmenti citoplasmatici.Hatchingassistito.Innercellmass(ICM)transfer. Manipolazioniembrionalifinalizzateallaproduzionedicopiemultiple.Cloninganimale medianteSCNT.Statodell’arteinspeciedalaboratorioezootecniche. Produzionedianimalitransgenicieclonatitransgenici.Finalitàlegatealleproduzionianimali. Embryonicstemcells(ESC)eFetal‐derivedmesenchymalstemcells(MSC).Metodologiee traguardiinmodellianimali. ParteIII(Esercitazionidilaboratorio): IntroduzionepraticaallaboratoriodiBiotecnologieriproduttive;prelievoematurazionein vitrodegliovociti. Scongelamentoevalutazionedellaqualità(vitalità,motilitàeconcentrazione)degli spermatozoi. Capacitazioneinvitrodelsemeefertilizzazioneinvitrocontecnicaconvenzionale(IVF)e micromanipolativa(ICSI). Colturaembrionaleinvitroevalutazionedellamorfologiaembrionale. Metodichediimmunofluorescenzaapplicatealcomplessocumulo‐ovocita,spermatozoied embrioni. TESTI DI CONSULTAZIONE GordonI.(2003)Invitroproductionofcattleembryos.CABInternational,Dublin,UK PinkertC.A.(2002)AssistedReproductiveTechnologiesandEmbryoCultureMethods forFarmAnimals.InTransgenicAnimaltechnology.Alaboratoryhandbook.Academic Press,LondonUK.513‐568. Articolidarivistescientifichedelsettoreconsigliatieconsegnatiacuradeldocente. FILE PRESENTAZIONI PWT: download dal sito web della Scuola.